[發(fā)明專利]赤霉素與濕沙層積使七葉一枝花種子快速萌發(fā)繁育的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310342231.6
• 申請日: 2013-08-06
• 公開（公告）號: CN103609223A
• 公開（公告）日: 2014-03-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 宋發(fā)軍;劉學(xué)群;王春臺(tái);黃宗華
• 申請（專利權(quán)）人: 中南民族大學(xué)
• 主分類號: A01C1/00
• 分類號: A01C1/00
• 代理公司: 武漢華旭知識產(chǎn)權(quán)事務(wù)所 42214
• 代理人: 周宗貴;劉榮

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種用赤霉素與濕沙層積使七葉一枝花種子快速萌發(fā)繁育的方法，屬于植物種植技術(shù)領(lǐng)域。?

背景技術(shù)

七葉一枝花(Paris?polyphylla?var.chinensis?)又叫重樓、七葉蓮、蚤休等，最早在《神農(nóng)本草經(jīng)》記載的是以藥用部位根狀莖之名“蚤休”，是百合科(Liliaceae)重樓屬(Paris)多年生草本植物的總稱(國家藥典委員會(huì)，2005)。?

七葉一枝花的株高為30~100cm，葉片5~11枚，形狀為長圓狀披針形、窄卵形，一朵黃綠色的花生長于輪生葉片的莖頂；莖單一直立生長，多呈白綠色和紫紅色，生長發(fā)育時(shí)期一般為275~376天；褐色、具有斜向環(huán)節(jié)、橫生、肥大且常彎曲的根狀莖生長于地下，直徑1.3~3cm，長3~8cm，在其頂端有凹陷的莖殘基或芽痕，且有收縮根；花期一般在5~7月份；果期在8~10月份，果實(shí)為蒴果，蒴果裂開，種子為多數(shù)的紅色肉質(zhì)漿果，種子從繁殖到藥用需要5~10年，資源再生很慢。導(dǎo)致藥用野生七葉一枝花的資源瀕臨枯竭。因此，國內(nèi)外學(xué)者開始廣泛關(guān)注七葉一枝花的引種栽培、不同外植體的組織培養(yǎng)和種子的快速萌發(fā)技術(shù)。?

現(xiàn)有技術(shù)中研究七葉一枝花繁殖方式主要是有性繁殖和營養(yǎng)繁殖。七葉一枝花種子具有“二次休眠”的特性，使其繁殖周期長，實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵是打破種子休眠，促使種子快速萌發(fā)。目前采用較多的根莖的切塊繁殖，不僅消耗了藥用部分，而且易造成種質(zhì)資源退化，抗逆性降低。研究表明，高溫和低溫都能抑制重樓種子的萌發(fā)和胚根的生長，而9℃的低溫，其發(fā)根率為0。研究七葉一枝花種子的結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn)，成熟種子的胚分化不完全，種子具有“二次休眠”的生理特性，若單獨(dú)使用高溫和低溫，則對種子休眠的解除沒有效果，只有通過高溫和低溫的交替組合，才能打破種子的休眠，促進(jìn)種子的萌發(fā)和長出幼苗。云南重樓種子層積的溫度和天數(shù)組合為14天4℃和14天22℃交替共112天對打破休眠有明顯的促進(jìn)作用。目前國內(nèi)外學(xué)者對七葉一枝花種子的研究大部分是采用變溫的層積方式處理種子，打破休眠，促進(jìn)種子快速萌發(fā)。常用的植物激素如GA₃、CTK、生長素和化學(xué)藥劑PEG對不同種子的萌發(fā)有明顯的促進(jìn)作用，研究廣泛和備受關(guān)注。?

對七葉一枝花種子的研究還發(fā)現(xiàn)，每年9~10月采摘成熟的開裂的七葉一枝花種子，去掉紅色的外種皮后把種子置于低溫4℃保存，結(jié)果1年內(nèi)，實(shí)驗(yàn)時(shí)種子可以隨時(shí)取用，這就給試驗(yàn)帶來很大的方便。但是，通過對新種子和舊種子萌發(fā)率的檢測試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，新種子的萌發(fā)率比保存一年的舊種子高。種子在低溫條件儲(chǔ)存，雖然可能引起了細(xì)胞內(nèi)的某些生理生化的變化或打破了胚的生理平衡，從而可以增強(qiáng)種子的脫分化的能力，但是種子層積的時(shí)間過久，也可能細(xì)胞內(nèi)某些酶的生理結(jié)構(gòu)遭到破壞，從而影響了種子的萌發(fā)率。?

從上述分析中可以看出，目前七葉一枝花種子萌發(fā)繁殖技術(shù)存在下述不足：一是萌發(fā)繁殖時(shí)間較長，二是萌發(fā)率不高，三是不適合大規(guī)模生產(chǎn)。因此有必要研究開發(fā)更好的促使七葉一枝花種子快速萌發(fā)繁育的技術(shù)。?

技術(shù)方案?

為克服現(xiàn)有的七葉一枝花種子萌發(fā)技術(shù)中，種子處理操作麻煩且時(shí)間長的缺點(diǎn)，本發(fā)明提供了一種赤霉素與濕沙變溫層積處理使七葉一枝花種子快速萌發(fā)繁育的方法。該方法與現(xiàn)有的七葉一枝花的育苗技術(shù)相比較，實(shí)現(xiàn)了在保證萌發(fā)率較高的情況下萌發(fā)時(shí)間大為縮短，且使用本發(fā)明方法通過在實(shí)驗(yàn)室萌發(fā)后直接播種到大田，萌發(fā)率可達(dá)98.51%，種植到田間出苗率高達(dá)98%以上。?

實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的所采用的技術(shù)方案是用用赤霉素與濕沙變溫層積處理使七葉一枝花種子快速萌發(fā)繁育的方法，具體步驟如下：?

（1）對采摘的種子進(jìn)行預(yù)處理：將采摘的成熟的七葉一枝花種子去除穎殼后，裝密封袋密封，放入0~4℃保藏，當(dāng)觀察到種子的外種皮開始腐爛時(shí)取出種子，搓去紅色外種皮，剩下乳白色的種子，晾干水分，放置于0~4℃?zhèn)溆茫?

（2）用赤霉素溶液處理種子：在18~22℃的恒溫培養(yǎng)箱和弱光條件下，先用蒸餾水浸泡種子24~48h；再用濃度為200?mg/L～500?mg/L的赤霉素溶液浸泡乳白色的種子，浸泡24~48h后倒掉赤霉素溶液，用水沖洗浸泡后的種子，直到洗凈殘留赤霉素為止；?

（3）在無菌條件下為種子滅菌：在超凈工作臺(tái)內(nèi)，先用無菌水洗種子3~5次，然后使用質(zhì)量百分濃度70~80%酒精消毒30~45s，無菌水洗3~5次，再用質(zhì)量百分濃度0.1~0.15%升汞浸泡10~15分鐘，無菌水洗3~5次。?