[發(fā)明專利]具有生物防治作用的麻栗坡產(chǎn)氣霉

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310400774.9
• 申請日: 2013-09-06
• 公開（公告）號: CN104419647B
• 公開（公告）日: 2017-06-09
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 郭順星;譚小明;陳曉梅;邢詠梅;王春蘭
• 申請（專利權(quán)）人: 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;A01N63/04;A01P1/00;A01P3/00;A61L9/015;C12R1/645;A61L101/52
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物工程技術(shù)領(lǐng)域，具體地說是涉及1株產(chǎn)氣霉屬真菌：麻栗坡產(chǎn)氣霉，它能夠抑制植物病原微生物和人體病原微生物，對于植物病原微生物和人類生活環(huán)境病原微生物具有生物防治作用。

發(fā)明背景

內(nèi)生真菌(Endophytic fungi)是指那些在其生活史的部分或全部階段能在健康植物組織內(nèi)部定植，且不會對宿主植物造成明顯傷害的一類真菌。宿主植物與內(nèi)生真菌在長期的協(xié)同進(jìn)化過程中形成了互惠互利的共生關(guān)系。植物可為內(nèi)生真菌提供生存空間、水分和其他營養(yǎng)成分，保護其不受外界環(huán)境的影響而在植物體內(nèi)生存繁衍；另一方面，內(nèi)生真菌也能夠產(chǎn)生一些促進(jìn)植物生長發(fā)育、提高植物抗脅迫能力的次生代謝產(chǎn)物，包括激素、酶、抗生素及其它殺蟲抑菌物質(zhì)。這些發(fā)現(xiàn)使得內(nèi)生真菌在生物活性物質(zhì)篩選的研究領(lǐng)域中顯示出巨大的應(yīng)用潛力，逐漸成為國內(nèi)外研究的熱點之一。

目前，對于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的植物病原菌、建筑材料的霉變和人類生存環(huán)境的病原菌的防治，人們主要依靠人工合成的化學(xué)藥劑，但是，這些化學(xué)成分大多數(shù)具有致癌性，且不易降解，對人類和動物及環(huán)境均具有很大的毒性。因此，這一類化學(xué)藥劑產(chǎn)品將會逐漸被限制。在這種情況下，新型環(huán)保的生物殺菌劑的開發(fā)和利用顯得尤為迫切。

產(chǎn)氣霉屬(Muscodor)真菌屬于子囊菌綱炭角菌目，該屬物種的顯著特征是能夠產(chǎn)生一系列揮發(fā)性氣體化合物^[1]。經(jīng)實驗證明，這些揮發(fā)性物質(zhì)形成的混合氣體可以有效地抑制植物病原菌及人類病原微生物。這一生物學(xué)特性使得產(chǎn)氣霉屬真菌在土傳病害等方面具有很好的應(yīng)用前景。2002年，美國AgreQuest公司以白色產(chǎn)氣霉(M.albus)為基礎(chǔ)，首家推出世界上第一種可以替代傳統(tǒng)劇毒土壤熏蒸劑溴代甲烷(已被禁用)的真菌熏蒸劑。這種真菌熏蒸劑也可以有效地防治引發(fā)“病房綜合征”的病原霉菌和細(xì)菌。目前全世界已報道8個產(chǎn)氣霉屬物種^[1-8]。本專利采用組織塊分離法，從蘭科植物中分離得到一株產(chǎn)氣霉屬真菌，綜合形態(tài)鑒定、分子鑒定和化學(xué)分析的結(jié)果，這株真菌為產(chǎn)氣霉屬的新物種，命名為：麻粟坡產(chǎn)氣霉(M.malipoensis X.M.Tan et S.X.Guo)。培養(yǎng)皿對峙實驗證明，該真菌產(chǎn)生的氣體混合物對終極腐霉、金黃色葡萄球菌、新型隱球酵母等多種植物病原微生物和人體病原微生物具有強烈的抑制和殺滅作用，顯示它們具有開發(fā)為殺菌劑的巨大潛力。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的為提供一株產(chǎn)氣霉屬(Muscodor)真菌：麻粟坡產(chǎn)氣霉；它可以應(yīng)用于多種病原真菌和細(xì)菌的生物防治。

本發(fā)明采取如下技術(shù)方案實現(xiàn)：

麻粟坡產(chǎn)氣霉(M.malipoensisX.M.Tan et S.X.Guo)于2012年7月17日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為：CGMCC No.6371。保藏單位地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，中國科學(xué)院微生物研究所。菌株的保藏和存活證明見附件。

麻栗坡產(chǎn)氣霉的培養(yǎng)特性如下：

PDA培養(yǎng)基上形成同心環(huán)狀白色菌落，菌落背面無色，生長緩慢，25℃暗培養(yǎng)2周菌落直徑36-38mm，邊緣不規(guī)則，產(chǎn)生特殊的氣味；菌落中央的菌絲致密，形成明顯的突起，邊緣的菌絲較疏松；菌絲透明，具有橫膈膜，分支，壁薄，直徑1-4μm，纏結(jié)在一起形成“繩索鏈”(rope-like strands)及網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，有些菌絲形成菌絲圈結(jié)構(gòu)，菌絲圈直徑22-35μm，有些菌絲中間膨大，形成“8”字形結(jié)構(gòu)；菌絲體不育，未見無性或有性孢子，及產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)。

麻栗坡產(chǎn)氣霉的核糖體脫氧核糖核酸內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)(ITS-rDNA)序列(6371-1)、核糖核酸聚合酶II亞基(RPB2)序列(6371-2)、β-微管蛋白(β-tublin)序列(6371-3)和核糖體脫氧核糖核酸大亞基(28S)序列(6371-4)如序列表所示。

①麻栗坡產(chǎn)氣霉與產(chǎn)氣霉屬真菌M.yucatanensis(Genbank accession FJ917287)的ITS序列相似性為99％。以Agaricus bisporus為外類群，基于產(chǎn)氣霉屬和炭角菌科其他相關(guān)屬真菌的ITS序列，用鄰接(Neighbor-Joining)法構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化發(fā)育樹(NJ樹)。在這個樹形圖中，產(chǎn)氣霉屬真菌被分為5個分支，麻栗坡產(chǎn)氣霉、M.yucatanensis和產(chǎn)氣霉屬菌株S18-3-1(Genbank accession EU636700)聚類在分支D中，支持強度82％。