[發明專利]一種血細胞分析芯片、分析儀及分析方法

有效

• 申請號: 201310372923.5
• 申請日: 2013-08-23
• 公開（公告）號: CN103472034A
• 公開（公告）日: 2013-12-25
• 發明（設計）人: 李芳芳;游璠;周樹民;黃石;薛廣洲
• 申請（專利權）人: 深圳中科強華科技有限公司
• 主分類號: G01N21/47
• 分類號: G01N21/47
• 代理公司: 深圳市科進知識產權代理事務所(普通合伙) 44316
• 代理人: 宋鷹武;郝明琴

1.一種血細胞分析芯片，其特征在于，包括：白細胞分析芯片及紅細胞、血小板或血紅蛋白分析芯片，所述白細胞分析芯片包括過氧化物酶檢測芯片和嗜堿性粒細胞檢測芯片，所述過氧化物酶檢測芯片利用激光散射和過氧化物酶染色技術進行細胞分類，所述嗜堿性粒細胞檢測芯片采用生物溶解及電阻抗法檢測嗜堿性粒細胞，所述紅細胞、血小板或血紅蛋白分析芯片采用雙角度激光法檢測紅細胞及血小板，以及采用紅細胞光學散射法檢測血紅蛋白。

2.根據權利要求1所述的血細胞分析芯片，其特征在于，所述過氧化物酶檢測芯片上設置有儲液池、廢液池、檢測區和定量組件，所述儲液池用于存儲檢測試劑，所述廢液池用于存儲經過檢測的血液樣本，所述檢測區用于使血液樣本的白細胞經過檢測區時進行激光束照射，通過光散射及細胞大小不同對檢測的血液樣本進行分類，所述定量組件用于使各儲液池內相應流體定量。

3.根據權利要求1所述的血細胞分析芯片，其特征在于，所述嗜堿性粒細胞檢測芯片上設置有儲液池、廢液池、檢測區和定量組件，所述儲液池用于存儲血液樣本和稀釋液，所述廢液池用于存儲經過檢測的血液樣本，所述檢測區用于血液樣本的細胞經過檢測區時采用電阻抗技術依據細胞大小進行檢測，通過電子脈沖大小及數目計算白細胞裸核與嗜堿性粒細胞的有效數值，所述定量組件用于使各儲液池內相應流體定量。

4.根據權利要求1所述的血細胞分析芯片，其特征在于，所述紅細胞、血小板或血紅蛋白檢測芯片上設置有儲液池、廢液池、檢測區和定量組件，所述儲液池用于存儲血液樣本和稀釋液，所述廢液池用于存儲經過檢測的血液樣本，所述檢測區用于使血液樣本的白細胞經過檢測區時進行激光束照射，通過光散射及細胞大小不同對檢測的血液樣本進行分類，所述定量組件用于使各儲液池內相應流體定量。

5.根據權利要求2至4任一項所述的血細胞分析芯片，其特征在于，所述白細胞分析芯片及紅細胞、血小板或血紅蛋白分析芯片采用材料包括石英、玻璃、單晶硅或高分子聚合材料；所述儲液池進樣采用微泵、電動進樣、正向壓力驅動進樣、負壓進樣或電滲進樣多種方式。

6.一種血細胞分析儀，其特征在于，包括如權利要求1所述的血細胞分析芯片、檢測單元和信號處理系統，所述血細胞分析芯片、檢測單元和信號處理系統依次相連，所述血細胞分析芯片用于承載血細胞，所述檢測單元用于對檢測區施加激光束對血細胞進行照射，所述信號處理系統對檢測區上下兩端施加恒定電流，檢測每個細胞產生與細胞體積成比例的電子脈沖，依據設定的閾值，區分白細胞裸核與嗜堿性粒細胞，給出準確的白細胞總數及嗜堿性粒細胞有效數值，或所述信號處理系統采用高角度散射光測量細胞過氧化物酶含量情況、紅細胞內的血紅蛋白濃度、血紅蛋白含量平均值或測量細胞折射指數，所述信號處理系統采用低角度散射光測量細胞體積或大小。

7.一種血細胞分析方法，其特征在于，包括：

步驟a：利用激光散射和過氧化物酶染色技術對細胞進行分類；

步驟b：采用生物溶解技術及電阻抗法檢測嗜堿性粒細胞；

步驟c：采用雙角度激光法檢測紅細胞及血小板，以及采用紅細胞光學散射法檢測血紅蛋白。

8.根據權利要求7所述的血細胞分析方法，其特征在于，所述步驟a包括：抗凝血、稀釋液、清洗劑和甲醛等滲液體分別進樣到儲液池S1、R1、R2，全血進行適當稀釋并短時間孵育；經儲液池R5、R6分別與過氧化氫和四氯-萘酚混合并加熱，細胞內過氧化物酶分解過氧化氫產生氧離子，氧離子使四氯-萘酚顯色并沉淀定位于酶反應部位；鞘液進樣到儲液池R7，經化學染色的血液樣本在鞘液流作用下，白細胞排成一行且依次通過檢測區A1；經激光束照射流入廢液池W1，根據光散射及細胞大小不同進行分類。

9.根據權利要求7所述的血細胞分析方法，其特征在于，所述步驟b包括：抗凝血進樣到儲液池S2，特殊的嗜堿性粒細胞稀釋液進樣到儲液池R3，定量抗凝血和定量稀釋液從各自儲液池流出并混合，鞘液進樣到儲液池R8，經處理的血液樣本在定量鞘液流作用下，白細胞排成一行且依次通過計數檢測區A2，檢測區A2上下兩端施加恒定電流，經電阻抗檢測流入廢液池W2，依據閾值設定經信號處理系統處理分析，區分白細胞裸核與嗜堿性粒細胞，給出準確的白細胞總數及嗜堿性粒細胞有效數值。

10.根據權利要求7所述的血細胞分析方法，其特征在于，在所述步驟c中，所述雙角度激光法檢測包括使用低角度散射光和高角度散射光，其中，所述低角度散射光用于測量紅細胞體積，高角度散射光測量每個紅細胞內的血紅蛋白濃度和血紅蛋白含量平均值，在血小板計數分析上，高角度散射光能測量細胞折射指數，低角度散射光能測量細胞大小。