[發(fā)明專(zhuān)利]一種冬蟲(chóng)夏草優(yōu)質(zhì)菌種的選育方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310398240.7
• 申請(qǐng)日: 2013-09-05
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103444435A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-12-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李文新;陳春森;廖金永
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 東方中科生命科學(xué)有限責(zé)任公司
• 主分類(lèi)號(hào): A01G1/04
• 分類(lèi)號(hào): A01G1/04
• 代理公司: 沈陽(yáng)科威專(zhuān)利代理有限責(zé)任公司 21101
• 代理人: 張述學(xué)

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于食用真菌、藥用真菌生物技術(shù)與發(fā)酵生產(chǎn)領(lǐng)域，尤其涉及一種冬蟲(chóng)夏草優(yōu)質(zhì)菌種的選育方法。應(yīng)用于冬蟲(chóng)夏草工業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)中。

背景技術(shù)

食藥用菌產(chǎn)業(yè)是新型的朝陽(yáng)產(chǎn)業(yè)，在我國(guó)國(guó)民經(jīng)濟(jì)中占據(jù)重要地位，而食藥用菌的發(fā)酵是其中最重要的組成部分之一。冬蟲(chóng)夏草是中國(guó)傳統(tǒng)中藥中最著名的一種，它的發(fā)酵已經(jīng)形成了很大的產(chǎn)業(yè)。

良好的菌種是微生物發(fā)酵工業(yè)的基礎(chǔ)。在應(yīng)用食藥用菌生產(chǎn)食品、保健品時(shí)，首要任務(wù)是要挑選出符合需要的優(yōu)質(zhì)菌種，從自然界中新分離的野生菌株，應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)時(shí)中往往性能不佳，活力也是比較低，致使發(fā)酵物的產(chǎn)量和質(zhì)量偏低，不能滿(mǎn)足工業(yè)生產(chǎn)要求，因此需要在人工條件下進(jìn)行菌種選育。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種冬蟲(chóng)夏草優(yōu)質(zhì)菌種的選育方法，性能好，活力強(qiáng)，發(fā)酵物產(chǎn)量高、質(zhì)量好，能很好滿(mǎn)足工業(yè)生產(chǎn)要求。

本發(fā)明的提供的冬蟲(chóng)夏草優(yōu)質(zhì)菌種的選育方法包括以下步驟：

（1）新鮮冬蟲(chóng)夏草采收：每年在青藏高原主產(chǎn)區(qū)采收新鮮的冬蟲(chóng)夏草，以保證獲得生長(zhǎng)旺盛的菌種，拉丁學(xué)名是Cordyceps?sinensis，也寫(xiě)作Ophiocordyceps?sinensis；

（2）初始菌種分離：采收的新鮮冬蟲(chóng)夏草用濃度70%的酒精浸泡2-5min，用酒精棉球擦拭表面消毒，取直徑0.5-1cm的冬蟲(chóng)夏草的蟲(chóng)子致密組織接入固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)；模擬天然環(huán)境采用12小時(shí)光照與12小時(shí)黑暗間隔培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為10-20℃，期間測(cè)量菌絲生長(zhǎng)速度，用顯微鏡觀察菌絲特點(diǎn)；

初始分離固體培養(yǎng)基的優(yōu)選成分重量配比為：2-4%的粗糧復(fù)合物、0.30-0.60%的胰蛋白胨、0.30-0.60%的酵母浸出粉、0.02-0.04%的硫酸鎂，0.02-0.04%的磷酸二氫鉀、0.05-0.10%的維生素B1、0.05-0.10%的維生素B2、1.00-2.00%的瓊脂粉，其余為水分；

粗糧復(fù)合物為玉米、小米、蕎麥、燕麥、黃豆粗制粉同等比例混合而成；

（3）第一次菌種轉(zhuǎn)接：初始分離菌種培養(yǎng)30天后，進(jìn)行第一次菌種轉(zhuǎn)接，模擬天然環(huán)境采用12小時(shí)光照與12小時(shí)黑暗間隔培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為10-20℃，期間測(cè)量菌絲生長(zhǎng)速度，用顯微鏡觀察菌絲特點(diǎn)；

第一次菌種轉(zhuǎn)接后固體培養(yǎng)基成分重量配比為：2-4%的粗糧復(fù)合物、0.30-0.60%的胰蛋白胨、0.30-0.60%的酵母浸出粉、0.02-0.04%的硫酸鎂，0.02-0.04%的磷酸二氫鉀、0.05-0.10%的維生素B1、0.05-0.10%的維生素B2、1.00-2.00%的瓊脂粉、0.50-1.50%的粗蛋白粉，其余為水分；

（4）第二次菌種轉(zhuǎn)接：第一次菌種轉(zhuǎn)接培養(yǎng)30天后，進(jìn)行第二次菌種轉(zhuǎn)接，模擬天然環(huán)境采用12小時(shí)光照與12小時(shí)黑暗間隔培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度為10-20℃，期間測(cè)量菌絲生長(zhǎng)速度，用顯微鏡觀察菌絲特點(diǎn)；第二次轉(zhuǎn)接后培養(yǎng)30天，即可獲得具有很高活性的優(yōu)質(zhì)冬蟲(chóng)夏草菌種，可用于發(fā)酵生產(chǎn)。

第二次轉(zhuǎn)接后的固體培養(yǎng)基成分重量配比為：2-4%的粗糧復(fù)合物、0.30-0.60%的胰蛋白胨、0.30-0.60%的酵母浸出粉、0.02-0.04%的硫酸鎂，0.02-0.04%的磷酸二氫鉀、0.10-0.20%的復(fù)合維生素、1.00-2.00%的瓊脂粉、0.50-1.50%的粗蛋白粉，其余為水分；

本發(fā)明具有的積極效果：性能好，活力強(qiáng)，發(fā)酵物產(chǎn)量高、質(zhì)量好，能很好滿(mǎn)足工業(yè)生產(chǎn)要求。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合具體實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明所涉及的方法做進(jìn)一步說(shuō)明：

（1）每年在青藏高原主產(chǎn)區(qū)采收新鮮的冬蟲(chóng)夏草，特別挑選蟲(chóng)子粗壯、蟲(chóng)草芽較小的早期草為最佳，以保證獲得生長(zhǎng)旺盛的菌種。拉丁學(xué)名是Cordyceps?sinensis，也寫(xiě)作Ophiocordyceps?sinensis。

（2）制備初始分離的固體培養(yǎng)基：稱(chēng)取3g粗糧復(fù)合物、0.5g胰蛋白胨、0.5g酵母浸出粉、0.04g硫酸鎂，0.04g磷酸二氫鉀、0.08g維生素B1、0.08g維生素B2、2g瓊脂粉，用水定容到100ml。高溫高壓滅菌后冷卻，作為初始分離的固體培養(yǎng)基。

粗糧復(fù)合物為玉米、小米、蕎麥、燕麥、黃豆粗制粉同等比例混合而成。