[發明專利]利用凝膠滲透色譜處理生物檢材的安眠鎮靜類藥物檢驗方法

有效

• 申請號: 201310340446.4
• 申請日: 2013-08-07
• 公開（公告）號: CN103558300A
• 公開（公告）日: 2014-02-05
• 發明（設計）人: 欒玉靜;王瑞花;董穎;張蕾萍;杜鴻雁;常靖;王芳琳;王炯;張云峰;侯小平;于忠山;何毅;崔冠峰
• 申請（專利權）人: 公安部物證鑒定中心
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
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• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及刑事偵查領域的藥物、毒物檢測方法，特別涉及一種利用凝膠滲透色譜處理生物檢材的安眠鎮靜類藥物檢驗方法。?

背景技術

隨著技術的進步，對藥物、毒物分析檢驗的要求越來越高，包括高重現性、高回收率、低檢出限和操作簡單易行等，因而急需建立一種簡單、快速、靈敏度和回收率高的前處理方法。目前現有的前處理技術主要有液液萃取、固相萃取、固相微萃取等，這幾種前處理技術都是根據不同化合物的性質對其進行分離提取，存在操作步驟繁瑣、容易出現漏檢情況。在樣品前處理技術中，凝膠滲透色譜技術作為一種新型的分析技術，儀器再生能力強，無可逆吸附，對所有樣品都能夠完全洗脫等優點已顯現了其潛在的應用前景。?

凝膠滲透色譜的理論、試驗技術、儀器性能尤其是高效填充柱等方面的快速發展，其應用范圍逐漸從生物化學和高分子化學擴展到工業、農業、醫藥、衛生等領域。目前國內外的凝膠滲透色譜研究多集中于對植物性產品如蔬菜、水果、谷物等的處理。由于血液、尿液和肝組織等生物檢材中含有的蛋白質及油脂等大分子雜質難以去除，因此還沒有針對血液、尿液和肝組織等生物檢材中某類毒物的系統檢驗方法。在國內公安系統的毒物分析檢測中，凝膠滲透色譜的應用還處于起步階段，尚缺少有效可行的方法。因而建立液、尿液和肝組織等生物檢材中常見藥物、毒物的凝膠滲透色譜處理技術，并應?用于實際辦案中是當前的一項關鍵任務。?

發明內容

針對現有技術中存在的不足，本發明的目的在于提供一種利用凝膠滲透色譜處理生物檢材的安眠鎮靜類藥物檢驗方法，提高對生物檢材中蛋白以及油脂等大分子雜質的去除效率，使得對生物檢材中的擬除蟲菊酯類農藥進行檢測時分離效果好、靈敏度高。?

本發明的技術方案是這樣實現的：?

利用凝膠滲透色譜處理生物檢材的安眠鎮靜類藥物檢驗方法，包括如下步驟：(1)在含有安眠鎮靜類藥物的生物檢材中加入有機溶劑A，離心，分離有機相，將得到的有機相濃縮至干，再用有機溶劑A溶解，過有機微孔濾膜后得提取液；(2)提取液進凝膠滲透色譜凈化柱，用有機溶劑B淋洗，收集淋洗液，在濃縮儀上吹干，用有機溶劑C溶解后得到待測液；凝膠滲透色譜凈化柱的填充相為苯乙烯-二乙烯苯共聚物；(3)利用氣相色譜儀對待測液進行檢測。?

本發明的有益效果是：本發明將凝膠滲透色譜技術應用到毒物分析領域，選擇有代表性的6種安眠鎮靜類藥物，建立血液、尿液和肝組織中簡單、快速、靈敏度和回收率高的前處理技術，縮短前處理時間、減少分析成本、提高檢測結果的可靠，以解決毒物分析中檢材種類繁多、成分復雜的問題，為提高公安行業毒物分析檢驗工作的效率提供保障。?

本發明優選了提取劑，采用凝膠滲透色譜凈化，氣相色譜檢測，建立了一種快速、準確、靈敏地測定血液、尿液、肝組織中6種安眠鎮靜類藥物的較理想的方法，具有以下幾個優點：?

1簡單、高效、自動化的樣品前處理方法。?

利用乙酸乙酯和環己烷的混合溶液、乙酸乙酯、二氯甲烷、環己烷或環己醇和丁酸丙酯的混合物作為血液、尿液和肝組織中6種安眠鎮靜類藥物的提取溶劑，采用體積比為1∶1的環己烷和乙酸乙酯混合溶液作為流動相，使用凝膠滲透色譜能夠有效地凈化血液、尿液、肝組織提取液中的蛋白、油脂、色素等大分子雜質，實現分離并富集安眠鎮靜類藥物。?

2毛細管氣相色譜電子捕獲檢測器和氮磷檢測器測定生物檢材中6種安眠鎮靜類藥物。?

該法檢測生物樣品中6種安眠鎮靜類藥物的最小檢出質量比范圍30～80ng/mL，精密度1.7％～9.3％，不同添加濃度的平均回收率64.9～96.4％。通過GC/MS對6種安眠鎮靜類藥物進行確證，空白樣品中未檢出6種安眠鎮靜類藥物。?

3對凝膠滲透色譜凈化條件進行了優化、對外標法定量、添加回收率以及GC-ECD、GC-NPD檢測進行了研究，建立了一種快速有效的檢測血液、尿液和肝組織中6種安眠鎮靜類藥物的較為理想的方法。?

優選使用環己醇和丁酸丙酯的混合物、異戊醚和環庚烷的混合溶液、以及環己酮和乙二醇二乙醚的混合溶液作為提取溶劑，并且使用凝膠滲透色譜凈化技術，能夠提高對血液、尿液和肝組織中蛋白以及油脂等大分子雜質的去除效率，并且采用GC-ECD和GC-NPD檢測6種安眠鎮靜類藥物農藥，使得本發明具有分離效果好、靈敏度高等優點。?

附圖說明

圖1A為地西泮、艾司唑侖、阿普唑侖和三唑侖的標準品色譜圖；?

圖1B為氯丙嗪和異丙嗪的標準品色譜圖；?