[發明專利]一株粘質沙雷氏菌菌株及其同步萃取發酵方法

有效

• 申請號: 201310357020.X
• 申請日: 2013-08-15
• 公開（公告）號: CN103627650A
• 公開（公告）日: 2014-03-12
• 發明（設計）人: 艾連中;夏永軍;徐斐;侯建平;陳衛
• 申請（專利權）人: 上海理工大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P17/16;C12R1/43
• 代理公司: 上海德昭知識產權代理有限公司 31204
• 代理人: 郁旦蓉

技術領域

本發明涉及一株高產靈菌紅素的粘質沙雷氏菌及其同步萃取發酵方法，尤其是一種靈菌紅素的同步萃取發酵生產方法，屬于發酵工業領域。?

背景技術

靈菌紅素（prodigiosins）是一類具有多個吡咯環結構的天然紅色素家族，1929年由Amak等研究發現的，Harashimak等首次分離并純化鑒定出來。早期的研究主要集中在抗微生物、抗瘧疾和其他生物活性。近年來，因為靈菌紅素表現出的抗腫瘤、免疫抑制等優良的生物活性，受到許多國內外研究者的廣泛關注，是一種十分有潛力的生物制劑。?

靈菌紅素對多種惡性腫瘤具有細胞毒活性，如對人肝癌細胞、原發性癌細胞、人胰腺癌細胞、人結腸腺癌細胞以及人胃癌細胞具有靶向性和誘導凋亡作用。目前關于靈菌紅素抗癌活性方面的熱點主要集中在細胞凋亡、細胞周期阻斷、防侵染和防轉移方面。靈菌紅素能夠加強白細胞的活性，提高其吞噬免疫活性。研究表明與當前器官移植和治療自體免疫性疾病常用的免疫抑制藥物表現的很大毒性不同，靈菌紅素是一種低毒的、潛在的新型免疫抑制藥物。此外，靈菌紅素還具有很好的抗瘧疾、抗錐蟲和抗菌活性。?

目前，靈菌紅素生產研究的熱點是微生物發酵法，主要是液態發酵法。國內在這方面研究較為落后，發酵水平較低，菌株的靈菌紅素產量低，而且大部分研究還處于實驗室搖瓶階段。由于靈菌紅素合成受群體效應的影響，因此其產量很大程度上局限于菌體量和產物抑制；同時，由于液態發酵過程中靈菌紅素在胞內和胞外均有分布，導致靈菌紅素提?取過程復雜、能量消耗大。?

公開號為CN101392227B（一種粘質沙雷氏菌及生產的靈菌紅素）、CN102002469A（發明名稱：生產靈菌紅素的菌株及其方法）、CN102277323A（發明名稱：高產靈菌紅素的粘質沙雷氏菌（Serratia?marcescens）Sm-128菌株及其應用）等專利公布了一系列產靈菌紅素的粘質沙雷氏菌株及其生產靈菌紅素的方法，生產方法均為常規液態發酵法，沒有同步萃取發酵方面的報道。?

發明內容

本發明是為了解決上述問題而進行的，目的在于提供一種高產靈菌紅素的菌株，同時提供一種同步萃取發酵的方法，提高靈菌紅素的產量。為了達到上述目的，本發明采取了以下技術方案。?

粘質沙雷氏菌（Serratia?marcescens）Xd-1菌株，該菌株于2013年6月19日提交到中國普通微生物菌種保藏管理中心（簡稱CGMCC）保藏，并驗證活性，于2013年6月28日獲得活性檢測證明，保藏號為CGMCCNo.7734。?

進一步，提供一種利用粘質沙雷氏菌（Serratia?marcescens）Xd-1菌株進行同步萃取發酵生產靈菌紅素的方法，其特征在于，包括以下步驟：制備所述菌株的一級種子液；制備所述菌株的二級種子液；將一定體積V的液態發酵培養基與體積為1～8%V的所述二級種子液在容器中混合，在轉速為130-200r/min，通氧量為0.5-1.5v/(v.m)，發酵溫度為25-30℃的發酵條件下，發酵6～18小時；向所述容器中加入體積為8～20%V的萃取劑，在所述發酵條件下繼續發酵，發酵總時間為32～64小時。?

本發明涉及的粘質沙雷氏菌的保藏信息:?

保藏單位名稱：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心?

保藏地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號?

保藏日期：2013年6月19日?

保藏編號：CGMCC?No.7734?

分類命名：粘質沙雷氏菌Serratia?marcescens?

發明的作用與效果?

本發明提供的同步萃取發酵生產靈菌紅素的方法在發酵的過程中，?將靈菌紅素從水相中萃取出來，減低了產物抑制，有利于提高靈菌紅素的產量。同時，萃取劑相中的活性產物可以通過乙醇方便的萃取到乙醇相中，使得靈菌紅素的純化回收工藝簡單快捷；回收靈菌紅素之后的萃取劑可以重復利用，從而降低了生產成本。本發明提供的靈菌紅素同步萃取發酵過程簡單，可以實現大規模工業化應用。?

具體實施方式