[發明專利]一種MGF或其E肽修飾的組織工程支架材料及其制備方法

無效

• 申請號: 201310397044.8
• 申請日: 2013-09-04
• 公開（公告）號: CN103520769A
• 公開（公告）日: 2014-01-22
• 發明（設計）人: 呂永鋼;林崇文;鄒楊
• 申請（專利權）人: 重慶大學
• 主分類號: A61L27/22
• 分類號: A61L27/22;A61L27/54;A61L27/20;A61L27/18
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王朋飛

1.一種MGF或其E肽修飾的組織工程支架材料，由聚L-乳酸(Poly?L-lactic?acid,PLLA)或聚己內酯(Polycaprolactone,PCL)或PLLA/PCL納米纖維支架和力生長因子(Mechno-growth?factor,MGF)或其E肽(MGF-Ct24E)構成，其特征在于：所述PLLA、PCL或PLLA/PCL納米纖維支架由靜電紡絲技術制備，通過肝素和交聯分子聚乙二醇雙胺(Poly(ethylene?glycol)bis(amine),Di-NH₂-PEG)將生長因子MGF或MGF-Ct24E交聯到納米纖維支架上。

2.如權利要求1所述的一種MGF或其E肽修飾的組織工程支架材料，其特征在于：所述PLLA、PCL或PLLA/PCL納米纖維支架中納米纖維(4)為各向同性或平行，或者內層納米纖維(4)平行排列而外層納米纖維(4)各向同性。

3.一種制備權利要求1所述的MGF或其E肽修飾的組織工程支架材料的制備方法，包括下述步驟：

1)利用靜電紡絲技術制備PLLA、PCL或PLLA/PCL納米纖維支架；2)將步驟1)得到的PLLA、PCL或PLLA/PCL納米纖維支架浸泡在70-75%的乙醇溶液中殺菌，然后使用磷酸鹽緩沖液(Phosphate?buffered?saline,PBS)沖洗3遍，每遍5min，再浸泡于0.01N?NaOH中10min以增加表面反應羧基基團；

3)用PBS沖洗PLLA、PCL或PLLA/PCL納米纖維支架3遍，每遍5min，再用蒸餾水沖洗PLLA、PCL或PLLA/PCL納米纖維支架3遍，每遍5min；

4)配制20mg/mL1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(N-(3-Dimethylaminopropyl)-N-ethylcarbodiimide?hydrochloride?crystalline,EDC)和10mg/mL?N-羥基硫代琥珀酰亞胺(N-Hydroxysulfosuccinimide?sodium?salt,sulfo-NHS)的溶液備用；

5)將PLLA、PCL或PLLA/PCL納米纖維支架浸泡于步驟4)得到的溶液中30min，再用PBS沖洗3遍，每遍5min；

6)配制含20mg/mL?EDC、10mg/mL?sulfo-NHS和20mg/mLDi-NH₂-PEG的溶液備用；

7)將PLLA、PCL或PLLA/PCL納米纖維支架浸泡于步驟6)得到的溶液中30min，再用PBS沖洗3遍，每遍5min；

8)配制含100mg/mL?EDC和50mg/mL?sulfo-NHS的溶液備用；

9)配制25mg/mL肝素(2)的溶液備用；

10)將步驟8)和步驟9)得到的溶液按照1:4的比例混合，充分混勻，使用1N?NaOH將混合溶液的pH調整為7；

11)將PLLA、PCL或PLLA/PCL納米纖維支架浸泡于步驟10)得到的溶液中3-4h，用PBS沖洗3遍，每遍5min；

12)配制質量濃度為1%的甘氨酸溶液備用；

13)將PLLA、PCL或PLLA/PCL納米纖維支架浸泡于步驟12)得到的溶液中30min，用PBS沖洗3遍，每遍5min；

14)配制濃度為100-1000ng/mL?MGF或MGF-Ct24E溶液備用；

15)將PLLA、PCL或PLLA/PCL納米纖維支架浸泡于步驟14)得到的溶液中12h，用PBS沖洗3遍，每遍5min。

4.如權利要求3所述的制備方法，其特征在于：步驟15)所述的浸泡過程在4℃條件下進行。