[發(fā)明專利]GGPPS基因在制備治療非酒精性脂肪肝藥物的用途

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310401483.1
• 申請日: 2013-09-06
• 公開（公告）號: CN104415349A
• 公開（公告）日: 2015-03-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李朝軍;薛斌;姜珊;石夢月;沈?qū)?/a>
• 申請（專利權(quán)）人: 南京大學(xué)
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;A61P1/16
• 代理公司: 江蘇銀創(chuàng)律師事務(wù)所 32242
• 代理人: 何震花

技術(shù)領(lǐng)域

??本發(fā)明涉及GGPPS基因在制備治療非酒精性脂肪肝藥物中的用途，肝臟特異性GGPPS敲除及GGPPS拮抗劑可降低肝臟脂質(zhì)積累，對治療非酒精性脂肪肝有顯著作用。

背景技術(shù)

非酒精性脂肪肝(NAFLD)是一種無過量飲酒史,但病理學(xué)改變類似酒精性脂肪性肝病(AFLD)?,以肝細(xì)胞脂肪變性和脂質(zhì)貯積為特征的臨床病理綜合征。其疾病譜包括單純性脂肪肝、脂肪性肝炎(NASH)?、脂肪性肝纖維化和脂肪性肝硬化四個(gè)從輕到重的病理階段。近年來由于生活方式、飲食結(jié)構(gòu)等的改變,NAFLD亦隨著肥胖、2?型糖尿病、血脂異常等代謝相關(guān)疾病的增加而越來越引起人們的重視。

NAFLD的臨床表現(xiàn)隨病因、肝臟的脂肪及炎癥浸潤程度、病程及伴隨的基礎(chǔ)疾病如肥胖、糖尿病、高血壓、冠心病等不同而不同。多數(shù)患者(48%～100%?)無肝病癥狀,少數(shù)會(huì)有乏力、右上腹不適或隱痛等非特異性癥狀。肝腫大常是許多患者的唯一體征,肝功能多正常或轉(zhuǎn)氨酶輕度升高,并以ALT為主,且AST/ALT?<?1。部分患者進(jìn)展為終末期肝病時(shí),可出現(xiàn)黃疸、腹水、消化道出血等表現(xiàn)。

NAFLD?在總?cè)巳褐械幕疾÷蕿?0%(15%～39%)?,NASH為2%～3%。日本NAFLD患者占非嗜酒者的14%?,而美國成人中高達(dá)23%?,是最常見的肝疾病。NAFLD可發(fā)生于任何年齡,兒童的發(fā)病率為2.?6%?,肥胖兒童可增加到52.?8%。我國B超發(fā)現(xiàn)脂肪肝在一般人群中的患病率為10%?～16%?,肥胖患者的檢出率為38%。

目前已有大量的關(guān)于非酒精性脂肪肝及其治療的臨床報(bào)道，但導(dǎo)致NAFLD的具體機(jī)制并不清楚。現(xiàn)今廣泛接受的關(guān)于NAFLD發(fā)病機(jī)制的理論是“二次打擊”假說：第一次“打擊”是脂肪醇和甘油三酯在肝臟沉積，引起的單純脂肪變性；在此基礎(chǔ)上引起慢性氧化應(yīng)激，造成肝細(xì)胞線粒體和肝細(xì)胞本身的持續(xù)損傷和炎癥的形成即為第二次“打擊”。現(xiàn)在研究表明，肝細(xì)胞內(nèi)甘油三酯（Triglyceride，TG）的積累是非酒精性脂肪肝病變的第一步，造成了肝臟組織的第一次損傷打擊。由于肝細(xì)胞內(nèi)TG的積累是可以逆轉(zhuǎn)的，因而明確肝細(xì)胞內(nèi)TG積累的具體調(diào)節(jié)機(jī)制對治療和預(yù)防NAFLD的發(fā)生有著重要的臨床意義。

ggpps?基因即香葉基香葉基二磷酸合成酶（geranylgeranyl?diphosphate?synthase?1，ggpps1）基因。在蛋白質(zhì)異戊二烯化修飾過程中起到關(guān)鍵作用，ggpps的底物GGPP是小?G?蛋白發(fā)生香葉基化的重要前體。香葉基化是蛋白質(zhì)的翻譯后修飾之一，一般發(fā)生在蛋白質(zhì)?C?末端保守的半胱氨酸。發(fā)生香葉基化的蛋白質(zhì)包括Ras和Ras相關(guān)的小G蛋白如?Rho,Rab,Rac,以及三聚體?G?蛋白的γ亞基，這些受調(diào)控的蛋白質(zhì)都是信號傳遞通路中重要的分子開關(guān)調(diào)節(jié)蛋白。有研究報(bào)道，以GGPPS為藥物靶點(diǎn)對于成骨細(xì)胞分化與骨骼構(gòu)建有改善作用(Weivoda?and?Hohl?2011),也有研究闡述了GGPPS可作為香煙煙霧引發(fā)的肺部疾病的治療靶點(diǎn)(Shen,?Gong?et?al.?2011)，但就GGPPS用于治療非酒精性脂肪肝之間的靶點(diǎn)藥物并沒有任何報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

????有鑒于此，本發(fā)明的目的在于通過考察肝臟特異性GGPPS敲除小鼠肝臟中脂質(zhì)積累情況及肝臟中與脂質(zhì)合成相關(guān)基因的表達(dá)量等指標(biāo)，確認(rèn)GGPPS能否作為非酒精性脂肪肝治療的藥物靶點(diǎn)，從而為治療非酒精性脂肪肝開辟新的道路，提高非酒精性脂肪肝患者的生命質(zhì)量。

????為達(dá)上述目的，發(fā)明人通過高脂誘導(dǎo)建立非酒精性脂肪肝小鼠模型，并檢測其肝臟組織中GGPPS的表達(dá)水平。通過real?time方法檢測發(fā)現(xiàn)，高脂誘導(dǎo)的非酒精性脂肪肝小鼠肝臟組織中GGPPS的表達(dá)量顯著增加。