[發(fā)明專利]人Nectin?2蛋白的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310385399.5
• 申請日: 2013-08-29
• 公開（公告）號: CN104418951B
• 公開（公告）日: 2017-07-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李自強
• 申請（專利權(quán)）人: 北京偉德杰生物科技有限公司
• 主分類號: C07K16/46
• 分類號: C07K16/46;C12N15/13;C12N1/19;C12N1/15;C12N1/21;C12N5/10;A61K39/395;A61P3/04;A61P3/10;A61P43/00
• 代理公司: 北京路浩知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司11002
• 代理人: 王朋飛

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥領(lǐng)域，具體地說，涉及人Nectin-2蛋白的應(yīng)用。

背景技術(shù)

肥胖的發(fā)生是機體能量代謝失調(diào)的結(jié)果，即當(dāng)機體能量攝入超過能量消耗時，余下的能量幾乎完全轉(zhuǎn)化為脂肪，儲藏于全身白色脂肪中。肥胖既是一種獨立的疾病，又是Ⅱ型糖尿病、心血管病、高血壓、中風(fēng)和多種癌癥的誘發(fā)因素。肥胖在世界范圍內(nèi)呈現(xiàn)出爆發(fā)性流行的趨勢，目前我國超重人群2.7億以上，肥胖者9.6千萬以上。肥胖誘發(fā)很多疾病包括：Ⅱ型糖尿病、非酒精脂肪肝、膽結(jié)石、心血管病和老年癡呆癥，有些甚至是癌癥的主要誘發(fā)因素。肥胖是指一定程度的明顯超重與脂肪層過厚，由于食物攝入過多或機體代謝的改變而導(dǎo)致體內(nèi)脂肪積聚過多造成體重過度增長并引起人體病理、生理改變的一種表現(xiàn)。與正常體質(zhì)者相比，肥胖本身并沒有太多明顯特征，但是肥胖會帶來很多嚴(yán)重的并發(fā)癥，包括高血壓、腦卒中、糖尿病、心血管疾病、脂代謝異常、腫瘤和其他代謝性疾病的發(fā)生率明顯增加，而且肥胖與Ⅱ型糖尿病并存，表現(xiàn)為胰島素抵抗、糖耐量減低。肥胖已經(jīng)成為21世紀(jì)影響人健康的主要危險因素之一，嚴(yán)重危害人的身體健康及生活質(zhì)量。

然而，傳統(tǒng)的減肥藥物主要用來控制食欲和抑制營養(yǎng)吸收，而市面上的很多減肥藥物大多副作用明顯，或者效果不穩(wěn)定，容易反彈。因此利用行之有效的方法迅速控制肥胖的蔓延已迫在眉睫。

人體內(nèi)除了白色脂肪之外，還存在棕色脂肪。棕色脂肪中含有豐富的線粒體，以直接產(chǎn)生熱量的方式來消耗能量。研究結(jié)果表明，棕色脂肪的活性與身體質(zhì)量指數(shù)呈顯著性負(fù)相關(guān)，而且有活性的棕色脂肪可以消耗大量的脂肪和血糖，進(jìn)一步提示棕色脂肪在能量代謝過程中起著非常重要的作用。但迄今尚沒有任何直接的證據(jù)表明棕色脂肪參與機體的能量代謝。最新研究結(jié)果提示，相對于控制食欲和抑制營養(yǎng)吸收等傳統(tǒng)的抗肥胖療法，通過棕色脂肪增加機體的能量消耗很可能成為治療肥胖和糖尿病的新方法。目前尚沒有將棕色脂肪分泌的蛋白用于治療糖尿病、肥胖癥及肥胖癥相關(guān)疾病的相關(guān)報道。

Nectin-2是免疫球蛋白超家族成員Nectin家族中的一員。Nectin-2與該家族的其它成員Nectin-1、Nectin-3和Nectin-4結(jié)構(gòu)相似，均屬于單次跨膜蛋白，其膜外具有1個免疫球蛋白超家族V樣結(jié)構(gòu)域和2個免疫球蛋白超家族C樣結(jié)構(gòu)域。研究表明，Nectin-2在各種組織和細(xì)胞系中廣泛表達(dá)，在內(nèi)皮細(xì)胞和上皮細(xì)胞起黏附分子的作用，參與細(xì)胞間的相互作用和連接。Nectin-2作為細(xì)胞黏附分子，能夠親同種或與異種相互作用，即細(xì)胞膜上的Nectin-2胞外域可與不同細(xì)胞表面上的同類分子或不同類分子相互作用。已有報道中，對于與高血脂有關(guān)的ApoE、ApoC1和Tomm40等基因研究較多，而與這些基因位于同一個染色體上，且遺傳距離與這些基因較近的、并在棕色脂肪里高表達(dá)的Nectin-2對脂肪代謝功能的研究尚未見報道。推測Nectin-2有可能參與脂肪酸代謝。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是從促進(jìn)能量代謝的全新角度出發(fā)，提供人Nectin-2蛋白在促進(jìn)機體能量消耗中的功能，從而達(dá)到治療糖尿病、肥胖以及相關(guān)疾病的全新用途。

為了實現(xiàn)本發(fā)明目的，本發(fā)明首先提供一種融合蛋白，所述融合蛋白由三個連續(xù)的免疫球蛋白樣結(jié)構(gòu)域（Immunologlobin-like domain，Ig-like domain）組成（圖1），分別是N端的一個Ig-like V結(jié)構(gòu)域和C端的兩個Ig-like C2-type1和Ig-like C2-type2結(jié)構(gòu)域，三個結(jié)構(gòu)域之間由兩段Linker（Linker1和Linker2）連接。其中，N端的Ig-likeV結(jié)構(gòu)域、中間的Ig-like C2-type1結(jié)構(gòu)域以及C端的Ig-like C2-type2結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列分別如SEQ ID No.1-3所示。每段Linker由1-10個氨基酸串聯(lián)而成。例如，Linker1的氨基酸序列為RVIAK，Linker2的氨基酸序列為VRYP。Linker也可為其他柔性氨基酸序列，例如GGGGS或GGGGS的重復(fù)片段等。

前述的融合蛋白為人Nectin-2蛋白的ECD區(qū)（即胞外區(qū)，圖1），其為：

1）由SEQ ID No.4所示的氨基酸序列構(gòu)成的蛋白；或

2）SEQ ID No.4所示氨基酸序列經(jīng)取代、缺失和/或添加一個或幾個氨基酸且同等功能的由1）衍生的蛋白；或

3）與SEQ ID No.4所示氨基酸序列的同源性在90%以上的氨基酸序列構(gòu)成的蛋白。