[發明專利]一種保護化療損傷的腸黏膜屏障功能的腸內營養制劑

有效

• 申請號: 201310399203.8
• 申請日: 2013-09-05
• 公開（公告）號: CN103445049A
• 公開（公告）日: 2013-12-18
• 發明（設計）人: 蔡冰娜;潘劍宇;孫恢禮;陳華;萬鵬;陳得科
• 申請（專利權）人: 中國科學院南海海洋研究所
• 主分類號: A23L1/09
• 分類號: A23L1/09;C08B37/00
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 謝敏楠

技術領域

本發明屬于食品生產領域，具體涉及一種保護化療損傷的腸黏膜屏障功能的腸內營養制劑。

背景技術

大約90%的惡性腫瘤患者在治療的整個過程期間都需要進行化療，化療藥物在殺傷腫瘤細胞的同時，對細胞增殖活躍的消化道黏膜有嚴重的副作用，“腸道是應激的中心器官”，可發生炎癥，通透性增大，細菌易位，內毒素感染，加劇免疫功能損傷，導致黏膜屏障功能失調，嚴重影響預后，降低生活質量，影響病情發展和轉歸。腸黏膜屏障是機體的第一道免疫防線，構成了人體與外環境最大的交界面，正常的腸道屏障功能包括機械屏障、化學屏障、生物屏障和免疫屏障4個部分，任何一部分缺陷或受損都可導致腸道功能障礙，引起腸道菌群易位、腸源性感染等，嚴重影響腫瘤患者的預后，導致并發癥的發生。腸黏膜機械屏障主要由腸黏膜上皮細胞、上皮細胞側面的細胞連接和上皮下的固有膜等成分組成，腸道黏膜是機體中生長最快的組織之一，其上皮不斷更新成為保持黏膜屏障完整性的重要機制。腸黏膜的生物屏障主要由正常的腸道菌群構成，正常情況下，腸道內大量厭氧菌能組織病原微生物過度生長及限制它們黏附于黏膜。腸黏膜免疫系統由腸上皮淋巴細胞、固有層淋巴細胞、Peyer淋巴結其分泌的sIgA及粘液等組成，與機械屏障、細菌生態屏障共同構建腸黏膜阻擋微生物入侵的第一道防線。

發明內容

本發明的目的在于提供了牡蠣多糖在制備保護化療損傷的腸黏膜屏障功能制劑方面的應用。

本發明的目的還在于提供一種保護化療損傷的腸黏膜屏障功能的腸內營養制劑。

本發明上述目的通過以下技術方案予以實現：

發明首先公開了牡蠣多糖在制備保護化療損傷的腸黏膜屏障功能制劑方面的應用。發明人首次發現，牡蠣多糖可以用于促進RAW264.7細胞，T淋巴細胞和IEC-6細胞增殖作用。發明人發現，從牡蠣中分離所得的牡蠣多糖組分是通過體外抗氧化，促單核-巨噬RAW264.7細胞，T淋巴細胞和小腸上皮IEC-6細胞增殖活性模型篩選獲得的具有最顯著抗氧化，促進RAW264.7細胞，T淋巴細胞和IEC-6細胞增殖作用。

對于牡蠣多糖中的多種組分，發明人進一步通過多級分離，分離出三級多糖。三級多糖的重均分子量分別為500k~1000kDa?或8k~500kDa?或<8kDa?。

發明進一步公開了一種保護化療損傷的腸黏膜屏障功能的腸內營養制劑，該制劑含有牡蠣多糖。

所述的牡蠣多糖通過以下方法獲得：取牡蠣肉，洗凈，勻漿，加入水，超聲處理后，加入蛋白酶進行酶解后，再加入乙醇沉淀，獲得牡蠣多糖。所述的酶解結束之后，優選進行滅酶處理；所述的乙醇沉淀之后，優選進一步除蛋白，獲得牡蠣多糖。

優選地，所述蛋白酶為堿性蛋白酶或胰蛋白酶；所述的酶解條件為：溫度45~55℃，pH值8.0-10.0，酶解時間4~6h。

優選地，所述的超聲條件為：超聲功率為800~900W，溫度為50~60℃，超聲時間為20~30min。

在進行以下的多級乙醇沉淀（分級沉淀）之后，可以獲得不同分子量分布的多級多糖組分：

第一級沉淀：先加入乙醇使乙醇終濃度達到28-32%，沉淀得到第一級沉淀物，上清液進行第二級沉淀；

第二級沉淀：第一級沉淀后剩余的上清液中，加入乙醇使乙醇終濃度達到58-62%，沉淀得到第二級沉淀物，上清液進行第三級沉淀；

第三級沉淀：第二級沉淀后剩余的上清液中，加入乙醇使乙醇終濃度達到88-95%，沉淀得到第三級沉淀物。

????加入一定量的乙醇之后，體系中的多糖組分會開始沉淀。根據體系中不同的醇濃度，不同分子量大小的牡蠣多糖被依次沉淀下來。優選地，沉淀后，為了更好地讓沉淀物與上清液分離，采用離心方法分離沉淀物。進一步優選地，離心方法為：1500~2500?×g,8~15min。

通過上述的方法，獲得了不同分子量分布的三級多糖組分，它們的重均分子量范圍分別為：500k~1000kDa?或8k~500kDa?或<8kDa?。

實驗進一步證實，在這三級多糖中，分子量8k~500kDa?的多糖組分，具有最顯著抗氧化，促進RAW264.7細胞，T淋巴細胞和IEC-6細胞增殖作用?。