[發明專利]一種紫蘇子抗氧化活性提取物的高效液相色譜指紋圖譜的建立方法及其標準指紋圖譜和用途

有效

• 申請號: 201310351196.4
• 申請日: 2013-08-13
• 公開（公告）號: CN103399097A
• 公開（公告）日: 2013-11-20
• 發明（設計）人: 劉麗娟;宋婷婷
• 申請（專利權）人: 黑龍江大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 哈爾濱市松花江專利商標事務所 23109
• 代理人: 牟永林

技術領域

本發明涉及一種紫蘇子抗氧化活性提取物的高效液相色譜指紋圖譜的建立方法及其標準指紋圖譜和用途。

背景技術

人體在利用氧氣進行代謝反應時，會在體內產生大量含氧自由基，體內的抗氧化系統便會受到不夠用的危機，從而引起癌癥、動脈硬化、糖尿病、老年癡呆等重大疾病。研究表明，通過補充抗氧化物質能夠消除體內過多的含氧自由基，對自由基引起的相關疾病可得到有效預防，通過食用功能性的抗氧化食品也是一種極為有效的補充抗氧化劑的方法。

紫蘇子為唇形科植物紫蘇的干燥成熟果實Perilla?frutescens(L.)Britt.，收載于《中華人民共和國藥典》2010版一部，具有降氣化痰、止咳平喘、潤腸通便的功效。現代藥理學研究表明，紫蘇子主要含有脂肪油、生物堿類、糖類、黃酮類等成分，具有降血脂、止咳平喘、抗過敏、抗衰老、抗氧化等作用。在質量控制方面，《中華人民共和國藥典》2010版一部僅收載了紫蘇子對照藥材的鑒別和迷迭香酸的含量測定。由于中藥的成分復雜，有效成分又多隨產地、來源、采收季節等情況變化而變化，因此，采用指紋圖譜技術全面反映藥材的整體特征，并進一步與其活性相關聯，對于完善目前的質量控制方法，保證臨床用藥的安全有效是十分必要的。目前，關于紫蘇子的指紋圖譜研究尚未有文獻報道，更沒有建立紫蘇子抗氧化提取物的指紋圖譜，從質量控制方面，有關紫蘇子抗氧化提取物的標準指紋圖譜亦沒有報道。

發明內容

本發明是要提供一種紫蘇子抗氧化活性提取物的高效液相色譜指紋圖譜的建立方法及其標準指紋圖譜和用途。

本發明一種紫蘇子抗氧化活性提取物的高效液相色譜指紋圖譜的建立方法，是按以下步驟進行：一、供試品溶液的制備：a、取紫蘇子藥材，粉碎后加入沸程為60～90℃的10倍質量的石油醚，回流3次，每次2h，得到殘渣；

b、將殘渣室溫干燥后，加入10倍質量的質量濃度為75%的乙醇，回流2次，每次2h,收集兩次回流所得溶液，然后過濾，收集濾液，再將濾液減壓濃縮至干，得浸膏，即紫蘇子抗氧化活性提取物；

c、將步驟b得到的紫蘇子抗氧化活性提取物，用甲醇溶解成濃度為1mg/mL的溶液，用微孔濾膜進行過濾，濾液即為供試品溶液；

二、指紋圖譜的制作：將步驟一得到的供試品溶液注入高效液相色譜儀，以乙腈為A相，質量百分含量為0.5%的乙酸水溶液為B相進行梯度洗脫；

其中，高效液相色譜條件為：

色譜柱填料Thermo?C18，規格為250×4.6mm，5μm；柱溫為35℃；流動相為A相乙腈和B相質量百分含量為0.5％乙酸水溶液，流速0.8mL/min，檢測波長280nm，進樣10μL；

在此條件下分析供試品溶液，得到紫蘇子抗氧化活性提取物的指紋圖譜。

本發明采用一種紫蘇子抗氧化活性提取物的高效液相色譜指紋圖譜的建立方法得到的紫蘇子抗氧化活性提取物標準指紋圖譜。

本發明紫蘇子抗氧化活性提取物標準指紋圖譜的用途是指紫蘇子抗氧化活性提取物指紋圖譜作為標準指紋圖譜用于紫蘇子質量控制中。

本發明提取了紫蘇子中具有抗氧化作用的提取物，通過對DPPH自由基清除試驗，證明了該提取物具有優良的抗氧化活性，本發明紫蘇子抗氧化活性提取物的高效液相色譜指紋圖譜的建立方法具有快速準確、重現性好、操作性強、穩定可靠等優點。本發明的紫蘇子抗氧化活性提取物標準指紋圖譜有9個共有特征峰，這些共有特征峰構成了紫蘇子抗氧化活性提取物的指紋特征，可作為紫蘇子抗氧化活性提取物的標準指紋圖譜。本發明的紫蘇子抗氧化活性提取物標準指紋圖譜作為標準指紋圖譜經多批樣品驗證后可用于紫蘇子質量控制中，用于從整體上評價和控制紫蘇子藥材的質量,避免了只對單一或幾個成分進行研究，使分析結果更加全面科學。

附圖說明

圖1為試驗1提供的紫蘇子抗氧化活性提取物標準指紋圖譜；其中1至9為紫蘇子抗氧化活性提取物的9個共有特征峰；

圖2為S1-S10的10批紫蘇子藥材指紋圖譜。

具體實施方式

具體實施方式一：本實施方式一種紫蘇子抗氧化活性提取物的高效液相色譜指紋圖譜的建立方法，是按以下步驟進行：一、供試品溶液的制備：a、取紫蘇子藥材，粉碎后加入沸程為60～90℃的10倍質量的石油醚，回流3次，每次2h，得到殘渣；

b、將殘渣室溫干燥后，加入10倍質量的質量濃度為75%的乙醇，回流2次，每次2h,收集兩次回流所得溶液，然后過濾，收集濾液，再將濾液減壓濃縮至干，得浸膏，即紫蘇子抗氧化活性提取物；