[發明專利]人PGII抗原表位肽、抗原、抗體、用途及試劑盒

有效

• 申請號: 201310370199.2
• 申請日: 2013-08-22
• 公開（公告）號: CN104418937B
• 公開（公告）日: 2018-01-02
• 發明（設計）人: 朱建安;劉堯;林駿
• 申請（專利權）人: 朱建安
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K7/08;C07K16/40;G01N33/577;G01N33/535
• 代理公司: 北京天昊聯合知識產權代理有限公司11112
• 代理人: 丁業平,張天舒

技術領域

本發明屬于多肽化學和免疫學領域，具體涉及人胃蛋白酶原II（PGII）抗原表位肽、用該抗原表位肽制備的PGII特異性抗原和相應的單克隆抗體或多克隆抗體、所述抗體在制備人PGII體外診斷試劑盒上的用途、人PGII體外診斷試劑盒，以及一種用于定量檢測待測物中人PGII蛋白的熒光免疫層析試紙及其制備方法。

背景技術

胃蛋白酶原（PG）是胃液中胃蛋白酶的無活性前體。人胃蛋白酶原按其電泳遷移率由快至慢，可分為PG1至PG7七種同工酶原，并且根據其生化性質、免疫原性、細胞來源以及組織內分布可分為PGI和PGII兩個亞群。七種同工酶原中的PG1至PG5免疫原性近似，稱為胃蛋白酶原I（PGI），其主要由胃腺的主細胞和黏液頸細胞分泌；PG6至PG7被稱為胃蛋白酶原II（PGII），除了由胃體和胃底黏膜的泌酸腺的主細胞分泌外，泌酸腺的黏液頸細胞、賁門腺和胃竇的幽門腺的黏液細胞以及十二指腸上段的Brunner腺也能產生PGII。胃幾乎是PG的唯一來源，并且在分泌階段的分泌量會發生變化。血清PGI和PGII反映了胃粘膜不同部位的分泌功能。合成后的PG大部分進入胃腔，在酸性胃液作用下活化成胃蛋白酶，只有少量PG（約1%）透過胃黏膜毛。因此，血清PG濃度可以反映其分泌水平。正常人血清中的PGI是PGII的6倍，當胃黏膜發生病理變化時，血清PG含量也隨之發生改變。

血清PG含量與幽門螺桿菌（HP）感染、慢性胃炎、胃癌等相關。在不同胃部疾病中，血清PGI、PGII和PGI/PGII的值發生相應變化，其升高、降低還是不變并不一致，作為診斷或治療結果指標的靈敏度和特異度也各不相同。因此，對于不同胃部疾病，血清PGI、PGII和PGI/PGII的值也有不同的判斷標準。

胃癌是我國常見的惡性腫瘤之一，其病死率居各種惡性腫瘤之首，其早期診斷、早期治療成為提高患者生存質量、降低病死率的唯一途徑。國內外學者對胃癌患者血清PG變化作了大量的研究發現：當患胃癌時，血清PGI水平降低，PGII水平基本保持正常或升高，進而，測定血清PGI的水平和PGI/PGII的比值有助于胃癌的鑒別診斷，過低的PGI和PGI/PGII應警惕早期胃癌。由于血清PG的含量直接反映胃黏膜的功能，因此胃癌患者血清PGI水平明顯下降，表明胃癌患者胃黏膜分泌能力下降。80％以上的胃癌伴有萎縮性胃炎，而萎縮性胃炎可導致胃黏膜主細胞丟失，從而影響其分泌功能；胃癌患者血清PGI水平明顯下降與胃癌患者胃黏膜萎縮、腸化從而分泌降低有關。因此血清PGI及PGI/PGII明顯下降對監測早期胃癌具有重要的臨床意義，可有效應用于胃癌高發區人群的初步篩查。PG檢測作為非侵入性方法，可降低胃病患者或胃癌高危人群檢查的痛苦，并且簡便、經濟，具有重大意義。

檢測血清中的PGII水平的最理想的方法是免疫測定。因此，尋找合適的具有免疫原性的PGII抗原表位肽、制備特異性的PGII抗原及抗體即成為了重點。

發明內容

為解決上述現有技術中所存在的問題，本發明提供了一種人PGII抗原表位肽，用該抗原表位肽制備的PGII特異性抗原和相應的單克隆抗體或多克隆抗體，其在制備人PGII體外診斷試劑盒上的用途，以及人PGII體外診斷試劑盒。

具體而言，本發明提供了：

一種人PGII抗原表位肽，其中所述PGII抗原表位肽的氨基酸序列為如下兩者之一：

(1)Lys-Lys-Phe-Lys-Ser-Ile-Arg-Glu-Thr-Tyr；

(2)Tyr-Thr-Pro-Ser-Arg-Ala-Ala-Pro-Pro-Ser-Ser-Thr-Leu-Gln-Leu-Pro-Glu-Lys。

本發明還提供了一種PGII抗原，其是通過使所述的人PGII抗原表位肽(1)與載體蛋白偶聯制備而成的。

本發明還提供了一種PGII抗原，其是通過使所述的人PGII抗原表位肽(2)與載體蛋白偶聯制備而成的。

本發明還提供了一種人PGII抗體，其是由所述的PGII抗原制備而成的單克隆抗體或多克隆抗體，其中所述PGII抗原是通過使所述的人PGII抗原表位肽(1)與載體蛋白偶聯制備而成的。

本發明還提供了一種人PGII抗體，其是由所述的PGII抗原制備而成的單克隆抗體或多克隆抗體，其中所述PGII抗原是通過使所述的人PGII抗原表位肽(2)與載體蛋白偶聯制備而成的。

本發明還提供了根據所述的人PGII抗體在制備人PGII體外診斷試劑盒上的用途。