[發明專利]一種基于液相色譜儀檢測莫西克汀含量的方法

有效

• 申請號: 201310349254.X
• 申請日: 2013-08-13
• 公開（公告）號: CN103399115A
• 公開（公告）日: 2013-11-20
• 發明（設計）人: 周利彩;張慧;杜石磊;張紅艷;蘇曉娜
• 申請（專利權）人: 河北圣雪大成制藥有限責任公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/34;G01N30/54;G01N30/32
• 代理公司: 北京世譽鑫誠專利代理事務所(普通合伙) 11368
• 代理人: 郭官厚

技術領域

本發明屬于高效液相檢測方法，具體涉及一種莫西克汀成品含量檢測的液相色譜方法，尤其適用于85%以下純度的低純度莫西克汀的含量檢測。

背景技術

莫西克汀是一種新型抗寄生蟲藥，是由鏈霉菌發酵的單一成分的大環內酯類抗生素。抗寄生蟲藥普遍應用于畜牧業、養殖業等基礎農業中，國際抗寄生蟲藥的需求一直保持持續增長。因此，一種更為快速、高效的含量檢測液相色譜方法就顯得尤為重要。

EP7.0?莫西克汀含量檢測液相色譜方法流速為2.5mLmin，高流速必然引起高壓力，其結果是造成色譜柱及儀器壽命縮短，同時，高流速造成流動相用量大，試劑浪費；EP7.0?莫西克汀含量檢測液相色譜方法柱溫為50℃，而柱子一般溫度為35℃，溫度過高會加快鍵合相的水解和硅膠的溶解，從而使填料性質改變,柱床塌陷,降低柱效,改變峰形。

發明內容

本發明的目的在于提供一種提高化驗室的工作效率，減少對液相色譜儀及色譜柱損傷的莫西克汀成品含量檢測液相色譜方法。

本發明采用的技術方案是，一種基于液相色譜儀檢測莫西克汀含量的方法，所述的方法具體步驟包括：

a、對照品溶液：將莫西克汀對照品置于第一容量瓶中，加乙腈溶解、定容，備用；

b、供試品溶液：將與莫西克汀同等質量的供試品置于第二容量瓶中，加乙腈溶解、定容，備用；

c、設定液相色譜儀的參數條件：流動相A為0.25M醋酸銨溶液與乙腈的混合溶液，體積比是7:（2.5~3.5），流動相B為乙腈，色譜柱的柱溫控制在40~45℃，流速控制在1.0~1.5mL/min；

d、量取同體積的對照品溶液及供試品溶液注入液相色譜儀中進行洗脫，洗脫方式為：前十分鐘流動相B為55%，中間十幾分鐘流動相B增加為65%，最后十分鐘流動相B又降為55%；

e、按外標法計算得出莫西克汀的含量。

所述的檢測方法應用在純度≤85%的莫西克汀含量檢測。

所述的流動相A中0.25M醋酸銨溶液與乙腈的最佳體積比為7:3。

本發明的關鍵是洗脫方式原由來的等度改為梯度洗脫，度程序：前十分鐘流動相B為55%，中間十幾分鐘流動相B增加為65%，最后十分鐘流動相B又降為55%，運行時間總共為30min；流速比原來降低1~1.5mL/min；柱溫比原來降低5~10℃。

現有技術中因低純度莫西克汀雜質較多，這樣運行時間較長。本發明尤其適合低濃度莫西克汀含量檢測，可明顯縮短運行時間，提高工作效率。

附圖說明

圖1是本發明中對照品色譜圖。

圖2是本發明中供試品色譜圖。

圖3是本發明中EP7.0檢測方法對照品色譜圖。

圖4是本發明中EP7.0檢測方法供試品色譜圖。

圖5是本發明中EP7.0檢測方法優化過程方法一色譜圖。

圖6是本發明中EP7.0檢測方法優化過程方法二對照品色譜圖。

圖7是本發明中EP7.0檢測方法優化過程方法二供試品色譜圖。

圖8是本發明中EP7.0檢測方法優化過程方法三供試品色譜圖。

圖9是本發明中EP7.0檢測方法優化過程方法四對照品色譜圖。

圖10是本發明中EP7.0檢測方法優化過程方法四供試品色譜圖。

圖11是EP7.0檢測方法優化過程方法五與方法三對照品對比色譜圖。

圖12是EP7.0檢測方法優化過程方法五對照品與供試品對比色譜圖。

圖13是EP7.0檢測方法優化過程方法六與方法五對照品對比色譜圖。

圖14是EP7.0檢測方法優化過程方法七與方法六對照品對比色譜圖。

圖15是本發明中EP7.0檢測方法優化過程方法八對照品色譜圖。

圖16是本發明中EP7.0檢測方法優化過程方法八供試品色譜圖。

具體實施方式

一種基于液相色譜儀檢測莫西克汀含量的方法，所述的方法具體步驟包括：

a、對照品溶液：將莫西克汀對照品置于第一容量瓶中，加乙腈溶解、定容，備用；

b、供試品溶液：將與莫西克汀同等質量的供試品置于第二容量瓶中，加乙腈溶解、定容，備用；

c、設定液相色譜儀的參數條件：流動相A為0.25M醋酸銨溶液與乙腈的混合溶液，體積比是7:（2.5~3.5），流動相B為乙腈，色譜柱的柱溫控制在40~45℃，流速控制在1.0~1.5mL/min；