[發(fā)明專利]miRNA?27b在抗腫瘤耐藥中的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310368487.4
• 申請日: 2013-08-21
• 公開（公告）號: CN104415347B
• 公開（公告）日: 2017-11-10
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 惠利健;慕文婧;胡超博
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;A61P35/00;C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 上海一平知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司31266
• 代理人: 崔佳佳,雷芳

1.一種活性成分的用途，其中，所述的活性成分選自下組：

(a).miRNA-27b家族的微小RNA，所述miRNA-27b家族的微小RNA包括：miRNA-27b或經(jīng)修飾的miRNA-27b衍生物；

(b).前體miRNA，所述的前體miRNA能在宿主內(nèi)加工成(a)中所述的miRNA-27b；

(c).多核苷酸，所述的多核苷酸能被宿主轉(zhuǎn)錄形成(b)中所述的前體miRNA，并加工形成(a)中所述的微小RNA；

(d).表達載體，所述表達載體含有(a)中所述的miRNA-27b、或(b)中所述的前體miRNA、或(c)中所述的多核苷酸；

其特征在于，所述活性成分用于制備增強腫瘤細(xì)胞對藥物敏感性的藥物組合物、或制備預(yù)防或治療耐藥性腫瘤的藥物組合物，且所述的腫瘤為p53野生型或CYP1B1高表達的腫瘤；

其中，(a)中所述經(jīng)修飾的miRNA衍生物是式I所示結(jié)構(gòu)的化合物單體或其多聚體：

(X)n-(Y)m

式I，

在式I中，

各X為(a)中所述的微小RNA；

各Y獨立地為促進微小RNA施藥穩(wěn)定性的修飾物；

Y連接于X的左側(cè)、右側(cè)或中間；

n為1-100的正整數(shù)；

m為1-1000的正整數(shù)；

各“-”表示接頭。

2.如權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，所述的miRNA-27b的序列如SEQ ID NO.:1所示。

3.如權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，所述的藥物組合物還包括任選的抗腫瘤藥物。

4.如權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，所述的n為1-20的正整數(shù)，m為1-200的正整數(shù)；和/或

所述的接頭為化學(xué)鍵。

5.如權(quán)利要求4所述的用途，其特征在于，所述的n為1、2、3、4或5；和/或

所述的接頭為共價鍵。

6.如權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，(b)所述的前體miRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.:2所示。

7.如權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，(c)中所述的多核苷酸具有式II所示的結(jié)構(gòu)：

Seq_正向-X-Seq_反向

式II，

式II中，

Seq_正向為能在宿主中被加工成所述的微小RNA核苷酸序列；

Seq_反向為與Seq_正向基本上互補或完全互補的核苷酸序列；

X為位于Seq_正向和Seq_反向之間的間隔序列，并且所述間隔序列與Seq_正向和Seq_反向不互補；

并且式II所示的結(jié)構(gòu)在轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞后，形成式III所示的二級結(jié)構(gòu)：

式III中，Seq_正向、Seq_反向和X的定義如上述，

||表示在Seq_正向和Seq_反向之間形成的堿基互補配對關(guān)系。

8.如權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，(d)中所述的表達載體包括：病毒載體或非病毒載體。

9.如權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，所述的腫瘤選自下組：肺癌、肝癌、腎癌、胃癌、腸癌、子宮頸癌、卵巢癌、乳腺癌、頭頸癌。

10.一種篩選用于提高腫瘤細(xì)胞對藥物敏感性的候選藥物的方法，其特征在于，包括步驟：

(a)將候選物質(zhì)施用于測試組的細(xì)胞或動物，并測定施用后所述測試組中miRNA-27b的表達水平；

(b)將測試組的miRNA-27b與對照組的miRNA-27b的表達水平進行比較，所述對照組中未施用所述候選物質(zhì)；

其中，當(dāng)測試組的miRNA-27b的表達水平顯著高于對照組的miRNA-27b的表達水平時，則表明該候選物質(zhì)是用于提高腫瘤細(xì)胞對藥物敏感性的候選藥物，其中腫瘤細(xì)胞為p53野生型或CYP1B1高表達的腫瘤細(xì)胞。