[發明專利]一種平貝母的促生栽培方法

無效

• 申請號: 201310357743.X
• 申請日: 2013-08-16
• 公開（公告）號: CN103444528A
• 公開（公告）日: 2013-12-18
• 發明（設計）人: 吳志剛
• 申請（專利權）人: 蘇州仁成生物科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G1/00
• 代理公司: 北京瑞思知識產權代理事務所(普通合伙) 11341
• 代理人: 李濤

技術領域

本發明涉及一種組織培養方法，具體涉及到一種平貝母的繁殖方法。

背景技術

平貝母，別名平貝、北貝、貝母，為百合科多年生草本，高達1m。平貝母的干燥鱗莖是我國常用的中藥材，具有清熱潤肺、化痰止咳、散結等功能，在臨床上用于痰熱咳嗽、咳痰帶血、瘰疬瘡瘍腫毒等疾病的治療。近年來，由于過度采挖，資源逐年減少，商品供不應求，價格不斷上漲。

目前對貝母的組織培養研究已經有了一定的規模，但是鑒于技術的問題一直存在著一些問題，對平貝母的快速繁殖技術也已經有一定的研究，但是對平貝母的需求日益增加，目前平貝母的繁殖和種植遠遠達不到人們的需求，組織培養可以大大提高平貝母的繁殖率，但是目前組織培養體系尚未充分建立，存在一些技術上的問題，優良品種的推廣普及尚未完成，供求矛盾日益加劇，嚴重影響了平貝母的大量繁殖。

發明內容

本發明針對目前存在的問題，提供一種能夠快速、有效的利用現有資源繁殖平貝母的方法。

為了解決上述技術問題，本發明采用的一個技術方案是：

一種平貝母的促生栽培方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）外植體的選擇與消毒：首先選擇當年生長健壯、無霉爛斑點的新鮮平貝母，剪去根及有傷鱗片，流水沖洗30?min后放入清水中浸泡15min，再用50％多菌靈500倍液浸泡20~30?min或者用50％福美雙粉500倍液浸泡10~15min，然后將種球鱗片剝下，用紫外燈照射10?min，轉入超凈工作臺，再用75%酒精消毒50?s，無菌水沖洗2~3次，再用6%次氯酸鈉溶液消毒10?min，無菌水沖洗2~3次。最后用0.2%的升汞溶液消毒10?min，無菌水沖洗4~5?次；

（2）材料處理：首先在超凈工作臺上，在無菌條件下，?切去鱗片上部1/3，然后將中、下部分割開來，將鱗片和鱗莖基部分別切成6-8mm的小塊；

（3）初代培養：在無菌的條件下將步驟（2）得到的外植體接種在初代培養基上，該培養基是在在3/4MS常規培養基中添加了0.8mg/L的6-BA、1.2mg/L的NAA，30-40mg/L的蔗糖和0.4-0.8mg/L的ZT；培養溫度為24℃，光照時間12?h/d，光照強度2?000?Lx，PH為?6.5，瓊脂5?g/L，經過25-30天形成愈傷組織；

（4）繼代培養：將初代培養的愈傷組織切下接種在繼代培養基上，該培養基是在MS常規培養基中添加了0.5mg/L的6-BA、0.3mg/L的IBA、0.3mg/L的KT和20mg/L的蔗糖，培養溫度為24℃，光照周期13h/d，光強度為2200lux，PH?6.5，經過7-12天時間分化出綠點后，即開始下一階段；

（5）小鱗莖的增殖：將分化出綠點的愈傷組織繼續培養，該培養基是在1/2MS常規培養基中添加了40mg/L的蔗糖、0.3mg/L的KT、0.4mg/LNAA和0.2mg/L的ZT，培養溫度為24℃，光照周期13h/d，光強度為2200lux，PH?6.5，經10-15天培養便可分化出叢生小鱗莖；

（6）生根培養：將分化出來的小鱗莖接種于下列誘導培養基中進行生根誘導：1/2?MS培養基、0.3mg/L的KT、1mg/L的活性炭、7-8g/L的瓊脂、0.5mg/L?的NAA，培養溫度為24℃，光照周期13h/d，光強度為2200lux，經過8-12天待小鱗莖長至2.5cm高，根系比較發達時，即開始下一個階段；

（7）煉苗移栽：先將培養瓶移至溫室，自然條件下煉苗6d，然后將長出新根的小鱗莖從培養瓶中取出，在陽光下曬1-2天，在曬的過程中要適當遮光，使光照強度為自然光的60%，溫度在18℃左右；

（8）土壤管理：調節土壤pH?值為7.0～8.2，將硫磺粉過篩后與5?倍體積細土混勻后施用，除了用硫磺粉調節土壤pH?值外，硫磺粉與草炭混合施用效果則更佳，或者使用松針配合硫磺粉對土壤進行改良，其中松針、原土、糞肥、硫磺粉按照重量份數比2：3：1：2,?或者土壤中施入鋸未、草炭、苔蘚和硫磺粉進行土壤改良，其中鋸未、草炭、苔蘚和硫磺粉的重量份數比為1：1：1：2；

增加土壤有機質含量：挖寬50?cm、深40?cm?的定植溝，有機質、有機肥、原土按1:1:1的比例進行改土，有機質用酸性草炭，如果用鋸末、樹皮必須先堆放1月以上，完全腐熟分解后再使用，如用人畜糞尿腐熟或植物秸稈葉子腐爛腐熟后形成的天然肥料，注意不要摻入草木灰、石灰堿性物質，含量達到3%～5%以上,?以增加土壤的通透性；