[發明專利]一種防齲釉基質蛋白功能多肽及其制備方法和用途

有效

• 申請號: 201310354537.3
• 申請日: 2013-08-15
• 公開（公告）號: CN103421091A
• 公開（公告）日: 2013-12-04
• 發明（設計）人: 張凌琳;律雪蘋;楊陽;周學東;李繼遙
• 申請（專利權）人: 四川大學
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;C07K14/00;A61K38/10;A61K38/16;C07K1/04;C07K1/08
• 代理公司: 成都九鼎天元知識產權代理有限公司 51214
• 代理人: 李強;吳彥峰

技術領域

本發明涉及一種防齲技術，特別涉及一種防齲釉基質蛋白功能多肽及其制備方法和用途。?

背景技術

齲病是人類最常見的口腔疾病。由于齲病發病率高，流行區廣，嚴重影響口腔及全身健康，世界衛生組織已將其列為人類重點防治的三大非傳染性疾病之一，僅次于心血管疾病和腫瘤。?

氟化物作為一種經典的防齲制劑，在過去的四十多年里，以各種不同的形式被利用，如飲水加氟、含氟牛奶或含氟食鹽、局部涂氟(含氟牙膏、含氟凝膠、含氟漱口水)等，從而能不同程度地降低人群中的患齲率，被公認為當前世界上最有效的防齲措施。然而隨著多種氟化物制劑使用的推廣，使用濃度及頻率的增加，耐氟菌株、氟斑牙、氟骨癥的出現使氟化物防齲局限性日益突顯。?

抗微生物制劑如洗必泰、四環素等，可直接作用于細菌而預防齲病，但長期使用易引起口腔菌群失調，使細菌產生耐藥性，具有明顯的毒副作用。?

免疫防齲具有一定效果，但存在增強免疫原性及人體應用安全性問題，此外影響口腔菌群生態的問題也函待解決。?

中藥如兒茶、大黃、黃芩、蜂房、檳榔、三七、茶多酚等已被證實具有干擾細菌代謝、抑制牙菌斑生物膜形成等作用，但存在藥液牙體染色、耐藥性等問題。?

不定形磷酸鈣、糖的替代品木糖醇及山梨醇、中藥五倍子及隔消山、納米羥磷灰石、酪蛋白磷酸肽、微量元素、橄欖油、樹脂等的再礦化作用被先后報道，但由于效果不明顯或實驗結果不一，目前結論尚未統一。?

針對上述問題，本領域積極探尋其他的防齲藥物和方法。?

釉基質蛋白（EMP）是一組來自上皮根鞘的蛋白質，是在牙齒發育期Hertwig上皮根鞘內層的成釉細胞分泌的一種調控牙礦化的基質蛋白，在牙本質剛剛開始礦化之前表達，在牙本質早期成熟階段停止表達。釉基質蛋白含有釉原蛋白、成釉蛋白、釉蛋白等蛋白質成分，其中釉原蛋白占發育期牙釉質蛋白質提取物的90%以上。釉原蛋白在釉基質生物礦化過程中起著決定性作用。成釉細胞分泌釉原蛋白后，在牙本質的誘導下，釉質很快進行生物礦化。釉原蛋白對釉質礦化的起始、晶核的形成及排列等諸多因素起著重要作用。釉原蛋白可為釉質生物礦化提供必要的支架，并且還可控制晶體生長的速度，維持晶體生長，是釉質生物礦化的關鍵。?

近年，基于釉基質蛋白的生物礦化功能，體外利用釉基質蛋白合成人工羥磷灰石已獲得?成功。Chen等模擬牙釉質礦化過程,利用釉基質蛋白控制合成了在化學組成上和晶體尺寸上都和自然牙釉質非常相似的納米棒狀羥磷灰石。Yamagish等在牙釉質表面形成了具有釉質結構的氟磷灰石，這些氟磷灰石排列致密，平行排列，垂直于釉質表面。國內學者王志偉等將牙釉質放置在含SD大鼠牙釉基質蛋白的磷酸鹽瓊脂-醋酸鈣溶液體系中7天，結果發現添加釉基質蛋白的牙釉質表面出現晶體帶狀結構。這些實驗結果均提示釉基質蛋白具有誘導牙釉質再礦化的強大潛力，利用釉基質蛋白的這種潛力從而促進早期齲再礦化，極可能為齲病防治提供一條嶄新的思路。?

但是，目前釉基質蛋白尚未直接用于防齲。目前釉基質蛋白主要通過以下途徑獲得：①從牙胚中提取釉基質蛋白。②根據釉原蛋白、非成釉蛋白的基因序列，利用生物工程技術實現了釉原蛋白的人工基因重組，如重組大鼠的釉原蛋白Mr179、Mrl66。③商品化的釉基質衍生物。1999年瑞典Biora開發了(釉原蛋白的商品名)產品，經美國FDA批準用作牙周骨內缺損與根面平整區域的治療，隨后在牙周病治療和牙周缺損修復中得到極為廣泛應用。上述釉基質蛋白來源中，提取法需要組織材料較多，得到的是不同分子量的混合成分，很難得到高純度產物；基因重組蛋白程序復雜，且翻譯后加工修飾體系不完善，復性和修飾很困難，蛋白功能常不完善；瑞典為豬牙胚提取的釉基質蛋白純化，取典型釉原蛋白的3個相對分子量峰值凍干保存獲得，雖然具有明顯促牙周組織再生作用，但可能丟失有效的防齲功能片段。綜上述，目前釉基質蛋白的獲得方法復雜且可能丟失有效的防齲片段，如何利用釉基質蛋白進行有效防齲成為本領域一直想解決但未能解決的難題。?

發明內容

本發明的發明目的之一在于：針對上述存在的問題，創新性提出利用仿生礦化防齲的思想，構建一種可有效防齲的多肽。?

本發明采用的技術方案是這樣的：一種防齲釉基質蛋白功能多肽，包含如SEQIDNO.1所示的氨基酸序列，以及包含SEQIDNO.1所示的氨基酸序列的鹽或酯；?

SEQIDNO.1：QPYQPVQPHQPMQPQ?