[發明專利]一種水產副產品源Ⅰ型膠原抗氧化肽的制備工藝

有效

• 申請號: 201310386159.7
• 申請日: 2013-08-30
• 公開（公告）號: CN103468772A
• 公開（公告）日: 2013-12-25
• 發明（設計）人: 陳俊德;易瑞灶;洪碧紅;洪專;李龍;許諾華;高然;鄭美華;余琳
• 申請（專利權）人: 國家海洋局第三海洋研究所
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06
• 代理公司: 廈門市新華專利商標代理有限公司 35203
• 代理人: 麻艷

技術領域

本發明涉及一種水產副產品源Ⅰ型膠原抗氧化肽的制備工藝，屬于生物技術領域。

背景技術

自由基嚴重威脅著人類的健康，現代研究表明：白內障、心血管疾病、動脈硬化、糖尿病、老年癡呆癥及衰老等老齡病均被公認與自由基應激損傷密切相關。人工合成抗氧化劑的療效得到醫學界的普遍認可，但其毒副作用使其使用受到限制，高安全性的水產副產品源膠原抗氧化肽為研究的熱點，可廣泛應用于食品、保健品和化妝品等領域，具有巨大的市場前景。

水產副產品源膠原抗氧化肽上世紀90年代在國外得到廣泛的研究，進入21世紀以后，國內關于水產副產品源膠原抗氧化肽的研究也取得豐碩的成果，部分產品獲得國家保健品批號。水產副產品除含有Ⅰ型膠原蛋白外還含有Ⅱ、Ⅴ、Ⅺ不同類型的膠原蛋白，單一型膠原規模化制備技術成為制約單一型膠原活性肽產業化研發的瓶頸問題，目前未見有涉及利用水產副產品生產Ⅰ型膠原抗氧化肽的相關專利，現有的市面上的膠原抗氧化肽產品都為多種類型膠原肽混合物產品，未見Ⅰ型膠原抗氧化肽的產品上市。為了提高膠原抗氧化肽產品的附加值，急需開發一種水產副產品源Ⅰ型膠原抗氧化肽的制備工藝。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是針對目前水產副產品源膠原抗氧化肽存在的生產成本高、提取產率低、產品蛋白質含量低、生物活性低、安全性低、附加值低等問題，提供一種工藝簡單安全、成本低、產品蛋白質含量高、生物活性高，且僅含有單一型膠原蛋白肽（Ⅰ型）的水產副產品源Ⅰ型膠原抗氧化肽的制備工藝，以充分利用水產副產品，變廢為寶，開發高附加值的Ⅰ型膠原抗氧化肽。

為解決上述技術問題，本發明的技術解決方案是：

一種水產副產品源Ⅰ型膠原抗氧化肽的制備工藝，包括如下步驟：

1、一種水產副產品源Ⅰ型膠原抗氧化肽的制備工藝，其特征在于：它包括如下步驟：

（1）水產副產品的預處理

將水產副產品投入反應釜中，加入質量百分比濃度為1-5%的堿溶液攪拌除雜，攪拌后用水洗凈；加入體積百分比濃度為0.5-5%的酸溶液攪拌除雜，脫脂脫灰去除水產副產物的脂肪和無機鹽雜質；除雜后的水產副產物投入粉碎機中粉碎；

（2）Ⅰ型膠原蛋白的提取

將粉碎后的水產副產品置于反應釜中，加入水和相當于水產副產品投料重量0.01－0.1%的胃蛋白酶進行酶法提取，反應溫度為1-4℃，反應pH值控制在1-3，反應時間為8-12h，得到Ⅰ型膠原蛋白粗提物，提取產率高于15％；

（3）Ⅰ型膠原蛋白的固液分離

利用離心機分離技術分離Ⅰ型膠原蛋白粗提物，除掉固體雜質；

（4）Ⅰ型膠原蛋白的鹽析

步驟（3）所得清液加入等體積的質量百分比濃度為2-20%的無機鹽溶液鹽析；利用離心機分離技術分離鹽析溶液，得到Ⅰ型膠原蛋白沉淀物；

（5）Ⅰ型膠原蛋白的脫鹽

配置0.5M的醋酸溶液溶解Ⅰ型膠原蛋白沉淀物，利用膜分離技術去除Ⅰ型膠原蛋白溶液的無機鹽，得到高純Ⅰ型膠原蛋白溶液；

（6）Ⅰ型膠原抗氧化肽的制備

將步驟（5）所述的高純Ⅰ型膠原蛋白溶液置于反應釜中，添加相當于水產副產品投料重量0.1－1%的蛋白酶，進行酶解反應，反應溫度為50-55℃，酶解反應pH值控制在7-8，反應2-6小時，酶解反應結束，升溫到85℃滅酶，得到Ⅰ型膠原抗氧化肽溶液；

（7）Ⅰ型膠原抗氧化肽的干燥

利用噴霧干燥技術干燥Ⅰ型膠原抗氧化肽溶液，得到蛋白質含量超過95％的Ⅰ型膠原抗氧化肽粉成品。

所述的步驟（1）預處理使用的堿為碳酸氫鈉或氫氧化鈉，所使用的酸為硫酸或鹽酸或醋酸。

所述的步驟（1）粉碎溫度為1-4℃。

所述的步驟（2）及步驟（6）控制反應pH值所用的堿為碳酸氫鈉或氫氧化鈉，所用的酸為硫酸或鹽酸或醋酸。

所述的步驟（3）和步驟（4）中所用的離心機為轉速為1000－4500rpm/min，離心溫度為1-4℃。

所述的步驟（4）中利用無機鹽鹽析分離純化，所使用的無機鹽為硫酸銨或氯化鈉，鹽析溫度為1-4℃。

所述的步驟（5）中膜分離技術所使用的膜設備為耐酸型卷式納濾膜設備，所使用的膜截留平均相對分子質量為1kD－100kD。

所述的步驟（5）中膜分離技術除鹽，往膠原蛋白溶液加入0.1M醋酸溶液，并控制膠原蛋白溶液溫度為1-4℃。