[發明專利]一種水稻有性雜交殺雄新方法

有效

• 申請號: 201310372682.4
• 申請日: 2013-08-23
• 公開（公告）號: CN103430833A
• 公開（公告）日: 2013-12-11
• 發明（設計）人: 陳大洲;肖葉青;鄔文昌;胡蘭香;羅世友;黎毛毛;萬勇;吳小燕;陳明亮;陳紅萍;鄧偉;熊煥金
• 申請（專利權）人: 江西省農業科學院水稻研究所
• 主分類號: A01H1/02
• 分類號: A01H1/02;A01G7/06
• 代理公司: 北京科億知識產權代理事務所(普通合伙) 11350
• 代理人: 湯東鳳

技術領域

本發明涉及水稻有性雜交方法范疇，尤其涉及一種剪穎破藥噴醋液殺雄的水稻雜交方法。

背景技術

我國不僅是產糧大國，也是消費糧食大國。水稻是糧食中第一大作物，在水稻改良育種中，水稻新品種育種最基本方法是雜交育種，在這過程中，水稻品種進行有性雜交，其母本殺雄絕大部分是采用傳統的“溫湯”殺雄和剪穎人工去雄，既不方便，又費時費力，有性雜交效率低，尤其在生物技術育種研究中，需要大量配組，現有的有性雜交方法難于做到，例如“全球分子育種”需要構建大量的近等基因導入系，采用供體親本118個，授體親本2個，每個供體與授體親本雜交和回交，在回交世代中，授體親本均要與每個回交群體隨機抽取25個單株回交，每個回交世代在一季中要做有性雜交數量5000個，采用常規有性雜交方法是無法做到。究其原因，是因為人工去雄過程中費時費工，有性雜交效率很低。

發明內容

本發明的目的在于克服現有水稻有性雜交技術的不足，提出一種剪穎破藥噴醋液殺雄的水稻雜交方法，以提高水稻有性雜交的效率（相似于利用水稻雄性不育系進行雜交的效率和效果，所不同的是加噴醋液）。

本發明采用以下技術方案實施：

一種剪穎破藥噴醋液殺雄的水稻雜交方法，水稻進行有性雜交時前一天下午至當天開花前將雜交母本未開花的穎花剪去1/4-3/5，要剪破花藥，不損傷柱頭，并立即噴醋液，醋液濃度為0.3-0.5%，加速花粉死亡，達到殺雄效果；授粉前，對剪穎破藥噴醋液殺雄后的稻穗用手指彈幾下，將穎花中的花藥彈出穎殼外，然后套袋，待父本開花時，進行父本授粉雜交。

穎花剪去1/4-3/5，既可除伸長至頂部的大部分花藥，又可剪破中下部未伸長的花藥（因為水稻穎花內的花藥是4長2短共6個）。剪破花藥使其內花粉粒暴露于空氣中，并噴醋液（0.3-0.5%）后不會散出花藥外，還會加速花粉死亡，達到殺雄效果的目的。

本發明采用剪穎破藥噴醋液殺雄方法，可以大量進行水稻（或野生稻）的有性雜交，提高有性雜交的效率，剪穎破藥加噴醋液殺雄率可達100%，方便快捷，效果好，與常規有性雜交相比更能獲得大量雜交種，同時也能滿足大量雜交配組的需要，大大提高有性雜交效率，相當于利用水稻雄性不育系做雜交的效率和效果，所不同的是剪穎破藥后加噴醋液（所用的醋是市場上的食用醋）。

具體實施方式

以下結合具體實施例，對本發明進行詳細說明。

實施例1：

本實施例用不同的水稻品種進行有性雜交，對用作母本的水稻品種“桂99”、“R838”、“協青早B”、“谷梅4號”、“遼粳294”等，在雜交前一天下午剪去1/4-3/5的穎殼，做到剪破花藥，不損傷柱頭，并立即噴醋液（0.3-0.5%），阻止花粉散出，第二天開花前，用右手的拇指和食指合力彈穗子幾下，把剪穎后留在穎花內的花藥彈出來，然后套袋，待父本開花時，將父本“R644”花粉授給已剪穎破藥噴醋液殺雄的母本上，授粉時隔20-25天就可獲得雜交種子，將雜交種子播種在雜交親本（母本和父本）旁邊，鑒定真假雜種，結果剪穎破藥噴醋液殺雄的水稻方法所獲得真雜交種平均為99.86%。

實施例2：

用作雜交母本的水稻品種“黃華占”、“中組14”、“豐華占”、“密陽46”在雜交當天、開花前剪去穎殼1/4-3/5，以剪破花藥或剪除伸至頂部的花藥，并立即噴醋液（0.3-0.5%），阻止花粉散出，然后套袋，待父本開花時，將父本“贛晚秈30號”花粉授給已剪穎破藥噴醋液殺雄的母本上，授粉時隔20天后檢查剪穎破藥噴醋液殺雄后母本自交結實率，結果平均為0.49%。

實施例3：

用作雜交的母本“03B”剪穎破藥后，用不同濃度的醋溶液處理（0.3%、0.5%、0.7%、1.0%，在市售的食醋中加水后的食醋質量百分比濃度），以噴清水和不噴水為對照；剪穎破藥后0.5小時、1.5小時、2.5小時、3.5小時，分別取處理和對照的花藥并夾破將花粉涂在發芽床上，保溫（28℃）保濕（85%）30分鐘，用顯微鏡觀察花粉萌發，

培養基配制：125g/L蔗糖，20mg/L硼酸，40mg/L氯化鈣，瓊脂5g/L，PH5.8；

半固體培養基分裝于100ml三角瓶中，封口后常規高壓滅菌，載玻片、培養皿、鑷子、濾紙、蒸餾水等一起滅菌。

將配制好的培養基分別均勻地涂布在載玻片上制成發芽床，發芽床放入鋪有濕潤濾紙的培養皿中。

凡花粉管伸長超過花粉粒直徑即視為發芽的花粉，說明具有活力，反之為無活力花粉，并統計花粉萌發率。結果見表1。