[發(fā)明專利]藥物活性成分篩選方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310382294.4
• 申請(qǐng)日: 2013-08-28
• 公開（公告）號(hào): CN103439425A
• 公開（公告）日: 2013-12-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王超;文愛東;吳寅;賈艷艷;肖茜;楊志福;楊靜;趙超;李玉文;賈娜;李銳莉;張維;曹珊珊;王璐;崔佳
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/34
• 代理公司: 西安智邦專利商標(biāo)代理有限公司 61211
• 代理人: 姚敏杰

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，涉及一種藥物活性成分的篩選方法，尤其涉及一種以藥效為導(dǎo)示以微乳為分離介質(zhì)的藥物活性成分篩選方法。

背景技術(shù)

中醫(yī)藥具有悠久的歷史和顯著的療效，但中藥的基礎(chǔ)性研究比較薄弱，絕大多數(shù)中藥的化學(xué)成分尚未觸及，活性成分研究更是無從開展。其中制約中藥在國際市場開拓和競爭的主要原因是缺乏行之有效的中藥活性成分研究方法。現(xiàn)在普遍使用的研究方法是提取中藥單一成分或抽提出某一餾分，然后進(jìn)行藥理實(shí)驗(yàn)確定其活性成分，這種方法的研究層面和深度往往根據(jù)研究者的認(rèn)知而受到局限，也同時(shí)大大降低了成功概率。

目前對(duì)中藥活性成分篩選的研究策略和假說中最有代表性的是全成分論和活性成分論。全成分論認(rèn)為傳統(tǒng)中藥之所以能產(chǎn)生療效是其中所有化學(xué)成分均起作用，若將任何一種成分去除都違背中醫(yī)的整體觀念。該理論的認(rèn)識(shí)局限于“整體觀念”，使中藥中的活性成分開發(fā)思路變窄，活性成分論有兩種觀點(diǎn)：①血清藥理學(xué)：1988年日本學(xué)者田代真一就提出了血清藥理學(xué)，該理論基于人體研究，并認(rèn)為藥物若起到治療作用必須能進(jìn)入血液，所以這些成分才有可能是真正的活性成分，這一理論大大縮小了尋找中藥活性成分的范圍，但缺乏從含藥血清中確定活性成分的方法；②傳統(tǒng)天然藥物化學(xué)法：即根據(jù)臨床療效有“針對(duì)性”的在體外對(duì)中藥復(fù)方進(jìn)行提取、分離、鑒定，從而得到其活性成分，但由于其不能還原真實(shí)的體內(nèi)環(huán)境，且局限于人的認(rèn)知范圍，所以得到的活性成分難以實(shí)現(xiàn)原中藥復(fù)方的全部功效，甚至出現(xiàn)藥物作用和主治范圍脫節(jié)，從而引起活性更強(qiáng)的成分被丟失等現(xiàn)象。既往文獻(xiàn)報(bào)道活性成分都是通過血液運(yùn)送到靶器官的，若中藥復(fù)方能產(chǎn)生明確的療效，可能是其所含的活性成分被轉(zhuǎn)運(yùn)到靶器官并與受體結(jié)合產(chǎn)生作用；若一個(gè)有效的中藥復(fù)方用藥后藥效逐漸消失，可能是被轉(zhuǎn)運(yùn)到靶器官的活性成分由于代謝導(dǎo)致濃度下降而使藥效消失。

不難發(fā)現(xiàn)，制約中藥活性成分篩選的具體問題如下：①藥物進(jìn)入體內(nèi)后所收集的生物體液樣品大多需經(jīng)過前處理，而前處理中極有可能顧此失彼：比如親水性化合物和親脂性化合物只能兼顧一種，酸性化合物、堿性化合物以及中性化合物不能同時(shí)存在于生物體液樣品。②藥物進(jìn)入體內(nèi)后會(huì)根據(jù)內(nèi)環(huán)境的不同而轉(zhuǎn)變成不同性質(zhì)的物質(zhì)，或酸或堿或中性。現(xiàn)有技術(shù)造成物質(zhì)分離參數(shù)的種類有限，難以將生物體液樣本中的這些物質(zhì)同時(shí)檢測并有效分離，成為中藥活性成分研究的瓶頸問題。只有應(yīng)用新方法和新技術(shù)，加強(qiáng)中藥活性成分研究，才能加速中藥現(xiàn)代化步伐。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決背景技術(shù)中存在的上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了一種可準(zhǔn)確以及快速地確定中藥中活性成分的藥物活性成分篩選方法。

本發(fā)明的技術(shù)解決方案是：本發(fā)明提供了一種藥物活性成分篩選方法，其特殊之處在于：所述方法包括以下步驟：

1）初步確定藥物活性成分：

1.1）獲取病理體的病理學(xué)藥效指標(biāo)；

1.2）根據(jù)步驟1.1）所得到的病理體的病理學(xué)藥效指標(biāo)獲取待確定藥物活性成分的藥物的最大藥效點(diǎn)的時(shí)刻以及最小藥效點(diǎn)的時(shí)刻；

1.3）在待確定藥物活性成分的藥物的最大藥效點(diǎn)的時(shí)刻以及最小藥效點(diǎn)的時(shí)刻分別獲取病理體的全血和/或體液；

1.4）根據(jù)微乳液相色譜法對(duì)步驟1.3）所得到的病理體的全血和/或體液分別建立全指紋圖譜；

1.5）根據(jù)藥效差示血清色譜法將步驟1.4）所建立得到的全指紋圖譜進(jìn)行對(duì)比，所述全指紋圖譜中反差最大的是初步確定的藥物活性成分；所述反差最大是在最大藥效時(shí)間點(diǎn)的全指紋圖譜和最小藥效時(shí)間點(diǎn)的全指紋圖譜中色譜峰變化最大的部分；

2）獲取初步確定的藥物活性成分；

3）檢測、篩選并確定藥物活性成分。

上述步驟1.1）的具體實(shí)現(xiàn)方式是：

1.1.1）建立病理體的病理模型；

1.1.2）對(duì)病理體注射待確定藥物活性成分的藥物；

1.1.3）根據(jù)常規(guī)檢測手段檢測已經(jīng)注射待確定藥物活性成分的藥物的病理體的各項(xiàng)病理學(xué)藥效指標(biāo)。

上述步驟2）的具體實(shí)現(xiàn)方式是：

判斷步驟1）所初步確定的藥物活性成分是否是標(biāo)準(zhǔn)品；若是標(biāo)準(zhǔn)品，則直接采用標(biāo)準(zhǔn)品；若否，則采用常規(guī)技術(shù)手段制備步驟1）所初步確定的藥物活性成分。

上述步驟3）的具體實(shí)現(xiàn)方式是：

判斷步驟2）所獲取初步確定的藥物活性成分是否采用標(biāo)準(zhǔn)品，若是，則直接確認(rèn)步驟2）所采用的標(biāo)準(zhǔn)品就是待確定藥物的藥物活性成分；若否，則根據(jù)常規(guī)技術(shù)手段檢測、篩選并確定待測藥物的藥物活性成分。

上述方法在步驟3）之后還包括：