[發(fā)明專利]新城疫病毒、新城疫滅活疫苗及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310356120.0
• 申請日: 2013-08-15
• 公開（公告）號: CN103834620A
• 公開（公告）日: 2014-06-04
• 發(fā)明（設計）人: 黃華;張希娟;劉延亭;劉俊生;鄭杰;賀云霞;鄧秋紅
• 申請（專利權）人: 北京中聯(lián)康生物科技有限公司
• 主分類號: C12N7/00
• 分類號: C12N7/00;A61K39/17;C12N7/04;A61P31/14;C12R1/93
• 代理公司: 北京清亦華知識產權代理事務所(普通合伙) 11201
• 代理人: 李志東

技術領域

本發(fā)明涉及生物技術領域，具體涉及新城疫病毒、新城疫滅活疫苗及其制備方法。?

背景技術

雞新城疫病毒，是由新城疫病毒（Newcastle?Disease，ND)引起的嚴重危害養(yǎng)禽業(yè)的高度接觸性傳染病。新城疫病毒屬于副粘病毒科，禽腮腺炎病毒屬的禽副粘病毒I型。血凝素（HA）和神經氨酸酶（NA）是病毒的兩種主要保護性抗原。?

雞新城疫病，1926年首先發(fā)現(xiàn)于印度尼西亞，不久又在英國新城發(fā)現(xiàn)，之后世界各國均有流行記載。有強毒株和弱毒株兩類，病毒分為強毒力型、中毒力型和低毒力型。家禽最易感，雛禽比成年禽類易感性更強。死亡率高，對養(yǎng)雞業(yè)危害嚴重。尚無有效治療藥物，只能依靠嚴格消毒、隔離，活疫苗和滅活疫苗的協(xié)同使用預防接種。基于現(xiàn)有疫苗質量問題、免疫接種方式方法、免疫程序、雞場飼養(yǎng)管理水平、雞群抗體水平良莠不齊的現(xiàn)狀，使新城疫病免疫失敗屢見不鮮。為解決這一難題，有賴于對本地區(qū)流行的毒株的流行特點、變異特點進行研究以及篩選分離出合適的優(yōu)勢疫苗毒株，以使新城疫的防控更具有針對性和有效性。?

發(fā)明內容

本發(fā)明旨在至少在一定程度上解決上述技術問題之一或至少提供一種有用的商業(yè)選擇。為此，本發(fā)明的一個目的在于提出一種新城疫病毒、新城疫滅活疫苗及其制備方法。?

在本發(fā)明的第一方面，本發(fā)明提出了一種新城疫病毒，該新城疫病毒保藏編號CGMCCNo.7805，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，根據本發(fā)明實施例，所述的新城疫病毒是從經過正常免疫新城疫滅活疫苗的發(fā)病雞群分離得到，其毒價HA效價高于1:256，因此，所述的新城疫病毒株毒力高，具有良好的免疫原性，可作為滅活疫苗生產毒株及檢驗毒種。?

在本發(fā)明的第二方面，本發(fā)明提出了上述新城疫病毒在制備新城疫滅活疫苗中的用途，在本發(fā)明一個實施例中，根據新城疫病毒交叉免疫保護試驗證明，所述的新城疫病毒具有很好的交叉免疫保護作用。因此利用該新城疫病毒生產新城疫滅活疫苗，可以有效提高新城疫滅活疫苗的免疫原性，從而能夠抵抗新城疫病毒強毒以及其它新城疫強毒株的攻擊。?

在本發(fā)明第三方面，本發(fā)明提出了一種新城疫滅活疫苗，根據本發(fā)明實施例，該新城疫滅活疫苗包括滅活的新城疫病毒。從而有效提高新城疫滅活疫苗的免疫原性，進一步提高新城疫滅活疫苗安全性及免疫原性。?

在本發(fā)明第四方面，本發(fā)明提出了一種制備新城疫滅活疫苗的方法，根據本發(fā)明實施例，該方法包括：對上述新城疫病毒進行滅活，以便獲得經過滅活的新城疫病毒；利用所述經過滅活的新城疫病毒制備水相；以及將所述水相與油相進行混合乳化，以便獲得所述新城疫滅活疫苗。由此，可以有效提高新城疫滅活疫苗的免疫原性，從而進一步提高新城疫滅活疫苗安全性及免疫原性。?

根據本發(fā)明一個實施例，本發(fā)明上述實施例的制備新城疫滅活疫苗的方法還包括如下附加技術特征：?

根據本發(fā)明實施例，在對所述新城疫病毒進行滅活之前，包括按照下列步驟獲得新城疫病毒培養(yǎng)液：將所述新城疫病毒接種非免疫雞胚中，并在35.5～37.5℃下進行培養(yǎng)，收集所獲得的雞胚尿囊液；分離所述雞胚尿囊液，以便獲得所述新城疫病毒培養(yǎng)液。?

根據本發(fā)明一個實施例，對所述新城疫病毒進行滅活包括：在37℃下，利用終濃度為0.2%的甲醛對新城疫病毒培養(yǎng)液進行滅活處理16～36小時；以便獲得含有滅活新城疫病毒的溶液。根據本發(fā)明一個實施例，所述制備水相包括：將含有滅活新城疫病毒的溶液與吐溫-80按照96：4的體積比例進行混合，以便得到所述水相，其中，所述吐溫-80的終濃度為4%。?

根據本發(fā)明一個實施例，所述制備油相包括：將注射用白油MARCOL52、司本-80以及硬脂酸鋁按照94：6：2的質量比進行混合，以便得到所述油相。由此，提高新城疫滅活疫苗的免疫原性，從而進一步提高新城疫滅活疫苗安全性及免疫原性。?

根據本發(fā)明一個實施例，將所述水相與油相混合包括：將所述水相和油相按照體積比為2：3～2：4進行混合乳化攪拌，在攪拌終止前加入終濃度為0.01%的硫柳汞以便獲得所述新城疫滅活疫苗。由此可以使得由此可以防止腐敗，延長疫苗的保存期，提高新城疫滅活疫苗的穩(wěn)定性和免疫原性。?

本發(fā)明的附加方面和優(yōu)點將在下面的描述中部分給出，部分將從下面的描述中變得明顯，或通過本發(fā)明的實踐了解到。?

附圖說明

本發(fā)明的上述和/或附加的方面和優(yōu)點從結合下面附圖對實施例的描述中將變得明顯和容易理解，其中：?

圖1是根據本發(fā)明一個實施例的新城疫滅活疫苗的制備方法技術路線圖。?