[發(fā)明專利]一種利用微流芯片捕獲腫瘤細(xì)胞的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310359159.8
• 申請(qǐng)日: 2013-08-16
• 公開（公告）號(hào): CN103409371A
• 公開（公告）日: 2013-11-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉威;劉侃;張南剛;國(guó)世上;周鵬飛
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 武漢友芝友醫(yī)療科技有限公司
• 主分類號(hào): C12N5/09
• 分類號(hào): C12N5/09;C12M1/00
• 代理公司: 北京市百倫律師事務(wù)所 11433
• 代理人: 周紅力;姜瑩

1.一種利用微流芯片捕獲腫瘤細(xì)胞的方法，包括：

配制細(xì)胞液步驟（S1100）：將含有腫瘤細(xì)胞的樣品配制為磷酸鹽緩沖液；

預(yù)沖洗步驟（S1200）：用不含腫瘤細(xì)胞的磷酸鹽溶液對(duì)注射管路進(jìn)行預(yù)沖洗；

腫瘤細(xì)胞捕獲步驟（S1300）：將配制好的細(xì)胞液以90～110ul/h的流速注射入微流芯片，并將腫瘤細(xì)胞捕獲在微流芯片內(nèi)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，還包括：

觀測(cè)和記錄步驟（S1400）:對(duì)芯片中的捕獲結(jié)果進(jìn)行觀測(cè)和記錄。

3.根據(jù)權(quán)利要求2的方法，還包括：

儀器清洗步驟(S1500)，觀測(cè)完成后用去離子水和乙醇對(duì)所述注射管路進(jìn)行沖洗。

4.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中在配制細(xì)胞液步驟（S1100），將含有腫瘤細(xì)胞的樣品用細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，對(duì)所述樣品進(jìn)行離心去除上層清液后配制成磷酸鹽緩沖液。

5.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中磷酸鹽緩沖液的濃度為0.09～0.11mol/L。

6.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中配制細(xì)胞液的腫瘤細(xì)胞濃度為7000-13000個(gè)/mL。

7.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中所述注射管路包括依次連接的：注射泵、注射器和導(dǎo)管，通過所述導(dǎo)管連接至所述微流芯片。

8.根據(jù)權(quán)利要求1-7任一方法，其中所述微流芯片包括基片（1100）和蓋片（1200），所述基片（1100）包括：凹陷部（1101）、環(huán)繞所述凹陷部（1101）的隔擋部（1102）、以及與所述隔擋部（1102）連接的第一通道（1103），所述隔擋部（1102）的頂端與所述蓋片(1200)間隔一定距離，所述一定距離大于血細(xì)胞的直徑并小于腫瘤細(xì)胞的直徑。

9.根據(jù)權(quán)利要求8的方法，所述基片（1100)進(jìn)一步地包括第二通道(1104)，所述第二通道(1104)與所述第一通道(1103)連接，使通道之間相互連通。

10.根據(jù)權(quán)利要求8的方法，其中在腫瘤細(xì)胞捕獲步驟（S1300），將所述腫瘤細(xì)胞捕獲在所述微流芯片的凹陷部（1101）。