[發(fā)明專利]生鮮牛乳的色譜指紋圖譜制備方法及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310404285.0
• 申請日: 2013-08-31
• 公開（公告）號: CN103698415A
• 公開（公告）日: 2014-04-02
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張福金;張欣昕;姚一萍;侯德坤;李國銀;馮小惠;連海飛;任超;莎那
• 申請（專利權(quán)）人: 內(nèi)蒙古農(nóng)牧業(yè)科學院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種生鮮牛乳的色譜指紋圖譜制備方法，其特征在于，選自液相色譜質(zhì)譜法和氣相色譜質(zhì)譜法中的一種，所述液相色譜質(zhì)譜法包括步驟(1)待測樣品提取和步驟(2)測試圖譜生成，所述步驟(1)待測樣品提取包括：

1)待測樣品上清液制備：稱取牛奶樣品于聚乙烯離心管內(nèi)，加入溶劑1，再加入氯化鈉，渦旋混勻，超聲離心，取全部上清液至另一支離心管內(nèi)，同時加入脫水劑和吸附劑，渦旋振蕩再離心，取上清液備用；

2)樣品提純：移取全部上清液濃縮至近干，以溶劑2溶解，過濾膜后，上液相色譜質(zhì)譜儀測試(LCMS)。

2.根據(jù)權(quán)利要求3的生鮮牛乳的色譜指紋圖譜制備方法，其特征在于1)所述溶劑1為乙腈，所述脫水劑為無水硫酸鈉，所述吸附劑為C-18，2)所述溶劑2為乙腈-水溶液，所述1)待測樣品上清液制備，所述樣品用量2.0～4.0ml，所述乙腈用量為20ml，所述NaCl用量為2.0～4.0g，所述無水硫酸鈉用量為0.5～1.5g，所述C-18用量為150～600mg，2)所述濃縮為旋蒸瓶中旋轉(zhuǎn)減壓低溫濃縮。

3.根據(jù)權(quán)利要求2的生鮮牛乳的色譜指紋圖譜制備方法，其特征在于，(2)所述測試圖譜生成方法如下：a.電噴霧正離子模式(ES+)，全掃描質(zhì)量范圍100-1000mu，毛細管電壓3.0kV，源溫100℃，脫溶劑氣溫度450℃，脫溶劑氣流速550L/hr，反吹氣流速300L/hr，電離電壓25V；進樣量10ul，色譜柱BEH?C18柱(2.1*50mm，1.7um)。

4.根據(jù)權(quán)利要求3的生鮮牛乳的色譜指紋圖譜制備方法，其特征在于，(2)所述測試圖譜生成方法，分析條件為，梯度洗脫，所述梯度洗脫流動相選自乙腈、乙腈-0.1％甲酸水溶液(梯度)、乙腈-0.1mmol/L乙酸銨水溶液中的一種；流速0.15～0.5ml/mim，上機溶樣劑選自乙腈和乙腈-水(1∶1)，所述梯度洗脫采用的洗脫條件為梯度洗脫條件為：流速0.12～0.5ml/min；洗脫流動成分相配比為0.1％甲酸水溶液：乙腈為95∶5～5∶95，總分析時間0.25～14min，所述氣相色譜質(zhì)譜法包括步驟(1)待測樣品提取和步驟(2)測試圖譜生成。

5.根據(jù)權(quán)利要求4的生鮮牛乳的色譜指紋圖譜制備方法，其特征在于，所述步驟(1)待測樣品提取包括：

1)樣品上清液制備：稱取牛奶樣品于聚乙烯離心管內(nèi)，加入溶劑1，再加入氯化鈉，渦旋混勻，超聲離心，取全部上清液至另一支離心管內(nèi)，同時加入脫水劑和吸附劑，渦旋振蕩，再離心，取上清液備用；

2)樣品提純：移取全部上清液濃縮至近干，以溶劑3溶解，過濾膜后，上氣相色譜質(zhì)譜儀測試(GCMS)。

6.根據(jù)權(quán)利要求5的生鮮牛乳的色譜指紋圖譜制備方法，其特征在于，(1)所述溶劑1為乙腈，所述脫水劑劑為無水硫酸鈉，所述吸附劑為C-18，(2)所述溶劑3為正己烷。

7.根據(jù)權(quán)利要求6的生鮮牛乳的色譜指紋圖譜制備方法，其特征在于，所述1)待測樣品上清液制備的樣品用量2.0～4.0ml，所述乙腈用量為20ml，所述NaCl用量為2.0～4.0g，所述無水硫酸鈉用量為0.5～1.5g，所述C-18用量為150～600mg。

8.根據(jù)權(quán)利要求7的生鮮牛乳的色譜指紋圖譜制備技術(shù)，其特征在于，所述步驟(2)測試圖譜生成方法如下：氣相色譜質(zhì)譜儀測試(GCMS)，四級桿質(zhì)譜，質(zhì)量范圍50-600mu，全掃描模式，DB-5ms(30m*0.25mm*0.25um)毛細管色譜柱，進樣口溫度230℃，離子源溫度230℃，四級桿溫度150℃，傳輸線溫度280℃，電離電壓70eV，恒定流速1.5ml/min，氦氣載氣。