[發明專利]一種高效凈化植物中硝基亞甲基類新煙堿殺蟲劑的方法

有效

• 申請號: 201310377893.7
• 申請日: 2013-08-27
• 公開（公告）號: CN103439424A
• 公開（公告）日: 2013-12-11
• 發明（設計）人: 葉慶富;張鍵波
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N1/34
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 杜軍

技術領域

?????本發明屬于農藥殘留分析技術領域，具體涉及一種高效凈化植物中硝基亞甲基類新煙堿殺蟲劑的方法。

背景技術

?????自上世紀80年代第一個新煙堿類殺蟲劑上市以來，新煙堿類殺蟲劑得到迅速發展。然而，隨著長時間的施藥，以吡蟲啉為代表的新煙堿類殺蟲劑田間抗性不斷增加，開發新型新煙堿類殺蟲劑顯得十分必要。硝基亞甲基類新煙堿殺蟲劑是我國自主創制的一種新煙堿類手性殺蟲劑，主要用于防治同翅目害蟲，對稻飛虱和蔬菜蚜蟲具有良好的防治效果（如哌蟲啶對其防效均達90﹪以上)。在當今吡蟲啉抗性不斷增加的情況下，新型硝基亞甲基類新建殺蟲劑是一類具有廣闊市場潛力的新農藥。

????根據我國農藥登記相關規定，必須提供農藥在環境中，尤其是施藥對象（如蔬菜）中的殘留情況。歐盟、美國等國家進一步要求必須提供農藥在施藥對象（如蔬菜）中代謝降解相關數據。我國在這方面起步較晚，但農業部已經就相關規定進行研究討論，農藥登記需提供農藥在植物中的殘留及代謝相關數據將成為必然趨勢。

????為此，植物中硝基亞甲基類新煙堿殺蟲劑的提取、凈化方法顯得十分迫切。目前國內外鮮見提取植物中硝基亞甲基類新煙堿殺蟲劑的文獻。且現有其他新煙堿類農藥的方法都沒有經過固相萃取分離純化，會導致樣品雜質過多，影響儀器使用壽命及檢測結果的準確性。有的方法采用的填料去除雜質效果不明顯，影響實驗效率。

發明內容

本發明的目的是針對現有技術的上述不足，提供一種操作簡單、用時較少、且能有效去除干擾物質的植物中硝基亞甲基新煙堿殺蟲劑的提取凈化方法。

本發明方法是：

在植物樣品中加入乙腈-水混合液混合均勻后，提取、離心，取上清液濃縮，得到濃縮液；將濃縮液過固相萃取柱，用甲醇-水混合液淋洗，甲醇洗脫，收集洗脫液，濃縮，得到殺蟲劑的提取液。

所述的植物樣品為在液氮下將植物研磨成粉末狀的植物組織。

所述的植物樣品與乙腈-水混合液的體積比為4：1～1：4。

所述的乙腈-水混合液中乙腈與水的體積比為1：3～5，優選為2:8。

所述的甲醇-水混合液中甲醇與水的體積比為1：19～3：17，優選為1:9。

所述的提取可以選用振蕩或超聲等方法，本發明優選選用超聲提取15min，離心為8000r/min離心10分鐘，提取、離心步驟重復兩次。

所述的過固相萃取柱前需依次用甲醇和水預淋洗萃取柱，可活化固相萃取柱。

所述的洗脫液濃縮后轉移至棕色刻度定量濃縮瓶中，在氮吹儀下用氮氣吹干，用乙腈定容至1mL。

所述的固相萃取柱內填充有400～500mg的石墨化碳黑，優選石墨化碳黑的填充量為500mg；該石墨化碳黑作為吸附劑。

?????本發明方法可應用于提取凈化土壤、果實類、根類作物、葉類作物、谷類與飼料作物及豆類與油籽類作物中硝基亞甲基類新煙堿殺蟲劑。?

?????現有的提取方法中，有用玻璃層析柱進行過柱分離的，所用玻璃層析柱中吸附劑為大孔吸附樹脂。大孔吸附樹脂過濾效果較好，但其平衡、上樣、淋洗、洗脫時間長，且填充不方便。有用C18作為吸附劑的，但C18對于極性較大的新煙堿類殺蟲劑保留效果不好。本發明使用石墨化碳黑作為吸附劑，克服了上述缺陷，柱子平衡、上樣、淋洗、洗脫時間短，且能夠最大限度地去除干擾物，使后期的檢測結果更為準確。

????本發明用超聲提取、固相萃取柱分離純化，具有提取時間短、效率高、凈化效果好、回收率高等特點。

附圖說明

圖1為實施例2中第一組未經固相萃取柱純化的液相檢測圖；

圖2為實施例2中第二組經過固相萃取柱純化的液相檢測圖；

圖3為實施例2中第三組經過固相萃取柱純化的液相檢測圖。

具體實施方式

????以下通過具體實施方式進一步解釋本發明，實施例中如無特殊說明均為本領域常規實驗手段。

實施例1.小白菜中哌蟲啶的提取測定

?1.?植物樣品制備

將小白菜種子在30℃下催芽，將催芽后的種子種在土壤中，在植株長至3葉期施藥，長至5葉期收獲，冷凍，液氮下磨碎，備用。

2.?超聲、離心提取