[發(fā)明專利]一種提高靈芝液體發(fā)酵菌絲體靈芝酸含量的方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310348015.2
• 申請(qǐng)日: 2013-08-09
• 公開（公告）號(hào): CN103392510A
• 公開（公告）日: 2013-11-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 趙明文;任昂;師亮;姜愛良;劉連;繆志剛
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): A01G1/04
• 分類號(hào): A01G1/04;C05G1/00
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責(zé)任公司 32218
• 代理人: 徐冬濤;李曉峰

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種利用乙酸進(jìn)行兩階段發(fā)酵提高靈芝液體發(fā)酵菌絲體靈芝酸含量的方法。具體涉及一種在靈芝菌絲體液體發(fā)酵中，第一階段促進(jìn)靈芝菌絲迅速生長(zhǎng)，第二階段通過添加乙酸來誘導(dǎo)靈芝菌絲體提高靈芝酸含量。

背景技術(shù)

靈芝(Ganoderma?lucidum)是擔(dān)子菌綱、多孔菌科、靈芝菌屬真菌，是我國(guó)最著名的高等藥用真菌。作為藥物已有?2000多年的歷史。目前在靈芝中研究較多的化學(xué)成分有多糖類、三萜類、核苷類、甾醇類、生物堿類、呋喃類、氨基酸多肽類、油脂類、微量元素等物質(zhì)。靈芝酸是靈芝的主要活性成分之一，同時(shí)，也是主要藥用成分。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，靈芝酸具有抗腫瘤、保肝作用，抑制組胺釋放、血管緊張素轉(zhuǎn)化酶等活性。而通過各種方法（如紫外誘變選育）促使得到更多的靈芝的有效活性成分，已成為國(guó)內(nèi)外學(xué)者研究和關(guān)注的熱點(diǎn)。提高靈芝酸含量，對(duì)提高靈芝的藥用效果有重大的意義。

目前研究表明，茉莉酸甲酯、苯巴比妥、阿司匹林和銅離子都能夠誘導(dǎo)靈芝酸合成。這些工作為研究靈芝酸生物合成的調(diào)控機(jī)制提供了很好的材料和表型。但是靈芝酸發(fā)酵產(chǎn)品作為食品和藥品，必須考慮其發(fā)酵的安全性和經(jīng)濟(jì)性。茉莉酸甲酯本身價(jià)格昂貴，苯巴比妥是一種普遍性中樞神經(jīng)抑制藥，阿司匹林是一種解熱鎮(zhèn)痛藥，銅離子是一種重金屬。在靈芝酸發(fā)酵實(shí)際生產(chǎn)中，需要一種具有食品安全級(jí)別的，價(jià)格低廉的誘導(dǎo)物，而乙酸是食用醋的主要成分，具有食用安全性并且價(jià)格較低。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種提高靈芝液體發(fā)酵菌絲體靈芝酸含量的方法。

本發(fā)明的目的可以通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：

一種提高靈芝液體發(fā)酵菌絲體靈芝酸含量的方法，該靈芝液體發(fā)酵分為兩個(gè)階段發(fā)酵：第一階段發(fā)酵促進(jìn)靈芝菌絲迅速生長(zhǎng)，第二階段發(fā)酵通過向第一階段發(fā)酵得到的發(fā)酵液中添加乙酸來誘導(dǎo)靈芝菌絲體提高靈芝酸含量。

上述的方法，包括以下步驟：

（1）向CYM培養(yǎng)基中接種靈芝液體菌種，在溫度28~30℃，轉(zhuǎn)速120~150?r/min條件下，進(jìn)行第一階段發(fā)酵，發(fā)酵時(shí)間為120~168小時(shí)；

（2）第一階段發(fā)酵結(jié)束后，向發(fā)酵液中添加乙酸，繼續(xù)進(jìn)行第二階段發(fā)酵，發(fā)酵時(shí)間為8~48小時(shí)。

所述乙酸的添加濃度為2?mM~14mM；優(yōu)選為5?mM~14mM。

所述液體菌種的接種量為CYM培養(yǎng)基體積的3%~15%。

1升所述CYM培養(yǎng)基的配方為：麥芽糖10克，葡萄糖20克，酵母提取物2克，蛋白胨2克，七水硫酸鎂0.5克，磷酸二氫鉀1克，用水定容至1升，115℃滅菌25~40分鐘。

本發(fā)明的提高靈芝液體發(fā)酵菌絲體靈芝酸含量的方法，在靈芝菌絲體液體發(fā)酵時(shí)添加乙酸來誘導(dǎo)靈芝產(chǎn)生更多的靈芝酸。所使用的誘導(dǎo)劑乙酸安全，且價(jià)格低廉，可顯著提高靈芝酸的產(chǎn)量。

本發(fā)明的有益效果

通過本發(fā)明的方法，可顯著提高靈芝菌絲體液體發(fā)酵時(shí)靈芝酸含量，且安全可靠，方法簡(jiǎn)單，成本低廉，與常規(guī)培養(yǎng)方法相比采用本發(fā)明方法可使液體發(fā)酵的靈芝菌絲體中靈芝酸的含量達(dá)到2.77~5.74?mg/100?mg?DW，相對(duì)于比較例靈芝酸含量2.17?mg/100?mg?DW，提高27.6?%~156.2?%。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合實(shí)例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)說明：

實(shí)施例一

1.?配置CYM培養(yǎng)基，配方為：麥芽糖10克，葡萄糖20克，酵母提取物2克，蛋白胨2克，七水硫酸鎂0.5克，磷酸二氫鉀1克，用水定容至1升，滅菌條件為115℃滅菌30分鐘。

2.?以5?%的接種量向配置好的CYM培養(yǎng)基中接入靈芝液體菌種，在溫度28℃，轉(zhuǎn)速150?r/min條件下，進(jìn)行第一階段的發(fā)酵，發(fā)酵時(shí)間分別為128，136，144，152，160，168小時(shí)。

3.?分別在第一階段發(fā)酵結(jié)束后，在無菌條件下分別向發(fā)酵液中添加最終濃度為5?mM的乙酸，進(jìn)行第二階段發(fā)酵。