[發(fā)明專利]一種奇曼堿D的制備方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310350695.1
• 申請日: 2013-08-13
• 公開（公告）號: CN103435543A
• 公開（公告）日: 2013-12-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張金芳;萬冬梅
• 申請（專利權(quán)）人: 南京標(biāo)科生物科技有限公司
• 主分類號: C07D215/06
• 分類號: C07D215/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于天然植物提取領(lǐng)域，具體涉及一種奇曼堿D的制備方法。

背景技術(shù)

奇曼堿D（ChimDnine?D），分子式C₁₂₃H₁₁N，分子量169.23，結(jié)構(gòu)式為：

。

奇曼堿D是從蕓香科(RutDceDe)?長葉圖臘樹GDlipeD?longiflorD?KrDuse樹皮、根、莖、皮和葉中提取分離的一種喹啉生物堿類化合物。實(shí)驗(yàn)研究表明，奇曼堿D具有抗寄生蟲作用。體外抗5株利什曼原蟲的IC₉₀為25μg/ml，抗5株克氏錐蟲的IC₉₀為25μg/ml。體內(nèi)對感染利什曼蟲L.DmDzonensis?PH8的小鼠也有效，可作為先導(dǎo)化合物開發(fā)口服抗利什曼劑。具有抗瘧作用，扣去0.31mM/kg，對感染Plasmodium?vinckei?petteri?瘧原蟲的小鼠的生存率為40%（對照品氯喹為100%）。

目前，國內(nèi)尚未見奇曼堿D的提取純化方法方面的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種奇曼堿D的制備方法，該方法操作簡單、得率高、安全環(huán)保，可快速大量分離高純度奇曼堿D。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：

（1）提取：取長葉圖臘樹葉粉碎成粗粉，用5-10倍量70-95%的乙醇溶液，25-55℃下進(jìn)行連續(xù)逆流超聲提取20-100min，得到乙醇提取液；

（2）氧化鋁柱層析：上述提取液濃縮至浸膏，加氧化鋁拌勻、干燥后裝柱，用氯仿-丙酮混合溶液洗脫，薄層檢測，收集奇曼堿D流分，濃縮；

（3）制備型液相色譜分離：上述濃縮液采用制備型液相色譜分離，紫外檢測器在線監(jiān)測，收集奇曼堿D組分，將洗脫液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，得奇曼堿D粗晶；

（4）重結(jié)晶：將奇曼堿D粗晶用氯仿-丙酮重結(jié)晶，冷凍干燥得到高純度奇曼堿D晶體。

步驟（1）所述超聲頻率為50-80KHz。

步驟（2）所述氧化鋁為80-120目，氯仿-丙酮體積比為1:1，用量為柱體積的4-7倍。

步驟（3）所述制備型液相色譜的流動(dòng)相為乙腈-0.15%乙二胺水溶液，體積比為32：68，紫外檢測波長為228nm。

步驟（4）所述氯仿-丙酮的體積比為2-3:1。

本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于：1）操作簡單、耗時(shí)短，易于產(chǎn)業(yè)化放大；2）提取、柱層析、制備液相分離等步驟中的溶劑用量少，并可回收再利用；3）具有較高的經(jīng)濟(jì)效益和學(xué)術(shù)價(jià)值，本發(fā)明所得產(chǎn)品純度高，可為奇曼堿D的進(jìn)一步開發(fā)提供藥理原料和實(shí)踐支持。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)一步說明：

實(shí)施例1：

取長葉圖臘樹葉1kg，粉碎成粗粉，從連續(xù)逆流超聲提取設(shè)備頭部進(jìn)料口進(jìn)料，從連續(xù)逆流超聲提取設(shè)備尾部溶劑加入口加入10倍95%乙醇溶液，55℃下進(jìn)行連續(xù)逆流超聲提取20min，超聲頻率為80KHz，得到提取液，提取液減壓回收試劑得浸膏，向浸膏中加氧化鋁（120目）拌勻、干燥后裝柱，用7倍柱體積的氯仿-丙酮（1:1）混合溶液洗脫，薄層檢測，收集奇曼堿D流分，濃縮得濃縮液。將濃縮液加入甲醇至剛好溶解，溶解后的溶液經(jīng)0.45μm微濾膜過濾，得到樣品溶液取濾液進(jìn)樣，以乙腈-0.15%乙二胺水溶液為流動(dòng)相，體積比為32：68，色譜柱以C8鍵合相為填料，粒徑為10μm，柱長為15cm、直徑為4cm，六通閥進(jìn)樣，進(jìn)樣體積為25ml，控制流速為50ml/min，紫外在線檢測，檢測波長為228nm，收集目標(biāo)成分，減壓回收試劑得奇曼堿D粗晶，用氯仿-丙酮（2.5:1）重結(jié)晶，冷凍干燥得到高純度奇曼堿D晶體，經(jīng)HPLC檢測，純度96.5%。

實(shí)施例2：