[發明專利]修飾的因子VII多肽及其應用

無效

• 申請號: 201310367450.X
• 申請日: 2008-04-11
• 公開（公告）號: CN103451172A
• 公開（公告）日: 2013-12-18
• 發明（設計）人: E·L·麥迪遜;C·D·薩諾斯;S·W·拉格爾斯;S·庫格林
• 申請（專利權）人: 催化劑生物科學公司
• 主分類號: C12N9/64
• 分類號: C12N9/64;C12N15/57;C12N15/85;C12N15/81;C12N5/10;C12N1/19;A61K38/48;A61K48/00;A61P7/04
• 代理公司: 永新專利商標代理有限公司 72002
• 代理人: 王健

1.修飾的因子VII(FVII)多肽，其包含異源γ-羧基谷氨酸(Gla)結構域或者其實現磷脂結合的足夠部分，其中:

所述修飾的FVII多肽具有促凝血劑活性；

所述異源Gla結構域選自因子X(FX)、凝血酶原、C蛋白、S蛋白、骨鈣素、基質Gla蛋白、生長停滯特異性蛋白6(Gas6)和Z蛋白中的Gla結構域;以及

所述足夠部分是來自所述異源Gla結構域的30個或更多個連續氨基酸，由此與具有天然Gla結構域的FVII多肽相比，所述FVII多肽的磷脂結合被改變。

2.修飾的FVII多肽，其包含異源Gla結構域或者其實現磷脂結合的足夠部分，其中:

所述異源Gla結構域選自因子IX(FIX)、因子X(FX)、凝血酶原、C蛋白、S蛋白、骨鈣素、基質Gla蛋白、生長停滯特異性蛋白6(Gas6)和Z蛋白中的Gla結構域;

所述修飾的FVII多肽具有促凝血劑活性；

所述足夠部分是來自所述異源Gla結構域的30個或更多個連續氨基酸，由此與具有天然Gla結構域的FVII多肽相比，所述FVII多肽的磷脂結合被改變；以及

所述修飾的FVII多肽包含一或多個進一步的氨基酸修飾，其中所述修飾選自：增加對抗凝血酶-III(AT-III)的抗性、增強對磷脂的結合和/或親和性、增加對組織因子(TF)的親和性、增加內在活性、增加TF依賴性催化或者凝血活性、增加凝血活性、改變多肽構象以改變酶原性、通過改變高活性與低活性FVIIa構象之間的平衡使之有利于高活性構象而增加催化或凝血活性、增加對蛋白酶的抗性、降低糖基化、增加糖基化、降低免疫原性、增加穩定性、和/或促進化學基團連接的插入、缺失和取代。

3.權利要求1的修飾的FVII多肽，其中所述異源Gla結構域具有SEQ?ID?NO:110-118、120和121任一項所示的氨基酸序列，或者其實現磷脂結合的足夠部分。

4.權利要求2的修飾的FVII多肽，其中所述異源Gla結構域具有SEQ?ID?NO:110-118、120和121任一項所示的氨基酸序列，或者其實現磷脂結合的足夠部分。

5.權利要求2的修飾的FVII多肽，其包含選自Gla?Swap?FIX、Gla?Swap?FX、Gla?Swap?Prot?C、Gla?Swap?Prot?S、和Gla?Swap凝血酶的修飾。

6.權利要求1的修飾的FVII多肽，其包含位于如下位置處的一或多個進一步的氨基酸修飾，所述位置選自具有SEQ?ID?NO:3所示氨基酸序列的FVII多肽中的D196、K197、K199、G237、T239、R290和K341或FVII多肽中的對應殘基。

7.權利要求2的修飾的FVII多肽，其中：

修飾的FVII多肽含有進一步的修飾，與未修飾的FVII多肽相比表現出對組織因子途徑抑制劑(TFPI)的抗性增強。

8.權利要求7的修飾的FVII多肽，其中所述進一步修飾是位于如下位置處的一或多個氨基酸修飾，所述位置選自具有SEQ?ID?NO:3所示氨基酸序列的FVII多肽中的D196、K197、K199、G237、T239、R290和K341或FVII多肽中的對應殘基。

9.權利要求8的修飾的FVII多肽，其中所述一或多個氨基酸修飾選自對應于如下的置換：D196K、D196R、D196A、D196Y、D196F、D196M、D196W、D196L、D196I、K197Y、K197A、K197E、K197D、K197L、K197M、K197I、K197V、K197F、K197W、K199A、K199D、K199E、G237W、G237T、G237I、G237V、T239A、R290A、R290E、R290D、R290N、R290Q、R290K、K341E、K341R、K341N、K341M、K341D、K341Q、G237T238insA、G237T238insS、G237T238insV、G237T238insAS、G237T238insSA、D196K197insK、D196K197insR、D196K197insY、D196K197insW、D196K197insA、D196K197insM、K197I198insE、K197I198insY、K197I198insA和K197I198insS。