[發(fā)明專利]苦可胺的分離方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310394928.8
• 申請日: 2013-09-03
• 公開（公告）號: CN104418761A
• 公開（公告）日: 2015-03-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張漢揚;李園園;狄睿
• 申請（專利權(quán)）人: 香港城市大學(xué)
• 主分類號: C07C231/24
• 分類號: C07C231/24;C07C235/34;C07C235/78;B01D15/08
• 代理公司: 隆天國際知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 72003
• 代理人: 王芝艷;鄒宗亮

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于化合物分離純化領(lǐng)域，具體地，涉及苦可胺的分離方法。

背景技術(shù)

苦可胺，包括苦可胺A(又稱地骨皮甲素)、苦可胺B(又稱地骨皮乙素)以及其他衍生物，屬于精胺生物堿類物質(zhì)。由于具有多種生物活性，例如，消炎活性、抗氧化活性以及降血壓作用，苦可胺已被認(rèn)為是潛在的藥物以及功能食品中的重要成分。

例如，WO2012/062026描述了制備苦可胺B鹽，用于治療膿毒癥以及自身免疫性疾病。

與化學(xué)合成方法相比，從植物或者其他生物材料中純化苦可胺更為高效、經(jīng)濟和環(huán)保。但是，由于苦可胺為極水溶性物質(zhì)且非常容易氧化變質(zhì)，因此純化在技術(shù)上極具難度。

Elena?V.Piletska等人(Agricultural?and?Food?Chemistry,2012,60,p.95-99)描述了利用分子印跡聚合物通過固相萃取從土豆皮中純化苦可胺A的方法。然而，其中使用的分子印跡聚合物需要利用計算機進(jìn)行設(shè)計、篩選并專門合成。

現(xiàn)有技術(shù)中的其他純化方法高度依賴于反復(fù)柱層析，非常低效并且耗時。此外，還需要使用大量的有機溶劑，帶來的最大缺點是產(chǎn)率極低，并且由于分離過程中的自身氧化導(dǎo)致終產(chǎn)物純度低。

因此，需要一種簡便且能夠以高產(chǎn)率獲得高純度的苦可胺的分離(純化)方法。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種快速、經(jīng)濟、環(huán)境友好的分離方法，用來以高產(chǎn)率獲得更高純度的苦可胺。

一方面，本發(fā)明提供了分離苦可胺的方法，所述方法包括使作為固定相的聚酰胺或其衍生物與苦可胺粗提物溶液相接觸以吸附苦可胺的步驟。

可以用本發(fā)明的方法進(jìn)行分離或純化的苦可胺包括，例如具有以下結(jié)構(gòu)的任一物質(zhì)或其混合物：

在本發(fā)明的實施方式中，聚酰胺是指含有酰胺基團(tuán)的聚合物，包括聚酰胺6(尼龍6)、聚酰胺66(尼龍66)、聚酰胺1010(尼龍1010)和聚芳酰胺等等，所述聚酰胺衍生物是以聚酰胺為母核進(jìn)行基團(tuán)修飾及改性的聚酰胺樹脂。

本領(lǐng)域技術(shù)人員可以根據(jù)需要選擇任何合適粒徑的聚酰胺或其衍生物進(jìn)行苦可胺的分離，例如，聚酰胺或其衍生物粒徑可以約為75-150μm，如約75μm、90μm、105μm、120μm、135μm或150μm。

本發(fā)明的方法本質(zhì)上是一種固相萃取方法，采用吸附劑聚酰胺或其衍生物對苦可胺進(jìn)行選擇性吸附、選擇性洗脫的方式，以達(dá)到對樣品的凈化、富集和分離。

本發(fā)明的方法可利用固相柱萃取、固相分散萃取、濾膜(芯)萃取和固相微萃取等方式來實施。

本領(lǐng)域技術(shù)人員可以根據(jù)需要選擇任何合適量的聚酰胺或其衍生物進(jìn)行苦可胺的分離，以盡量完全吸附基質(zhì)中的苦可胺。例如，待分離的苦可胺與聚酰胺或其衍生物的比例可以為，例如1mg苦柯胺比約0.02g到1g的聚酰胺，如1mg苦柯胺比約0.05到0.2g的聚酰胺，如1mg苦柯胺比約0.1g、0.12g或0.16g的聚酰胺。

在本發(fā)明的實施方式中，在所述分離苦可胺的方法中，接觸步驟可重復(fù)多次。

在本發(fā)明的實施方式中，所述方法在接觸步驟后，包括使用酸性溶液對吸附在固定相聚酰胺或其衍生物上的苦可胺進(jìn)行洗脫的步驟。

在本發(fā)明的實施方式中，用于洗脫的酸性溶液包括乙酸或其鹽、甲酸、鹽酸、磷酸或其鹽、三氟乙酸等酸的水溶液或者醇溶液(pH<5)。其中，所述醇溶液為碳鏈長度在6以下的能夠與水溶液互溶的低級醇溶液，優(yōu)選甲醇、乙醇、丙醇或異丙醇。優(yōu)選地，所述酸性溶液為約0.1%至5%的乙酸水溶液或者相應(yīng)pH值的其他酸性溶液，更優(yōu)選約0.5%的乙酸水溶液。

在本發(fā)明的實施方式中，苦可胺粗提物可以為來自地骨皮、土豆皮、西紅柿、茄子以及其他含有類似成分的植物或者組織細(xì)胞培養(yǎng)物的提取物或市售產(chǎn)品。提取方法可以為本領(lǐng)域的常規(guī)方法。

在本發(fā)明的實施方式中，所述方法在接觸步驟前，可以包括將苦可胺粗提物分散在極性溶劑中的步驟，從而過濾得到苦可胺粗提物溶液。所述極性溶劑可以為水或者低濃度的醇溶液、乙腈溶液或者丙酮溶液，例如約10%-50%的醇溶液。其中，所述醇溶液為碳鏈長度在6以下的能夠與水溶液互溶的低級醇溶液，優(yōu)選甲醇、乙醇、丙醇或異丙醇。優(yōu)選地，所述極性溶劑為約10%-50%的甲醇或乙醇溶液，例如約50%的乙醇水溶液。