[發(fā)明專利]Withanolides型化合物及其抗腫瘤的用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310358588.3
• 申請日: 2013-08-15
• 公開（公告）號: CN103396470A
• 公開（公告）日: 2013-11-20
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 孔令義;羅建光;張文娜
• 申請（專利權(quán)）人: 中國藥科大學(xué)
• 主分類號: C07J71/00
• 分類號: C07J71/00;A61K31/585;A61P35/00
• 代理公司: 南京蘇科專利代理有限責(zé)任公司 32102
• 代理人: 孫立冰

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及天然藥物領(lǐng)域，具體涉及withanolides型化合物及其抗腫瘤用途。?

背景技術(shù)

Withanolide型化合物是一類具有28個碳原子的麥角甾烷型的化合物，其特有的結(jié)構(gòu)是22位與26位碳形成δ內(nèi)酯環(huán)的側(cè)鏈。Withanolides型化合物的生物活性多種多樣，包括抗菌、抗炎、抗病毒、抗微生物、抗氧化、抗腫瘤、免疫抑制以及乙酰膽堿酯酶的抑制活性。通過文獻(xiàn)調(diào)研，發(fā)現(xiàn)我國的一些茄科酸漿屬植物苦蘵(Physalis?angulata)中含有大量的withanolide型化合物。有文獻(xiàn)報道對Physalis?angulata苦蘵(重慶南川縣)植物的Withanolide類型化學(xué)成分進(jìn)行系統(tǒng)研究,共分離得到Withanolide型化合物11個,他們分別是physagulins?L-O(1-4),withagulatin?A(5),physagulin?K(6),withaminimin(7),physagulin?J(8),physagulin?B(9),pubesenolide(10),physagulin?D(11).通過文獻(xiàn)檢索及對照，發(fā)現(xiàn)化合物1、2、3、4為新化合物。以上化合物的結(jié)構(gòu)鑒定通過IR,1D,2D-NMR,HRMS,旋光等方法進(jìn)行確定。對上述的化合物進(jìn)行抗腫瘤活性測定,發(fā)現(xiàn)化合物5和9對人乳腺癌病毒(HCT-116)和非人小肺癌病毒(NCI-H460)有很好的抑制作用。化合物5的IC₅₀分別是1.64±0.06μM和1.40±0.04μM,化合物9IC₅₀分別是2.11±0.1μM和0.43±0.02μM。?

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明公開了兩個新化合物，分別是結(jié)構(gòu)式II和結(jié)構(gòu)式III的化合物：?

它們可以從毛苦蘵全草中提取得到。結(jié)構(gòu)式II和結(jié)構(gòu)式III的化合物分別命名為physagulide?I和physagulide?J。?

藥理試驗證明，Physagulide?I和physagulide?J對人骨肉瘤細(xì)胞MG-63均具有較強的抗腫瘤作用，其作用與陽性藥順鉑和5-氟尿嘧啶的活性相當(dāng)。結(jié)構(gòu)與之較接近的已知化合物physapubenolide（結(jié)構(gòu)式I）也具有該藥效，結(jié)構(gòu)式I化合物對人骨肉瘤細(xì)胞MG-63其作用強于結(jié)構(gòu)相似的從毛苦蘵中所分離睡茄內(nèi)酯類的其他化合物如withagulatin?A和physagulin?B。結(jié)構(gòu)式I化合物如下：?

下面是部分藥理學(xué)試驗：?

采用MTT方法，取處于對數(shù)生長期的人骨肉瘤細(xì)胞MG-63，PBS沖洗，0.25%胰酶消化，加入新鮮培養(yǎng)基吹打成單細(xì)胞懸液。血球計數(shù)板進(jìn)行計數(shù)，調(diào)整細(xì)胞濃度為5000–7000個/mL，接種于96孔板上，190μL/孔，置CO₂培養(yǎng)箱(37℃，5%CO₂，飽和濕度)培養(yǎng)。24小時后加藥10μL/孔，樣品的工作液用培養(yǎng)基稀釋至終濃度分別為100，50，25，12.5，6.25mmol/L，加樣組及空白組均設(shè)3個復(fù)孔。繼續(xù)培養(yǎng)48h后，加入MTT工作液，20μL/孔。4h后，棄去培養(yǎng)基，加入DMSO150μL/孔，平板搖床上500rpm振搖3min。酶標(biāo)儀測定各孔的OD值，測定波長570nm，參比波長630nm，計算細(xì)胞增殖抑制率。細(xì)胞增殖抑制率=(空白對照OD值–給藥組OD值)/空白對照組OD值×100%。以上實驗均重復(fù)三次。結(jié)果見表1.?

表1化合物的抗腫瘤活性結(jié)果?