[發明專利]與豬脂肪沉積性狀相關的分子標記及其應用

無效

• 申請號: 201310373535.9
• 申請日: 2013-08-23
• 公開（公告）號: CN103451180A
• 公開（公告）日: 2013-12-18
• 發明（設計）人: 張浩;魯云風;強巴央宗;李慶崗;吳克亮;張博;王志秀
• 申請（專利權）人: 中國農業大學
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12N15/10;C12Q1/68
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王朋飛

1.一種與豬脂肪沉積性狀相關的分子標記，其特征在于，其核苷酸序列如序列表SEQ?ID?NO.1所示，在第157位有1個C157-T157堿基突變，導致BsmⅠ-RFLP多態性。

2.根據權利要求1所述的分子標記，其特征在于，所述堿基突變的位點為Intron3-C54T位點，位于豬ECI1基因第3內含子第54bp處。

3.權利要求1所述的分子標記的制備方法，其特征在于，以豬基因組DNA為模板，設計引物，進行PCR擴增，目的在于擴增包含Intron3-C54T位點的DNA序列。

4.根據權利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述引物的核苷酸序列如下：

正向引物：5’-GCTGCCTCCTCTCCCTCA-3’；

反向引物：5’-GGAACAGCCAGCCACTTG-3’。

5.根據權利要求3或4所述的制備方法，其特征在于，PCR反應體系為25μL，其中10×PCR?Buffer2.5μL，10mmol/L?dNTP?mix2.0μL，5pmol/μL的引物各1μL，Taq?DNA聚合酶（5U/μL）0.5μL，DNA模板1μL（DNA約100ng），加dd?H2O至25μL。

6.根據權利要求3或4所述的制備方法，其特征在于，PCR反應條件為95℃預變性5min；95℃變性30s，65℃復性30s，72℃延伸20s，36個循環；72℃延伸7min；降溫至4℃保持。

7.一種用于擴增權利要求1所述分子標記的引物對，其核苷酸序列如下：

正向引物：5’-GCTGCCTCCTCTCCCTCA-3’；

反向引物：5’-GGAACAGCCAGCCACTTG-3’。

8.權利要求1所述的分子標記在豬標記輔助選擇中的應用。