[發明專利]具有內切葡聚糖酶活性的多肽和編碼該多肽的多核苷酸

無效

• 申請號: 201310407021.0
• 申請日: 2007-03-09
• 公開（公告）號: CN103740674A
• 公開（公告）日: 2014-04-23
• 發明（設計）人: 保羅.哈里斯;克里斯琴.B.R.M.克羅;埃琳娜.弗拉森科;索倫.F.拉森
• 申請（專利權）人: 諾維信股份有限公司;諾維信公司
• 主分類號: C12N9/42
• 分類號: C12N9/42;C12N15/56;C12N15/63;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N5/10;C12P19/14
• 代理公司: 北京市柳沈律師事務所 11105
• 代理人: 封新琴

1.具有內切葡聚糖酶活性的分離的多肽，其選自下組中的一種或多種：

(a)包含氨基酸序列的多肽，所述氨基酸序列與SEQ?ID?NO:10或SEQ?ID?NO:4的成熟多肽具有至少80%同一性，與SEQ?ID?NO:6的成熟多肽具有至少85%同一性，或與SEQ?ID?NO:8的成熟多肽具有至少75%同一性；

(b)由多核苷酸編碼的多肽，所述多核苷酸在至少高嚴緊條件下與以下雜交：(i)SEQ?ID?NO:9、SEQ?ID?NO:3、SEQ?ID?NO:5、或SEQ?ID?NO:7的成熟多肽編碼序列，(ii)包含于SEQ?ID?NO:9或SEQ?ID?NO:3的成熟多肽編碼序列中的cDNA序列，或包含SEQ?ID?NO:5或SEQ?ID?NO:7的成熟多肽編碼序列的基因組DNA序列，或(iii)(i)或(ii)的全長互補鏈；

(c)由多核苷酸編碼的多肽，所述多核苷酸與SEQ?ID?NO:9或SEQ?ID?NO:3的成熟多肽編碼序列具有至少80%同一性，與SEQ?ID?NO:5的成熟多肽編碼序列具有至少85%同一性，或者與SEQ?ID?NO:7的成熟多肽編碼序列具有至少75%同一性；和

(d)變體，其包含取代、缺失和/或插入一個或幾個氨基酸的SEQ?ID?NO:10、SEQ?ID?NO:4、SEQ?ID?NO:6或SEQ?ID?NO:8的成熟多肽。

2.權利要求1的多肽，所述多肽由下述質粒中所含的多核苷酸編碼：包含在大腸桿菌NRRL?B-30900N中的質粒pPBCel5C，包含在大腸桿菌NRRL?B-30902中的質粒pCIC161，包含在大腸桿菌NRRL?B-30903中的質粒pCIC453，或者包含在大腸桿菌NRRL?B-30904中的質粒pCIC486。

3.權利要求1或2的多肽，其中所述成熟多肽是SEQ?ID?NO:10的氨基酸25至421，SEQ?ID?NO:4的氨基酸17至389，SEQ?ID?NO:6的氨基酸16至397，或SEQ?ID?NO:8的氨基酸22至429。

4.分離的多核苷酸，其包含編碼權利要求1-3中任一項的多肽的核苷酸序列。

5.核酸構建體，其包含權利要求4的多核苷酸，所述多核苷酸與一個或幾個調控序列可操作地連接，所述調控序列指導多肽在表達宿主中產生。

6.重組表達載體，其包含權利要求5的核酸構建體。

7.重組宿主細胞，其包含權利要求5的核酸構建體。

8.用于產生權利要求1-3中任一項的多肽的方法，其包括：(a)在有益于所述多肽產生的條件下培養包含核酸構建體的宿主細胞，所述核酸構建體包含編碼所述多肽的核苷酸序列；和(b)回收所述多肽。

9.降解或轉化含纖維素物質的方法，其包括：用組合物處理含纖維素物質，所述組合物包含有效量的權利要求1-3中任一項的具有內切葡聚糖酶活性的多肽。

10.產生物質的方法，其包括：(a)用組合物糖化含纖維素物質，所述組合物包含有效量的權利要求1-3中任一項的具有內切葡聚糖酶活性的多肽，(b)用一種或多種發酵微生物發酵步驟(a)的糖化的含纖維素物質；和(c)從發酵中回收所述物質。