[發明專利]一株桃色頂孢霉JX524288及其應用

有效

• 申請號: 201310335286.4
• 申請日: 2013-08-05
• 公開（公告）號: CN103436452A
• 公開（公告）日: 2013-12-11
• 發明（設計）人: 林志偉;孫冬梅;董雪梅
• 申請（專利權）人: 黑龍江八一農墾大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;A01N63/04;A01P3/00;A01P21/00;C12R1/645
• 代理公司: 大慶市建華專利事務所 23119
• 代理人: 孫薇

技術領域

本發明屬于微生物領域，涉及一株桃色頂孢霉JX524288及其應用，特別涉及一株能夠廣譜拮抗病原真菌以及促進大豆萌發的桃色頂孢霉JX524288及其應用。

背景技術

植物病害是嚴重危害農業生產的自然災害之一，據聯合國糧農組織估計，世界上每年因病害造成的糧食減產在10%以上。使用化學殺菌劑可以有效控制植物病害的為害，但化學殺菌劑存在污染環境、破壞生態平衡、藥物殘留等問題,尤其是20世紀50年代以來，全球環境遭到空前破壞和污染，1992年聯合國環境與發展大會通過了《21世紀議程》，確立了可持續發展在全球經濟和社會中的戰略地位，因此，植物病害的生物防治越來越受到重視。

生物防治的科學記載是從sanfprd(1926)報道土壤中某些拮抗性微生物對于土傳病原菌的抑制性開始的。我國植物生防的研究工作開始于50年代初期，70年代以來，病害生物防治的研究和實踐十分活躍，而且發展迅速。近幾年來，國內外有關生物防治的文獻資料急劇增加，生物防治的生產實踐也在擴大。

生物防治微生物從腐生的土壤微生物到植物體微生態系中微生物的利用；防治病害的種類從種傳和土傳病害到地上部的氣傳和蟲傳病害。由于生物防治具有對環境、生態和人類健康較為安全的優點，因此，世界各國十分的重視生防微生物的開發與研究。

目前的研究已發現許多微生物具有生防功能，在生產上廣泛應用的真菌有木霉、毛殼菌、酵母菌、淡紫擬青霉、厚壁孢子輪枝菌及菌根真菌等。李莉報導了頂孢霉對菜青蟲的生長抑制作用，宋麗雯報導了頂孢霉對蚜蟲的抑制作用，但頂孢霉在抑制植物病原真菌中還未見報道。

發明內容

本發明的第一目的是提供一株桃色頂孢霉JX524288，具有廣譜的拮抗病原真菌效果的同時，其代謝物對大豆種子萌發具有一定的促進作用，為植物病害生物防治提供新的微生物資源。

本發明的第二目的是提供上述桃色頂孢霉JX524288的用途。

本發明通過以下技術方案來實現：

一、一株桃色頂孢霉（Acremonium?persicinum）JX524288，其保藏編號為CCTCC?NO:M2013200。

該微生物的無性階段屬于半知菌門Deuteromycota，絲孢綱Hyphomycetes，叢梗孢目Moniliales，淡色菌科Moliliaceae。

在大慶選校園內山坡上，用鐵鍬挖取土壤深度約為4-10cm的土樣，裝入取樣紙袋中，將紙袋標記好并帶回實驗室進行土壤內真菌的分離得到。本發明桃色頂孢霉在固體查氏培養基平板中的菌落菌絲為絨氈狀，菌落表面為淡粉色，顯微觀察顯示，該菌株的產孢結構為瓶梗，瓶梗底部膨大，互生，孢子著生在瓶梗頂端。

本發明桃色頂孢霉真菌菌株的系統發育學鑒定。通過真菌通用引物ITS4和ITS5利用PCR擴增出546bp的rRNA基因，將此序列通過BLAST程序與GenBank中收集的核苷酸序列對比，結果表明，相似性在99%以上的有30個菌株核苷酸序列，主要是頂孢霉菌（Acremonium）、子囊菌（Ascomycota）、蟲草菌（Cordyceps），菌株Acremonium?persicinum?FN706545與拮抗真菌的序列非常相似，長度相差1個堿基。比對鑒定的結果表明，這一菌株為桃色頂孢霉（Acremonium?persicinum）。

本發明菌株的序列與GenBank中與其相似的20個菌株的序列用clustalx軟件進行比較，再用MEGA4程序中Neighbor?Joining方法建立系統發育樹，發現，拮抗真菌與Acremonium?persicinum?FN706545的親緣關系最近，達99%，驗證了該菌株為桃色頂孢霉（Acremonium?persicinum）。

該真菌菌株的培養條件為：在PDA培養基上，其菌絲及孢子的生長狀態最佳，氣生菌絲生長發達，產孢量較多。以查氏培養基為基礎培養基，菌絲生長的最適碳源為蔗糖、氮源為胰蛋白胨；在pH8.5、溫度為30℃時可提高菌絲生長速率，添加無機離子Zn²⁺對菌絲生長有利。

二、上述的桃色頂孢霉（Acremonium?persicinum）JX524288在拮抗病原真菌以及促進大豆萌發上的應用。