[發明專利]生成微脈管網絡、內皮原始脈管、組織和人冠狀動脈替代品的方法

無效

• 申請號: 201310349312.9
• 申請日: 2007-03-09
• 公開（公告）號: CN103468634A
• 公開（公告）日: 2013-12-25
• 發明（設計）人: T·紐曼
• 申請（專利權）人: 諾荑思公司
• 主分類號: C12N5/071
• 分類號: C12N5/071;C12M3/02
• 代理公司: 北京潤平知識產權代理有限公司 11283
• 代理人: 李婉婉;張苗

1.一種在體外生成可灌注的微脈管網絡的方法，該方法包括下述步驟：

通過在一組軸芯（2）上以及軸芯的周圍培養內皮細胞（1），在體外生成至少一個原始脈管（200）；

將所述至少一個原始脈管（200）植入到基質中；

誘導所述至少一個原始脈管（200），以在所述基質中生成萌芽（220），所述萌芽能夠被選自由堿性纖維原細胞生長因子、動脈內壓生長因子和佛波12-肉豆蔻酸-13-酯組成的組中的化合物所誘導，所述化合物被加入到凝膠和/或灌注液中；

取出所述一組軸芯（2）；并且

對所述至少一個原始脈管（200）和萌芽進行內腔灌注，以模擬從毛細管床的動脈末端到靜脈末端的自然血流，以生成微脈管網絡。

2.根據權利要求1所述的方法，其中，所述生成至少一個原始脈管（200）的步驟生成了兩個或多個原始脈管，所述萌芽吻合并形成毛細管網絡。

3.根據權利要求1所述的方法，其中，所述生成至少一個原始脈管（200）的步驟還包括生成多維排列的可灌注的脈管。

4.根據權利要求1所述的方法，其中，灌注液（204）含有含氧的細胞生長培養基，不含有血清以及生成脈管的物質或抑制脈管生成的物質。

5.根據權利要求1所述的方法，其中，所述對至少一個原始脈管（200）和萌芽進行內腔灌注的步驟包括使用灌注液（204），該灌注液含有含氧的細胞生長培養基，該灌注液補充有血清、和/或對脈管生成起作用的化合物。

6.根據權利要求1所述的方法，其中，所述對至少一個原始脈管（200）和萌芽進行內腔灌注的步驟包括使用含氧的生理鹽溶液進行灌注。

7.根據權利要求1所述的方法，其中，所述對至少一個原始脈管（200）和萌芽進行內腔灌注的步驟包括使用含氧的血液、血液成分或血液替代品進行灌注。

8.根據權利要求1所述的方法，其中，所述對至少一個原始脈管（200）和萌芽進行內腔灌注的步驟包括使用無氧的灌注液（204）進行灌注，并通過所述基質的擴散實現系統的氧合作用。

9.根據權利要求1所述的方法，其中，所述對至少一個原始脈管（200）和萌芽進行內腔灌注的步驟包括將生成脈管的化合物和抑制脈管生成的化合物中的至少一種添加到灌注液（204）中。

10.根據權利要求1所述的方法，其中，所述對至少一個原始脈管（200）和萌芽進行內腔灌注的步驟包括將生成脈管的化合物和抑制脈管生成的化合物中的至少一種添加到所述基質中。

11.根據權利要求1所述的方法，其中，所述細胞包括基因修飾的細胞，該基因修飾的細胞能將產物釋放到灌注液（204）或所述基質中。

12.根據權利要求1所述的方法，其中，所述基質含有選自由纖維蛋白、膠原質、凝膠、凝膠化的基底膜、瓊脂、瓊脂糖、藻酸鹽、基底膜蛋白質、硅膠、和它們的組合所組成的組中的材料。

13.根據權利要求1所述的方法，其中，所述方法還包括將細胞沉積在所述基質中，其中，沉積在所述基質中的所述細胞選自由內皮細胞、平滑肌細胞、周細胞、人細胞、動物細胞、干細胞和基因修飾的細胞所組成的組中。

14.根據權利要求1所述的方法，其中，所述基質填充有細胞，該細胞選自由人細胞和動物細胞所組成的組中。

15.根據權利要求1所述的方法，其中，健康組織或病態組織的片段被植入到所述基質中。

16.根據權利要求1所述的方法，其中，癌組織的片段被植入到所述基質中。

17.根據權利要求1所述的方法，其中，通過減少流入靜脈原始脈管（202）中的流量并增加人工原始脈管（200）中的阻力，流動的灌注液（204）通過毛細管（206）而改變通路，以驅動灌注液（204）從具有較高壓力的脈管流入具有較低壓力的脈管。

18.根據權利要求1所述的方法，其中，所述微脈管網絡包括選自生物人工微脈管、原始內皮細胞管、和平滑肌細胞管中的一種。

19.根據權利要求1的方法，其中，所述微脈管網絡包括能夠向灌注液（204）中釋放因子的正常細胞或基因修飾的細胞。