[發明專利]一株可降解吡啶的根瘤桿菌、選育方法及其應用

有效

• 申請號: 201310374832.5
• 申請日: 2013-08-23
• 公開（公告）號: CN103540544A
• 公開（公告）日: 2014-01-29
• 發明（設計）人: 沈錦優;王連軍;張鑫;陳丹;孫秀云;李健生;劉曉東
• 申請（專利權）人: 南京理工大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/02;C02F3/34;C12R1/41;C02F101/38
• 代理公司: 南京理工大學專利中心 32203
• 代理人: 朱顯國

1.一株可降解吡啶的根瘤桿菌，其特征在于它于2013年3月28日在中國典型培養物保藏中心CCTCC保藏，保藏單位地址為中國湖北省武漢市武漢大學，保藏編號為CCTCC?NO:M2013110，命名為根瘤桿菌NJUST18，其分類命名為(Rhizobium?sp.),GenBank登陸號為JN106368。

2.根據權利要求1所述的可降解吡啶的根瘤桿菌，其特征在于所述的根瘤桿菌菌落特征和生理生化特征為：呈白色，圓形，邊緣整齊，光滑濕潤，該菌株細胞呈短桿狀，表面光滑，以周生鞭毛運動，不形成芽孢，尺寸為2-3μm×0.8-0.9μm；革蘭氏陰性，催化酶陰性，氧化酶陰性，接觸酶陰性，尿素酶陰性。

3.一種如權利要求1所述的可降解吡啶的根瘤桿菌的選育方法，其特征在于包括以下步驟：

（1）菌株的分離：將長期受到吡啶污染的排污口取出的土樣2g加入到50mL含500mg/L吡啶的液體無機鹽培養基MSM中，裝入150mL三角瓶中，30℃條件下以180轉/分的轉速搖床培養進行富集培養；7天后，2mL富集培養后的液體培養基轉接入50mL新鮮液體無機鹽培養基MSM中，并搖床培養；經過連續3次轉接后，用無菌蒸餾水將轉接后的液體培養基稀釋10⁵-10⁹倍，涂布于含1000mg/L吡啶的無機鹽固體培養基平板上，放入30℃培養箱中進行培養；一周后挑取在菌落特征上有明顯差異的菌落，采用平板劃線分離的方法進行純化，連續純化三次后，得到單一菌株，并進行斜面保存。

（2）菌株的篩選：挑取分離所得到的單菌落，分別接種于含1000mg/L吡啶的無機鹽液體培養基中，搖床培養120h；測定培養基中吡啶濃度變化，選取培養基中吡啶濃度顯著降低的單菌落。

4.一種利用權利要求1所述的可降解吡啶的根瘤桿菌在吡啶廢水治理中的應用。

5.根據權利要求4所述的可降解吡啶的根瘤桿菌在吡啶廢水治理中的應用，其特征在于所述的吡啶廢水的pH值為5-8，廢水中吡啶濃度不超過2600mg/L。