[發(fā)明專利]一種PCT的檢測試劑條及其制備方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310381344.7
• 申請日: 2013-08-24
• 公開（公告）號: CN103454425A
• 公開（公告）日: 2013-12-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 管義東
• 申請（專利權(quán)）人: 管義東
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/558
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技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明公開一種免疫層析試紙條，具體涉及一種檢測PCT的免疫層析試紙條及其制備方法。?

背景技術(shù)

免疫層析試紙是一種利用層析原理將待檢測液中的目標(biāo)檢測分子或成分等在試紙條上流動至檢測線(T線)和質(zhì)控線(C線)，當(dāng)檢測線發(fā)生顏色變化則說明檢測結(jié)果為陽性，否則為陰性，當(dāng)質(zhì)控線發(fā)生顏色變化時，則說明檢測結(jié)果有效，否則無效。?

免疫層析試紙在檢測或診斷某些疾病時具有非常便利的優(yōu)點，因此其已被充分運用到多種疾病或癥狀的檢測或診斷過程中。一般情況下，免疫層析試紙包含有以下幾種結(jié)構(gòu)：樣品墊、結(jié)合墊、層析膜、吸水墊、支撐墊，所述樣品墊、膠體金結(jié)合墊、層析膜和吸水墊依次粘貼在支撐墊上；所述層析膜上依次設(shè)置有檢測線和質(zhì)控線；其工作原理為：將待測液滴加至樣品墊上，待測液利用層析原理流向結(jié)合墊，待測液中待測物與結(jié)合墊中的膠體金結(jié)合物結(jié)合，并與其共同依次流向?qū)游瞿ど系臋z測線和質(zhì)控線；當(dāng)待測液中含有目標(biāo)檢測分子，則目標(biāo)檢測分子、膠體金結(jié)合物會與檢測線內(nèi)包含的抗體成分結(jié)合從而形成免疫復(fù)合物，同時檢測線顏色發(fā)生變化；當(dāng)待測液流至質(zhì)控線時，質(zhì)控線內(nèi)包含的抗體成分會與膠體金結(jié)合物結(jié)合，從而質(zhì)控線顏色發(fā)生變化。?

PCT(procalcitonin，降鈣素原)是一種蛋白質(zhì)，當(dāng)嚴(yán)重細菌、真菌、寄生蟲感染以及膿毒癥和多臟器功能衰竭時它在血漿中的水平升高。自身免疫、過敏和病毒感染時PCT不會升高。局部有限的細菌感染、輕微的感染和慢性炎癥不會導(dǎo)致其升高。細菌內(nèi)毒素在誘導(dǎo)過程中擔(dān)任了至關(guān)重要的作用。?

PCT反映了全身炎癥反應(yīng)的活躍程度。影響PCT水平的因素包括被感染器官的大小和類型、細菌的種類、炎癥的程度和免疫反應(yīng)的狀況。另外，PCT只是在少數(shù)患者的大型外科術(shù)后1～4d可以測到。?

PCT水平的升高出現(xiàn)在嚴(yán)重休克、全身性炎癥反應(yīng)綜合征(SIRS)和多器官功能紊亂綜合征(MODS)，即使沒有細菌感染或細菌性病灶。但是，在這些病例中PCT水平通常低于那些有細菌性病灶的患者。從腸道釋放細胞因子或細菌移位可能引起誘導(dǎo)。?

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于此，本發(fā)明提供一種檢測PCT的免疫層析試紙條及其制備方法，具有采樣容易、操作簡便、反應(yīng)快速、敏感性高、特異性強、適合現(xiàn)場檢測等優(yōu)點。?

為解決以上技術(shù)問題，本發(fā)明的技術(shù)方案是采用一種PCT檢測免疫層析試紙，該免疫層析試紙包括有樣品墊、結(jié)合墊、層析膜、吸水墊和支撐墊；所述樣品墊、膠體金結(jié)合墊、層析膜、吸水墊依次按順序與支撐墊連接；其特征在于：層析膜上依次設(shè)置有檢測區(qū)和質(zhì)控區(qū)，所述檢測區(qū)靠近膠體金結(jié)合墊一端，質(zhì)控區(qū)靠近吸水墊一端；所述檢測區(qū)內(nèi)設(shè)置有檢測線，所述檢測線為由鼠抗人PCT單克隆抗體包被形成；所述質(zhì)控區(qū)內(nèi)設(shè)置有質(zhì)控線，所述質(zhì)控線為由羊抗鼠IgG多克隆抗體包被形成；所述膠體金結(jié)合墊：將鼠抗?人PCT單克隆抗體和膠體金制備成膠體金結(jié)合墊。?

所述檢測線以及質(zhì)控線中各抗體的工作液濃度為鼠抗人PCT單克隆抗體1.5-2.5mg/mL、羊抗鼠IgG多克隆抗體1.0-2.0mg/mL。?

所述檢測線以及質(zhì)控線中各抗體的工作液濃度為鼠抗人PCT單克隆抗體2.0mg/mL、羊抗鼠IgG多克隆抗體1.5mg/mL。?

所述PCT檢測免疫層析試紙的制備步驟如下：?

A、將各抗體檢測線工作液和質(zhì)控線工作液在硝酸纖維素膜上進行包被，所得硝酸纖維素膜在36-38℃下干燥8-12小時得層析膜；?

B、將鼠抗人PCT單克隆抗體和膠體金制備成膠體金結(jié)合墊；?

C、將A和B步驟所得的層析膜和膠體金結(jié)合墊按照樣品墊、膠體金結(jié)合墊、層析膜、吸水墊的順序依次粘貼在膠板上制備得所述檢測PCT免疫層析試紙。?

本發(fā)明的有益效果是：一種檢測PCT的免疫層析試紙條及其制備方法，和傳統(tǒng)試劑相比，具有采樣容易、操作簡便、反應(yīng)快速、敏感性高、特異性強、適合現(xiàn)場檢測減少檢測人員的工作量的等優(yōu)點。?

附圖說明：

圖1：PCT檢測試劑盒試紙結(jié)構(gòu)示意圖。?

附圖符號說明：1：樣品墊；2：結(jié)合墊；3：層析膜；4：吸水墊5：檢測線(T)；6：質(zhì)控線(C)；7：支撐墊。?

具體實施方式

實施例：?

A、將各抗體檢測線工作液和質(zhì)控線工作液在硝酸纖維素膜上進行包被，所得硝酸纖維素膜在36-38℃下干燥8-12小時得層析膜；?

B、將鼠抗人PCT單克隆抗體和膠體金制備成膠體金結(jié)合墊；?

C、將A和B步驟所得的層析膜和膠體金結(jié)合墊按照樣品墊、膠體金結(jié)合墊、層析膜、吸水墊的順序依次粘貼在膠板上制備得所述檢測PCT免疫層析試紙。?