[發明專利]一種制備固定化頭孢菌素C酰化酶的方法

有效

• 申請號: 201310401009.9
• 申請日: 2013-09-05
• 公開（公告）號: CN103436517A
• 公開（公告）日: 2013-12-11
• 發明（設計）人: 羅暉;何華;常雁紅;魏艷梅;于慧敏;沈忠耀
• 申請（專利權）人: 北京科技大學
• 主分類號: C12N11/10
• 分類號: C12N11/10;C12N11/08
• 代理公司: 北京市廣友專利事務所有限責任公司 11237
• 代理人: 張仲波

1.一種制備固定化頭孢菌素C酰化酶的方法，包括：采用戊二醛交聯劑使頭孢菌素C酰化酶固定在氨基載體上,然后用含氨基的大分子進行后修飾。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：氨基載體先用戊二醛活化處理，再進行頭孢菌素C酰化酶的固定化。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：頭孢菌素C酰化酶先吸附固定在氨基載體上，再用戊二醛交聯。

4.根據權利要求1-3任一項所述的方法，其特征在于：所述含氨基的大分子選自聚乙烯亞胺、殼聚糖、羧甲基殼聚糖和聚賴氨酸。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于：在所述后修飾過程中，使用濃度為0.1g/100ml-10g/100ml，例如2.5g/100ml的含氨基的大分子在緩沖液中的溶液。

6.根據權利要求1-5任一項所述的方法，其特征在于：所述方法中使用磷酸鈉緩沖液、硼酸緩沖液或碳酸鈉緩沖液。

7.根據權利要求1-6任一項所述的方法，其特征在于：所述后修飾按如下進行：將戊二醛固定的CPC酰化酶與含氨基的大分子在緩沖液，特別是磷酸鈉緩沖液，中混合，調節pH值為7.0-9.0，室溫攪拌2-40小時。

8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于：所述攪拌進行3-30小時、5-30小時、10-28小時、15-25小時、20-24小時；例如24小時。

9.根據權利要求7或8所述的方法，其特征在于：攪拌轉速是50-300rpm，例如100-200rpm。

10.由權利要求1-9任一項所述的方法得到的固定化頭孢菌素C酰化酶。