[發明專利]一種耐酸性真菌α-淀粉酶TaAMY及其基因和應用

有效

• 申請號: 201310362292.9
• 申請日: 2013-08-19
• 公開（公告）號: CN103509768A
• 公開（公告）日: 2014-01-15
• 發明（設計）人: 張慧君;王俊峰;王菲菲
• 申請（專利權）人: 江蘇奕農生物工程有限公司
• 主分類號: C12N9/30
• 分類號: C12N9/30;C12N15/56;C12N15/81;C12N1/19;C12R1/84
• 代理公司: 北京法思騰知識產權代理有限公司 11318
• 代理人: 高宇

1.一種耐酸性真菌α-淀粉酶TaAMY，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。

2.一種耐酸性真菌α-淀粉酶基因NTaAMY，其特征在于，編碼權利要求1所述的耐酸性真菌α-淀粉酶TaAMY。

3.根據權利要求2所述的耐酸性真菌α-淀粉酶基因NTaAMY，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ?ID?NO.2所示。

4.包含權利要求2或3所述耐酸性真菌α-淀粉酶基因NTaAMY的重組載體。

5.根據權利要求3所述的重組載體，其特征在于，所述重組載體為NTaAMY-pPICzαA。

6.包含權利要求2或3所述耐酸性真菌α-淀粉酶基因NTaAMY的重組菌株。

7.一種制備耐酸性真菌α-淀粉酶TaAMY的方法，其特征在于，包括以下步驟：

1）用權利要求4所述的重組載體NTaAMY-pPICzαA轉化宿主細胞，獲得重組菌株；

2）培養重組菌株，誘導新型耐酸性真菌α-淀粉酶TaAMY的表達；以及

3）回收并純化所表達的新型耐酸性真菌α-淀粉酶TaAMY。

8.根據權利要求7所述的制備耐酸性真菌α-淀粉酶TaAMY的方法，其特征在于，在步驟2）中，培養重組菌株的發酵過程分3個階段：

第一階段為菌體培養階段，流加已滅菌的2L50%的葡萄糖或甘油，培養20-24小時，流加葡萄糖或甘油完后結束；

第二階段為饑餓階段，葡萄糖或甘油流加完之后，當溶氧上升至80%以上、pH上升即表明該階段結束，為期30-60min；

第三階段為誘導表達階段，流加誘導培養基，并且保持溶氧在20%以上，培養時間在170～190小時。

9.權利要求1所述耐酸性真菌α-淀粉酶TaAMY的應用。

10.或權利要求2所述耐酸性真菌α-淀粉酶基因NTaAMY的應用。