[發(fā)明專利]一種高通量篩選產(chǎn)生群體感應(yīng)信號分子菌株的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310399333.1
• 申請日: 2013-09-05
• 公開（公告）號: CN103509847A
• 公開（公告）日: 2014-01-15
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 黃媛媛;馬宏;宋水山;賈振華;黃亞麗;宋聰;劉昆昂
• 申請（專利權(quán)）人: 河北省科學(xué)院生物研究所
• 主分類號: C12Q1/04
• 分類號: C12Q1/04
• 代理公司: 石家莊新世紀(jì)專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 13100
• 代理人: 董金國;張素靜

1.一種高通量篩選產(chǎn)生群體感應(yīng)信號分子菌株的方法，其特征在于其包括以下步驟：

步驟一：報告平板的準(zhǔn)備，其中所述的報告平板為分散有報告菌株的固體微生物培養(yǎng)基；

步驟二：待測菌株的分離，獲得待測菌株的單菌落；

步驟三：待測菌株的轉(zhuǎn)移，以覆膜法將待測菌株的單菌落影印至步驟一所述的報告平板；

步驟四：表達信號分子的菌株的獲得，培養(yǎng)步驟三所述的報告平板至可檢測到表達信號，步驟二中待測菌落的單菌落中與報告平板中顯示表達信號的位置相對應(yīng)的菌株即為表達信號分子的菌株。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高通量篩選產(chǎn)生群體感應(yīng)信號分子菌株的方法，其特征在于所述的報告菌株為紫色桿菌CV026或膿桿菌NTL4。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高通量篩選產(chǎn)生群體感應(yīng)信號分子菌株的方法，其特征在于步驟一中報告平板為LB平板，由含報告菌株的菌懸液與LB培養(yǎng)基混合制得。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種高通量篩選產(chǎn)生群體感應(yīng)信號分子菌株的方法，其特征在于所述含報告菌株的菌懸液的光密度為0.8-1.2。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種高通量篩選產(chǎn)生群體感應(yīng)信號分子菌株的方法，其特征在于所述報告平板的pH為6.8-7.0。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高通量篩選產(chǎn)生群體感應(yīng)信號分子菌株的方法，其特征在于調(diào)整步驟二中所述的待測菌株的單菌落至40~60個單菌落/平板。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種高通量篩選產(chǎn)生群體感應(yīng)信號分子菌株的方法，其特征在于所述的平板選自以下形式：9cm培養(yǎng)皿、15cm培養(yǎng)皿、托盤或載玻片。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高通量篩選產(chǎn)生群體感應(yīng)信號分子菌株的方法，其特征在于步驟三中所述的覆膜法使用親水膜。

9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種高通量篩選產(chǎn)生群體感應(yīng)信號分子菌株的方法，其特征在于所述的親水膜為混合纖維素酯微孔濾膜。