[發(fā)明專利]一種從小花棘豆中分離槲皮素的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310403867.7
• 申請日: 2013-08-31
• 公開（公告）號: CN103467425A
• 公開（公告）日: 2013-12-25
• 發(fā)明（設計）人: 王帥;馬春暉;周小玲;張玲;賈琦珍;陳根元
• 申請（專利權）人: 塔里木大學
• 主分類號: C07D311/30
• 分類號: C07D311/30;C07D311/40
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發(fā)明屬于醫(yī)藥和保健品技術領域，涉及一種從小花棘豆中分離槲皮素的方法。

背景技術

小花棘豆(Oxytropis?glabra?DC)是豆科(Leguminosae)棘豆屬(Oxytropis)植物，在新疆分布廣泛。據蒙藥典記載，小花棘豆是一種重要的中蒙藥原料，具有麻醉、鎮(zhèn)靜和止痛作用，主治牙痛、關節(jié)痛、失眠、健忘、神經衰弱及皮膚瘙癢。如小花棘豆4.5g、北五加皮6g及地枸葉9g，水煎服，可治關節(jié)痛。

黃酮類化合物是小花棘豆的有效成分之一，其中含有槲皮素。槲皮素(quercetin)，化學名為3，3′，4′，5，7-五羥基黃酮(3，3′，4′，5，7-pentahydroxyflavone)，又名櫟精、槲皮黃素，可作為藥品。具有較好的祛痰、止咳作用，并有一定的平喘作用。此外還有抗氧化和清除自由基、保護心血管、預防冠心病、防治心肌缺血再灌注損傷、消炎，抗過敏，抗病毒和鎮(zhèn)定、抗腫瘤、預防癌癥等作用。可用于治療慢性支氣管炎，對冠心病和高血壓患者也有輔助治療作用。到目前為止，并未有小花棘豆中分離槲皮素的專利申請。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的在于克服上述技術存在的缺陷，提供一種從小花棘豆中分離槲皮素的方法及應用，該方法利于操作、產品純度高。

其具體技術方案為：

一種從小花棘豆中分離槲皮素的方法，包括以下步驟：

(1)小花棘豆粉碎：取小花棘豆地上部分，陰干、粉碎、過20目篩后備用；

(2)超聲波協助法提取小花棘豆總提取物：稱取小花棘豆樣品，按照物料比1：15g／mL的比例加入體積分數100％的甲醇超聲波提取90min，超聲波功率800W，溫度45℃，提取完成后過濾，濾液采用旋轉蒸發(fā)儀濃縮，恒溫干燥箱干燥，即得到小花棘豆總提取物；

(3)小花棘豆黃酮的分離：將小花棘豆總提取物用水充分溶解；向層析柱中加入1／3體積的去離子水，然后將D-101型大孔吸附樹脂用去離子水轉移至層析柱中，加入70％的乙醇溶液，體積為樹脂體積的2倍，流速為1倍樹脂體積／min，然后用去離子水洗至無醇味后進行小花棘豆總提取物水溶液的梯度洗脫；大孔樹脂最佳吸附工藝條件為：pH值4.0，溫度室溫，流速1.0BV／h；用10％～100％的乙醇洗脫，收集50％～85％的乙醇洗脫液，經旋轉蒸發(fā)儀濃縮，冷凍干燥儀干燥，得到棕黃色粉末；

(4)槲皮素粗品的分離：稱取小花棘豆黃酮約1.0g，加入體積比為V_甲醇：V_水：V_鹽酸=35：5：10的水解液60mL，于80℃水浴加熱90min，冷卻后過濾，60℃烘干即得黃色針狀槲皮素粗產品；

(5)槲皮素的重結晶：取步驟(4)制備的槲皮素粗品約1.0g，加入100mL石油醚和20mL去離子水，于80℃加熱攪拌30min，趁熱過濾，用20mL去離子水洗滌沉淀3次，于60℃烘干得到槲皮素；稱取槲皮素(1)0.5g，加入100mL甲醇溶液，于80℃溶解，過濾，濾液放冷結晶，過濾得晶體，用20mL去離子水洗滌沉淀3次，于60℃烘干得純度高的槲皮素。

與現有技術相比，本發(fā)明的有益效果為：

本發(fā)明所述方法操作簡單，有機溶劑消耗少，生產成本低，工藝穩(wěn)定，能耗小，污染少，所得產品純度高，可適用于實驗室和工業(yè)化制備。通過槲皮素純度的檢測：通過灼燒殘渣檢查、澄清度的檢測和高效液相色譜檢測對分離得到的槲皮素進行純度檢測，結果表明分離得到的槲皮素純度>98％。

附圖說明

圖1是槲皮素HPLC圖。

具體實施方式

下面結合附圖和具體實施例對本發(fā)明的技術方案作進一步詳細地說明

小花棘豆提取試驗：

為了綜合考察小花棘豆黃酮提取的影響因素，利用正交法“均衡分散”的特點，選取超聲時間、甲醇濃度、物料比作為考察因素，并結合多次提取的經驗每因素又選取3個水平安排試驗，以黃酮的得率為衡量提取效率的客觀指標，優(yōu)選最佳提取工藝。

表1??正交試驗設計

表2??小花棘豆黃酮提取試驗結果

根據正交試驗中結果最大的K值選出各因素中的最佳水平為：甲醇濃度100％，超聲時間90min，料液比1：15。