[發明專利]一種同時鑒定山羊、綿羊、豬和鴨肉源性的熒光標記基因復合擴增方法

有效

• 申請號: 201310368498.2
• 申請日: 2013-08-22
• 公開（公告）號: CN103397101A
• 公開（公告）日: 2013-11-20
• 發明（設計）人: 步迅;張全芳;劉艷艷
• 申請（專利權）人: 山東省農業科學院生物技術研究中心
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種同時鑒定山羊、綿羊、豬和鴨肉等4種肉類源性的熒光標記基因復合擴增方法，其特征在于，以山羊、綿羊、豬和鴨的線粒體16S?rRNA和cyt?b基因為目的基因，采用一對熒光標記檢測引物對所述4種動物的mtDNA16S?rRNA進行PCR擴增，同時用一對擴增上述物種cyt?b基因的熒光標記通用引物作為內參引物，PCR擴增產物經3730xl全自動基因分析儀檢測，根據16S?rRNA基因擴增片段長度多態性進行種屬鑒定。

2.權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的檢測引物為：

SIM-F-5’-FAM-AAGACGAGAAGACCCTTGGACTTTA-3’，

SIM-R5’-GATTGCGCTGTTATCCCTAGGGTA-3’。

3.權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的內參引物為：

mcb—F-5’-FAM-TACCATGAGGACAAATATCATTCTG-3’

mcb-R5’-CCTCCTAGTTTGTTAGGGATTGATCG-3’。

4.一種用于同時鑒定山羊、綿羊、豬和鴨肉等4種肉類源性的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括一對能夠對山羊、綿羊、豬和鴨的mtDNA16S?rRNA進行擴增的FAM熒光標記PCR引物、一對擴增Cyt?b基因的FAM熒光標記內參引物和用于熒光標記基因復合擴增體系的試劑。

5.權利要求4所述的試劑盒，其特征在于，所述的檢測引物為：

SIM-F-5’-FAM-AAGACGAGAAGACCCTTGGACTTTA-3’，

SIM-R--5’-GATTGCGCTGTTATCCCTAGGGTA-3’。

6.權利要求4所述的試劑盒，其特征在于，所述的內參引物為：

mcb—F-5’-FAM—TACCATGAGGACAAATATCATTCTG-3’

mcb-R-5’-CCTCCTAGTTTGTTAGGGATTGATCG-3’。

7.權利要求4所述的試劑盒，其特征在于，PCR擴增的產物經3730xl全自動基因分析儀檢測，根據16S?rRNA基因擴增片段長度多態性進行種屬鑒定。