[發明專利]一種功能化多元氮雜環熒光探針、其制備方法及其用途有效

申請號：	201310362261.3	申請日：	2013-08-19
公開（公告）號：	CN103436254A	公開（公告）日：	2013-12-11
發明（設計）人：	王素華;馬芳	申請（專利權）人：	中國科學院合肥物質科學研究院
主分類號：	C09K11/06	分類號：	C09K11/06;C07D471/04;G01N21/64
代理公司：	安徽省合肥新安專利代理有限責任公司 34101	代理人：	吳啟運
地址：	230031 ***	國省代碼：	安徽;34
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摘要：
搜索關鍵詞：	一種功能多元氮雜環熒光探針制備方法及其用途
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【說明書】：

一、技術領域

本發明涉及一種有機熒光分子探針，具體地說是一種功能化多元氮雜環熒光探針、其制備方法及其用途，本發明熒光探針可用于次氯酸或者次氯酸鹽的定性定量檢測。

二、背景技術

近些年來，熒光傳感技術已經越來越多的應用于生物小分子的分析檢測。相對于其他的分析檢測技術來說，例如紫外可見吸收光譜法，電化學法以及比色法等等，熒光光譜技術具有其獨特的優點，如高靈敏度，高選擇性，響應快，最重要的一點是，熒光光譜技術可用于生物體內細胞成像及目標物的實時檢測。目前已經開發的熒光探針主要包括有機分子，生物分子以及納米材料等。

利用熒光光譜分析技術來檢測目標物主要是基于熒光強度和波長的變化來實現，總共有三種模式，包括熒光淬滅，熒光增強以及比率熒光。其中熒光淬滅和熒光增強都是基于單一的熒光強度變化，因此探針濃度，儀器工作狀態以及環境條件等因素對所采集的信號干擾較大，而比率熒光則可以在較大程度上避免這種缺陷。

所謂比率熒光就是兩種發光強度不同的熒光構成的混色熒光，雙熒光強度的比值稱之為熒光比率。熒光比率隨目標產物的不同或者同一目標產物濃度不同而變化，也就是可觀察到的比率熒光不同。比率熒光檢測的一個突出優點就是通過強度比值的變化提高動態響應的范圍，通過建立內標，極大地削弱其他因素的干擾，實現對目標分析物的定量檢測，大大提高了檢測的精確度和靈敏度。

因次氯酸具有強氧化性，生活中被用來作為常用的自來水消毒劑。此外，作為一種重要的生物活性氧小分子，次氯酸參與了許多生理過程，主要發揮著抗炎殺菌的作用。然而過多的次氯酸則會損害機體本身，因此探尋一種高效靈敏的檢測次氯酸的方法對于環境和生物體來說都具有極其重要的意義。然而，到目前為止開發比率熒光探針檢測次氯酸還未見文獻報道。

三、發明內容

本發明旨在提供一種功能化多元氮雜環熒光探針、其制備方法及其用途，所要解決的技術問題是通過可控的多元氮雜環有機熒光分子結構的設計實現對次氯酸的高靈敏高選擇性的檢測。

本發明功能化多元氮雜環熒光探針（簡稱熒光探針）具有共軛的多元氮雜環結構，雜環上連有具有一定化學活性的硫酮基團，其結構通式為：

其中R₁、R₂、R₃、R₄分別獨立地表示-H、-OH，-COOH、磺酸基或磷酸基等親水性基團。

本發明功能化多元氮雜環熒光探針的制備方法按以下步驟操作：

將R₁R₂R₃R₄(Py)₂(CH₂)₂NH和氨水加入二氯甲烷和乙醇的混合溶劑中，冰浴下預冷半小時，然后滴加二硫化碳溶液，滴完后于冰浴中反應1小時，然后撤去冰浴，在室溫下避光繼續攪拌反應8-10小時，反應結束后旋蒸除去溶劑可得粗產物，將粗產物經硅膠色譜柱分離提純后可得目標產物；

所述二硫化碳溶液是將二硫化碳溶于二氯甲烷和乙醇的混合溶劑中得到的；

其中R₁R₂R₃R₄(Py)₂(CH₂)₂NH、氨水和二硫化碳的配比按摩爾量計為1:1:1-1.5，氨水的摩爾量以NH₃·H₂O計。

氨水在這里的作用是提供堿性環境以使R₁R₂R₃R₄(Py)₂(CH₂)₂NH盡量反應完全，濃度并無影響，無需特別限定。

所述混合溶劑中二氯甲烷和乙醇的體積比為1:1。

本發明反應過程如下：

本發明功能化多元氮雜環熒光探針在熒光光譜分析檢測次氯酸的過程中作為比率熒光探針的應用。