[發明專利]一株酵母菌株及其應用

有效

• 申請號: 201310389072.5
• 申請日: 2013-08-27
• 公開（公告）號: CN103614306A
• 公開（公告）日: 2014-03-05
• 發明（設計）人: 王曉東;李國慶;王春娟;陳好娟
• 申請（專利權）人: 石河子大學
• 主分類號: C12N1/16
• 分類號: C12N1/16;A01N63/04;A01P1/00
• 代理公司: 北京科億知識產權代理事務所(普通合伙) 11350
• 代理人: 湯東鳳

技術領域

本發明屬于生物技術領域，涉及一株酵母菌株及其應用，具體地說，涉及一株酵母菌株PA0732-1及其應用。?

背景技術

瓜類細菌性果斑病是近年來新發生并流行開來的一種毀滅性病害。也是世界檢疫性病害。2007年5月，我國農業部重新將該病列入《中華人民共和國進境植物檢疫性有害生物名錄》中，作為重大檢疫性植物病害。該病主要引起西瓜、甜瓜、籽瓜果實的腐爛，導致減產。同時也能危害瓜類子葉、真葉，污染瓜種。具有發病快、防治難、為害重等特點。據不完全統計，全球已有16個國家相繼報道了該病的發生，我國已達17個省市發現或報道了該病。其中新疆、內蒙古、甘肅瓜產區危害重大，常年造成10%-30%的減產，發病重的年份，個別地塊絕產，嚴重影響了瓜農種植的積極性，使特色優勢產業失去了市場競爭活力。另外瓜類細菌性果斑病對合法種子經銷商的利益也不斷受到損害，禁售和索賠事件頻繁發生，引發一系列社會性問題。有效防治該病成為目前哈密瓜生產中面臨的亟待解決的問題。?

哈密瓜細菌性果斑病由燕麥食酸菌西瓜亞種（Acidovorax?avenae?subsp.citrulli?Willems）（Aac）引起，屬革蘭氏陰性菌，菌體短桿狀，屬rRNA組I。主要危害厚皮甜瓜、西瓜、籽瓜、南瓜、黃瓜、絲瓜、蜜露洋香瓜和網紋洋香瓜等，也可以感染番茄、胡椒、茄子等，不能侵染玉米、大豆。病菌主要通過傷口和氣孔侵染哈密瓜。遠距離傳播通過調運帶菌種子人為傳播，病種萌發后病菌先侵染子葉，引起幼苗染病，濕度大時，病斑上形成的菌膿，借助雨水、風、昆蟲及農事操作等途徑近距離的傳播，從而使病菌在田間得以定殖和流行。?

對于瓜類細菌性果斑病的防治，國內外學者也做了大量的研究，雖在一定程度上控制了該病害的發生和蔓延，但成效令人不滿意。因此，加強進、出口種子的檢疫是預防該病發生的首要措施。對于種子檢測，國內外成功建立了多種檢測技術體系，如RFLP、PCR產物雜交、PCR產物測序及同源性分析、免疫磁性分離PCR技術等，這些技術能有效地檢測和鑒定出病原的種類，而且成效顯著。，?但檢測后的帶菌種子的處理及田間防治研究報道較少。目前國內外防治該病仍依賴稀酸浸種技術，銅制劑和抗生素類化學藥劑進行防治。用物理方法處理種子，操作簡單，能減輕病害的發生，但不能根除。施用可殺得等銅制劑濃度掌握不當，易造成西瓜和甜瓜藥害。運用過量抗生素類化學藥劑易造成的果實殘留，對部分人群健康有害。應用抗病品種防治該病是最簡便、經濟、有效的途徑，但目前尚未發現有免疫的哈密瓜品種。?

本項目選用了酵母菌作為該病的生防材料，其具有抗逆性強，對環境要求不高，能利用低水平的營養物質迅速繁殖成為主導菌，分泌所產生的胞外多糖具有加強其生存能力和抵制病原菌的侵染作用；受殺蟲劑的影響較小；酵母菌的遺傳學基礎研究的比較清楚，遺傳轉化系統比較完善，具有通過基因工程技術改造提高防效的潛力；大多數拮抗酵母菌不產生對人體有害的抗菌素，同時可以避免病菌對抗菌素產生抗性而降低生物防治的效果。因此，這些獨具優勢的特性使酵母菌成為植物病害生物防治的一類極具應用潛能的新資源菌，在今后植物病害防治中起著舉足輕重的生防作用，越來越受到人們的重視。?

20世紀50年代以來，酵母菌在植物病害防治領域的研究發展迅速，利用酵母菌防治植物真菌病害的研究已取得了不少的突破性進展，尤其在果蔬采后病害的防治上相關文獻報道很多，但對于植物細菌病害防治目前國內外研究少見報道。迄今為止，已報道有20多種酵母菌用于蘋果、梨、草莓、柑橘、葡萄、桃、櫻桃、油桃、獼猴桃等果實真菌病害的生物防治。一些國家還成功利用酵母菌研制開發了安全有效的生物制劑等，在控制柑橘類和仁果類果實采后腐爛具有很好的防效。利用酵母菌防治病害已逐步發展成為國內外研究的熱點。?

發明內容

本發明的目的是克服現有技術所存在的上述不足，而提供一株酵母菌株PA0732-1及其應用。通過從外界環境中經大量的分離、篩選酵母菌，成功獲得一株拮抗Aac效果顯著的酵母菌株PA0732-1，證明了利用酵母菌可以防治細菌性病害。同時發現酵母菌株0732-1發酵液中存在酸性抑細菌菌物質。利用酵母菌發酵液處理種子，不僅安全環保、效果明顯、病原細菌不易產生抗藥性，而且不會因處理不當影響種子萌發。另外，施用PA0732-1于田間，易定殖于哈密瓜植株表面，對哈密瓜病害具有很好的預防效果。?

其技術方案為：?

本發明所述酵母菌株分離于石河子西瓜葉片表面，菌株代號為PA0732-1，該菌株于2012年11月19日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，菌種保藏號為CGMCC?No.6840。?