[發(fā)明專利]一種三棵針提取物的制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310363150.4
• 申請(qǐng)日: 2013-08-20
• 公開（公告）號(hào): CN103446214A
• 公開（公告）日: 2013-12-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 何勝利;程永科;李俊霞;白艷鶴
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 天津藥業(yè)集團(tuán)新鄭股份有限公司
• 主分類號(hào): A61K36/29
• 分類號(hào): A61K36/29
• 代理公司: 鄭州聯(lián)科專利事務(wù)所(普通合伙) 41104
• 代理人: 劉建芳;郭麗娜

技術(shù)領(lǐng)域????

????本發(fā)明屬于中藥提取技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種三棵針提取物的制備方法。

背景技術(shù)????

三棵針又名細(xì)葉小檗、針雀、銅針刺、刺黃連，是小檗科，小檗屬類植物的俗稱，落葉灌木。三棵針的提取物以其天然性、無抗藥性、多功能性及毒副作用較小等優(yōu)點(diǎn)成為抗生素的替代品之一。

三棵針提取物的主要活性成分為小檗堿，又稱黃連素，在臨床上常作為廣譜抗生素使用，近年來，研究發(fā)現(xiàn)黃連素還有許多新用途，特別是心內(nèi)科、腫瘤科、器官移植方面的研究應(yīng)用有新的發(fā)現(xiàn)（宋君，小檗堿臨床應(yīng)用及研究新進(jìn)展，現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生2008年24卷第ll期，1652-1654）。

考慮到小檗堿在三棵針中具有上述特殊功效，有必要進(jìn)行提取分離。而國內(nèi)對(duì)三棵針活性物質(zhì)的提取分離研究較少，主要采用酸溶堿沉鹽析的方法進(jìn)行提取，如下：取三棵針根，切片，加8倍量水，加硫酸調(diào)節(jié)pH值至1～2，浸漬2次，每次24小時(shí)，濾過，濾液合并，用石灰乳調(diào)節(jié)pH值至12，靜置12小時(shí)，濾過，濾液加3倍量8%氯化鈉溶液，用鹽酸調(diào)節(jié)pH值至8～9，靜置12小時(shí)，濾過，取沉淀，干燥，即得粗制品。將粗制品加15倍量水，加熱至80℃攪拌使溶解，濾過，濾液加鹽酸調(diào)節(jié)pH值至1～2，靜置24小時(shí)，濾過，沉淀用水洗去多余的鹽酸，在80℃以下干燥，即得。有人用正交法對(duì)提取液的濃度，浸泡提取時(shí)間，鹽析時(shí)的pH值和鹽析液的含鹽量4個(gè)因素進(jìn)行了優(yōu)化（趙永生，胡大澤，三棵針提取工藝的優(yōu)化選擇，中國民族民間醫(yī)藥雜志2003年總第64期，299-300），該工藝周期長(zhǎng)，一般需要3-4天，收率低，且設(shè)備必須耐酸，要求高。

發(fā)明內(nèi)容????

本發(fā)明涉及一種提取時(shí)間短的三棵針提取物的制備方法。

本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

一種三棵針提取物的制備方法，包括以下步驟：a、三顆針破壁粉碎，于沸水中提取至少兩次，每次30-40分鐘，過濾；b、合并濾液，濾液濃縮為浸膏；c、浸膏干燥得粗提物；d、粗提物用大孔樹脂層析柱進(jìn)行純化，純化時(shí)先用堿水洗滌除雜，然后用乙醇對(duì)層析柱洗脫，收集乙醇洗脫液，乙醇洗脫液濃縮、干燥得鹽酸小檗堿含量≥80%的三棵針提取物。

進(jìn)一步精制，步驟d得到的三棵針提取物還可繼續(xù)采用C18反相硅膠填料色譜柱進(jìn)一步純化，用85-95%（v/v）乙醇流動(dòng)相洗脫，收集洗脫液，洗脫液濃縮、干燥得鹽酸小檗堿含量≥95%的三棵針提取物。

步驟a中沸水用量為三顆針質(zhì)量的8-15倍。

步驟d中堿水為濃度0.5mol/L的氫氧化鈉溶液，堿水的用量為層析柱填料體積的10-15倍，乙醇體積濃度為85-95%。

步驟d中大孔樹脂層析柱中的填料為HP600大孔樹脂。

步驟a中破壁粉碎時(shí)采用超微粉碎機(jī)。

本發(fā)明的能夠?qū)崿F(xiàn)三顆針中鹽酸小檗堿的提取分離，并且工藝簡(jiǎn)單，能耗小，時(shí)間短，只需24h左右，實(shí)施容易，對(duì)設(shè)備配置要求低，同時(shí)提取效率高，并且純度好。

具體實(shí)施方式?

實(shí)施例1：

a、稱取10kg三棵針飲片，通過超微粉碎機(jī)進(jìn)行破壁打碎；于8倍質(zhì)量的純化水中蒸汽煮沸，動(dòng)態(tài)攪拌，時(shí)間30分鐘，過100目篩網(wǎng)，提取2次；

b、將濾液合并，真空濃縮為浸膏；

c、浸膏噴霧干燥得粗提物；?

d、粗提物用HP600大孔樹脂層析柱進(jìn)行純化，先用層析柱填料體積10倍的0.5mol/L的氫氧化鈉溶液洗滌除雜，再用90%（v/v）乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，乙醇洗脫液真空濃縮成浸膏，浸膏噴霧干燥得提取物，其中鹽酸小檗堿的含量達(dá)80.9%；

e、精制純化，將上述提取物進(jìn)行反相硅膠色譜分離，固定相為C18反相硅膠，洗脫流動(dòng)相90%（v/v）乙醇，收集洗脫液，洗脫液濃縮、干燥得純度達(dá)96.1%的三棵針提取物。

實(shí)施例2：

a、稱取10kg三棵針飲片，通過超微粉碎機(jī)進(jìn)行破壁打碎；于12倍質(zhì)量的純化水中蒸汽煮沸，動(dòng)態(tài)攪拌，時(shí)間30分鐘，過100目篩網(wǎng)，提取2次；

b、將濾液合并，真空濃縮為浸膏；

c、浸膏噴霧干燥得粗提物；?

d、粗提物用HP600大孔樹脂層析柱進(jìn)行純化，先用層析柱填料體積12倍的0.5mol/L的氫氧化鈉溶液洗滌除雜，再用95%（v/v）乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，乙醇洗脫液真空濃縮成浸膏，浸膏噴霧干燥得提取物，其中鹽酸小檗堿的含量達(dá)81.6%；