[發(fā)明專利]飼料中聚醚類抗生素的檢測方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310341169.9
• 申請日: 2013-08-07
• 公開（公告）號: CN103389356A
• 公開（公告）日: 2013-11-13
• 發(fā)明（設計）人: 陳明;龔蘭;邵明誠;魏瑞成
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇省農(nóng)業(yè)科學院
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 江蘇圣典律師事務所 32237
• 代理人: 孫忠浩

1.一種飼料中聚醚類抗生素的檢測方法，其特征在于，通過混合酸性流動相同時使拉沙洛菌素、莫能菌素、鹽霉素和甲基鹽霉素在色譜分離柱上分離；具體檢測步驟如下：

1）向2g粉末狀飼料樣品中加入10ml體積比為10%的甲醇溶液，于渦旋混合器上震蕩5min，靜置10min后以5200r/min轉(zhuǎn)速離心10min，取上清液，重復上述提取步驟一次；將兩次所得上清液用氮氣吹干得殘渣，用1ml體積比為9:1的甲醇與水的混合液溶解所述殘渣后過0.22μm微孔濾膜，得到樣品濾液；

2）混合酸性流動相經(jīng)脫氣機去除空氣后通過液相泵經(jīng)安全開關(guān)流入高效液相色譜儀，流速為0.7ml/min，柱溫40℃，通過加樣器加入步驟1所述樣品濾液10μl；

3）對步驟2中經(jīng)色譜柱分離后的物質(zhì)進行熒光檢測，設定熒光檢測器激發(fā)波長為310nm，發(fā)射波長為420nm，獲得拉沙洛菌素的檢測結(jié)果；

4）將步驟3中經(jīng)熒光檢測后的混合液通過反流保護器導入體積為0.1ml的反應器A中；

5）在反應器A中，通過衍生泵A以0.3ml/min的速度向步驟3所述混合液中加入衍生試劑A，反應溫度為室溫，所述衍生劑A為濃硫酸與甲醇按體積比4：96混合所得；

6）在體積為1.4?ml的反應器B中通過衍生泵B以0.3ml/min的速度向步驟5所述混合液中加入衍生劑B，反應溫度為90℃，所述衍生劑B為香蘭醛與甲醇按重量/體積比6:95混合所得；

7）將紫外檢測器波長設為520nm，對步驟6所述反應后溶液進行檢測，獲得莫能菌素、鹽霉素和甲基鹽霉素檢測結(jié)果，檢測后的混合液經(jīng)背壓調(diào)節(jié)器，流入廢棄液收集瓶。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種聚醚類抗生素檢測方法，其特征在于所述混合酸性流動相為甲醇與5%的乙酸以體積比為9:1混合所得。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種聚醚類抗生素檢測方法，其特征在于：步驟2采用的色譜分離柱為Z0RBAX?SB-C18型填充柱。

4.根據(jù)權(quán)利要求1-3所述一種聚醚類抗生素檢測方法，其特征在于所述安全開關(guān)設置在510psi時開啟。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述一種聚醚類抗生素檢測方法，其特征在于所述背壓調(diào)節(jié)器設定為100psi。