[發明專利]一種提取純化下彎諾林苷E的方法

無效

• 申請號: 201310360130.1
• 申請日: 2013-08-19
• 公開（公告）號: CN103450309A
• 公開（公告）日: 2013-12-18
• 發明（設計）人: 張金芳;萬冬梅
• 申請（專利權）人: 南京標科生物科技有限公司
• 主分類號: C07J21/00
• 分類號: C07J21/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于天然植物提取技術領域，涉及一種提取純化下彎諾林苷E的方法。

背景技術

下彎諾林苷E（Recurvoside?E?），是從龍舌科(Agavaceae)下彎諾林Nolina?recurvata的莖中提取分離得到的一種甾體皂苷類化合物，分子式：C₅₅H₈₆O₂₈，分子量：1195.27，分子結構式為：

下彎諾林苷E對cAMP磷酸二酯酶的IC50為119μM?。

現有技術中，尚未見制備下彎諾林苷E的生產工藝報道。

發明內容

本發明要解決的技術問題是提供一種從下彎諾林的莖中提取純化下彎諾林苷E的方法。

本發明的目的是通過如下技術方案實現的：

一種提取純化下彎諾林苷E的方法，其特征在于包括以下步驟：

1）用醇類溶液對下彎諾林的莖進行微波提取，提取液回收乙醇；

2）浸膏加熱水溶解，上大孔樹脂柱吸附，水-乙醇洗脫，洗脫液用超濾膜超濾，納濾膜濃縮，濃縮液干燥得濃縮物；

3）將濃縮物進行色譜分離，得高含量下彎諾林苷E。

所述步驟1）中對下彎諾林的莖進行粉碎處理，控制粒徑為40-60目。

所述步驟1）中醇類溶液為70-90%乙醇水溶液，優選75%乙醇水溶液。

所述步驟1）中固液體積比為1:8-1:13，優選1:12。

所述步驟1）中微波功率為800-1000W，提取2-3次，每次20-40min。

所述步驟2）中大孔樹脂可選AB-8、D101、HZ818和HZ830中一種。

所述步驟2）中洗脫劑為3-5BV水→3-5BV20-40%乙醇→5-7BV75-85%乙醇。

所述步驟2）中超濾膜為截留分子量3000-10000的中空復合膜，納濾膜為截留分子量300-500的中空復合膜，進口壓力控制0.5-0.9Mpa。

所述步驟3）中色譜分離采用高速逆流色譜進行，其兩相溶劑系統為氯仿-甲醇-水，體積比為（11-15）：（5-8）：（4-9），所述高速逆流色譜儀轉速為850-1000rpm，流動相流速為3-5ml/min。

本發明的優勢在于以下彎諾林的莖為原料，成本低；采用微波提取，提取時間短、提取效率高，采用的溶劑均為易回收、無毒或低毒的有機溶劑；采用大孔樹脂柱層析富集純化，有效除去多種雜質，減輕了后面工序的工作量；采用高速逆流色譜分離效果好，產品純度高。

具體實施方式：

實施例1：

取下彎諾林的莖粉碎至60目，稱取500g投入微波萃取罐，加入6kg75%乙醇溶液微波提取40min，功率800W，放出提取液，再加入75%乙醇提取2次，合并三次提取液，用旋轉蒸發儀回收乙醇至少量，加入AB-8型大孔樹脂柱層析（柱徑高比1:12），依次用5BV水→3BV40%乙醇→5BV75%乙醇洗脫，高效液相色譜監測，收集流分，洗脫液加入截留分子量5000的中空復合膜超濾膜超濾，透過液再加入截留分子量300中空復合納濾膜濃縮，進口壓力控制0.5-0.7Mpa，得濃縮液，將濃縮液低溫干燥得濃縮物；取氯仿-甲醇-水（11:5:7）置于分液漏斗中混合均勻，取上相為固定相，下相為流動相，取上述濃縮物溶于流動相中備用，開啟高速逆流色譜儀，設定流動相流速為3.0ml/min，同時開啟主機電機，自流動相流出時開始進樣，轉速控制為950rpm，通過檢測器收集下彎諾林苷E流分，濃縮并干燥得下彎諾林苷E，高效液相檢測含量為96.8%。

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實施例2：