[發明專利]一種緩慢葡萄球菌選擇性培養基的制備方法

無效

• 申請號: 201310358071.4
• 申請日: 2013-01-13
• 公開（公告）號: CN103388021A
• 公開（公告）日: 2013-11-13
• 發明（設計）人: 候素君
• 申請（專利權）人: 候素君
• 主分類號: C12Q1/14
• 分類號: C12Q1/14
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明為申請日2013年1月13日，申請號為2013100107502，名稱為《一種緩慢葡萄球菌選擇性培養基及其制備方法》發明申請的分案。本發明涉及醫學檢驗領域，具體涉及一種緩慢葡萄球菌選擇性培養基及其制備方法。

背景技術

緩慢葡萄球菌(Staphylococcus?lentus)屬于葡萄球菌屬(Staphylococcus)。該菌由Schleifer?K?H等在1983年將其劃分為葡萄球菌屬的一個獨立的種，即緩慢葡萄球菌(S.lentus)。緩慢葡萄球菌曾被認為不具有致病性,但越來越多的資料表明S.lentus是人類或許多動物不可忽視的致病菌,可引起人類疾病并在醫院感染中占據重要地位,尤其對于新生幼兒、存在嚴重基礎疾病或長期接受醫院治療的病人等免疫力低下的人群更容易導致嚴重的后果。由于S.lentus的多重耐藥問題日益嚴重,?S.lentus引起的感染在國內外呈顯著增加的趨勢。

所謂微生物培養是一種用人工方法使微生物生長繁殖的技術，而選擇性選擇性培養基是用來促進或抑制一定類型的生物體（如細胞或細菌等）而設計的選擇性培養基，利用這種選擇性培養基可以將所需要的微生物從混雜的微生物中分離出來。

目前臨床上普遍使用的葡萄球菌選擇性培養基為甘露醇高鹽瓊脂（Manitol?Salt?Agar），用于金黃色葡萄球菌的選擇性分離培養。培養基成分為：蛋白胨、雞蛋蛋白液、D-甘露醇、氯化鈉、酚紅、瓊脂。金黃色葡萄球菌菌落為黃色，大腸桿菌和沙門氏菌菌落為無色。但是，該種培養基并不能選擇性培養緩慢葡萄球菌，其原因在于在目前的選擇性培養基中金黃色葡萄球菌比緩慢葡萄球菌生長更快，很快覆蓋了培養基，緩慢葡萄球菌無法生長。

發明內容

本發明的技術任務是針對以上現有技術的不足，提供一種對緩慢葡萄球菌分離率高的選擇性培養基。

本發明解決其技術問題的技術方案是：一種緩慢葡萄球菌選擇性培養基，其特征在，配制1000ml選擇性培養基的配方中含有：麥芽浸粉15g；雞蛋蛋白液150ml；氯化鈉5g；枸櫞酸鎂0.5g；瓊脂15g；假細錐甲素8~12mg；N-乙酰基-D-葡萄糖胺?3.6?g；磷酸二氫鉀0.2g；硫酸銅5mg；L-半胱氨酸0.1g；濃度200g/L的百合水煮液200~300ml；蒸餾水加至1000ml。

一種緩慢葡萄球菌選擇性培養基的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

（1）取百合加水煮沸1小時，過濾，取濾液，調整體積到濃度為200g/L，得百合水煮液；

（2）取麥芽浸粉；雞蛋蛋白液；氯化鈉；枸櫞酸鎂；瓊脂；假細錐甲素；N-乙酰基-D-葡萄糖胺；磷酸二氫鉀；L-半胱氨酸及硫酸銅溶于步驟1所得百合水煮液中，混勻過濾后，蒸餾水定容，低溫滅菌2次，每次45?min，滅菌后分裝。

其中所述的麥芽浸粉、雞蛋蛋白液提供碳氮源和能量；枸櫞酸鎂和磷酸二氫鉀為緩沖劑，并可以抑制雜菌生長；L-半胱氨酸屬氨基酸類，為營養劑；瓊脂是選擇性培養基的凝固劑；假細錐甲素對于金葡菌具有特異的抑菌作用，對于緩慢葡萄球菌無效；N-乙酰基-D-葡萄糖胺為緩慢葡萄球菌特異性營養劑，可以特異性的促進緩慢葡萄球菌繁殖。雞蛋蛋白液含有各種多肽、脂肪、生長因子、激素等，這些物質對促進緩慢葡萄球菌的繁殖和生長都是很重要的因素，此外雞蛋蛋白液還具有維持選擇性培養基pH?值恒定的作用。銅離子屬于重金屬離子，在5mg/L這個濃度劑量下，沉積于金葡菌內部，導致胞壁消失或變薄，核糖體聚集成團塊，最終導致細菌變形及破裂，呈現重金屬源性損傷，而緩慢葡萄球菌對重金屬的運輸能力和滲透能力低于金葡菌，也即重金屬的抗性較高，故而加入硫酸銅可以有效地抑制金葡菌生長。百合為百合科植物卷丹Lilium?lancifolium?Thunb.、百合Lilium?brownii?F.E.Brown?var.?viridulum?Baker?或細葉百合Lilium?pumilum?DC.?的干燥肉質鱗葉，含有蛋白質、脂肪、淀粉、還元糖、維生素B1、B2、泛酸、維生素C、β-胡蘿卜素等多種成分，可以提供能量代謝、細胞發育、新陳代謝因子，有助于促進緩慢葡萄球菌生長，尤其是重金屬環境下菌落的生長。

本發明與現有技術相比較，具有檢出可靠、緩慢葡萄球菌分離率高的特點。

具體實施方式

以下結合實際情況，對本發明的具體實施方式作詳細說明。