[發明專利]一種從褐藻中提取均苯三酚的方法

有效

• 申請號: 201310340715.7
• 申請日: 2013-08-07
• 公開（公告）號: CN103421852A
• 公開（公告）日: 2013-12-04
• 發明（設計）人: 宋偉國;宋成剛;彼得.普勞克斯;林文翰;王福州;夏艷
• 申請（專利權）人: 壽光富康制藥有限公司;濰坊和康生物技術有限公司
• 主分類號: C12P7/22
• 分類號: C12P7/22;C12R1/685;C12R1/69;C12R1/72;C12R1/19
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技術領域

本發明屬于中藥領域，特別涉及一種從褐藻中提取均苯三酚的方法。

背景技術

褐藻，為海藻中的三大類群之一，其除含有大量的褐藻膠、甘露醇、碘、褐藻酸類和無機鹽等成分外，還有一種具有生物活性和醫藥價值的特殊成分，這種成分被稱為褐藻多酚，其是一類具有均苯三酚基本結構單元的小分子或高分子多酚類物質，其中小分子量褐藻多酚有六七十種，主要具有以下種類：多羥基聯苯(Fucols)類、多羥基苯醚(Phlorthols)類、混合多羥基聯苯多苯醚(Fucophloretho1)類、多(間、鄰)羥基苯醚(Fuhalols)類、二苯雜二氧和二苯呋喃(Eckols)類等。文獻報道藻類多酚的主要提取方法由極性溶劑提取法、超臨界提取法、超聲法等

褐藻多酚是一類結構復雜，純化困難，易于氧化的天然物質，由于結構中存在大量的羥基，因此具有較好的水溶性，據報道，褐藻多酚具有抗炎、抗菌、抗凝血、抗腫瘤、抗氧化等作用。

均苯三酚，化學名：1，3，5-三羥基苯。該化合物能直接作用于胃腸道和泌尿生殖道平滑肌，是親肌性非阿托品非罌粟堿類純平滑肌解痙藥。與其它平滑肌解痙藥相比，其特點是不具有抗膽堿作用，在解除平滑肌痙攣的同時，不會產生一系列抗膽堿樣副作用，不會引起低血壓、心率加快、心率失常等癥狀，對心血管功能沒有影響。動物藥理試驗顯示，它只作用于痙攣平滑肌，對正常平滑肌影響極小，用于治療消化系統和膽道功能障礙引起的劑型痙攣性疼痛，急性痙攣性尿道、膀胱、腎絞痛；婦科痙攣性疼痛。均苯三酚原料通常采用化學合成的方式生產，例如中國發明專利申請02137588.7，公開了一種合成均苯三酚的方法，其采用絡合劑無水三氯化鋁與1，3，5-三甲氧基苯進行絡合反應，然后在濃鹽酸中進行水解反應，水解液經冷卻結晶得均苯三酚粗品。中國發明專利申請03128817.0公開以1，3，5-三甲基苯為原料，先在烴類有機溶劑中與路易斯酸反應形成中間體，然后經無機酸酸性水解、分層、水層結晶、再度結晶而制備均苯三酚的方法。上述反應采用多種化學試劑，環保性差。

褐藻多酚具有均苯三酚基本結構單元，因此可能成為生產均苯三酚的天然原料，但褐藻中多酚化合物成分復雜，分離純化難度極大，所以多年來的研究一直徘徊在簡單的粗提物和部分結構簡單的成分上。對于單體均苯三酚的單獨提取未見報道，本發明克服現有技術的困難，采用微波提取聯合微生物發酵的方法制備均苯三酚單體。首先采用來源廣泛、價格低廉的褐藻作為原料，利用微波法提取褐藻多酚粗提物，再采用微生物降解法將褐藻多酚降解為均苯三酚單體，發酵周期短，副產物較少，分離純化簡單。此工藝過程環保，無污染，產物易純化，純度高，使得均苯三酚的收率達到4-5％。

發明內容

本發明提供一種從褐藻中提取均苯三酚的方法，所述方法首先采用褐藻作為原料，利用微波法提取褐藻多酚粗提物，再采用微生物降解法將褐藻多酚降解為均苯三酚單體，所述方案中均苯三酚的收率達4-5％。

本發明所述的從褐藻中提取均苯三酚的方法，包括以下步驟：

以褐藻為原料，采用微波法進行提取；收集微波提取液，離心取上清液，用氯仿進行萃取，將萃取液濃縮得褐藻多酚粗提物；將得到的褐藻多酚粗提物采用微生物發酵，將多酚降解為均苯三酚；將發酵液調節pH至5-6，獲得富含均苯三酚單體的發酵液。

優選地，本發明所述的從褐藻中提取均苯三酚類物質的方法，包括以下步驟：

(1)、取褐藻樣品，清洗除雜，破碎；

(2)、加入堿水溶液，微波提取30s至2小時；將微波提取液離心，收集上清液，用酸水調節之pH值4.0，用膜過濾方法截取分子量小于10000餾份，采用真空旋轉蒸發得褐藻多酚粗提物；

(3)加入褐藻多酚粗提物質量3-20倍的水，加入微生物所需營養物質及發酵微生物進行發酵，待發酵完畢后，調節發酵液pH至5-6，得富含均苯三酚單體的提取液。

上述方法中，所述堿水溶液為：氨水，Na2CO3，NaOH。

上述方法中，所述的發酵微生物優選所述曲霉為黑曲霉、米曲霉、假絲酵母、大腸桿菌。

具體實施方式

實施例1

一種從褐藻中提取均苯三酚的方法，包括以下步驟：

(1)、取褐藻樣品，清洗除雜，破碎；

(2)、80％的氨水溶液，45℃微波提取2分鐘；將微波提取液離心，收集上清液，將濾液旋轉蒸發濃縮至原體積的1/10，加入旋蒸后得到的濾液體積15倍量體積的氯仿進行萃取，將萃取液真空旋轉蒸發得褐藻多酚粗提物；經測定褐藻多酚的提取率為6.4％