[發(fā)明專利]產油酵母和真菌中類胡蘿卜素的產生

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310334980.4
• 申請日: 2006-03-20
• 公開（公告）號: CN103589650A
• 公開（公告）日: 2014-02-19
• 發(fā)明（設計）人: 理查德·貝利;凱文·T·馬登;喬舒亞·特魯哈特
• 申請（專利權）人: 米克羅比亞公司
• 主分類號: C12N1/15
• 分類號: C12N1/15;C12N15/80;C12P23/00;A23L1/275;A23K1/16;C12R1/645
• 代理公司: 北京律盟知識產權代理有限責任公司 11287
• 代理人: 沈錦華

1.一種重組耶氏酵母屬(Yarrowia)真菌，其特征在于：

a.所述真菌因可以積累占其細胞干重至少約20％的脂質而為產油真菌；且

b.所述耶氏酵母屬真菌產生至少一種類胡蘿卜素，并且其可積累占其細胞干重至少約1％的所產生的類胡蘿卜素；

其中所述真菌包含至少一種產類胡蘿卜素修飾，且其中所述至少一種產類胡蘿卜素修飾賦予所述真菌產生占其細胞干重至少約1％的水平的所述至少一種類胡蘿卜素的能力，或賦予所述真菌產生至少一種所述真菌不會自然產生的類胡蘿卜素的能力，

其中所述至少一種產類胡蘿卜素修飾增加或降低產類胡蘿卜素多肽的表達或活性，所述產類胡蘿卜素多肽選自由以下多肽組成的群組：類異戊二烯生物合成多肽、類胡蘿卜素生物合成多肽、類異戊二烯生物合成競爭劑多肽和其組合，且其中：

(i)所述類異戊二烯生物合成多肽選自由以下組成的群組：HMG-CoA還原酶多肽和GGPP合酶多肽；和/或

(ii)所述類胡蘿卜素生物合成多肽選自由以下組成的群組：類胡蘿卜素酮酶多肽和類胡蘿卜素羥化酶多肽；和/或

(iii)所述類異戊二烯生物合成競爭劑多肽是角鯊烯合酶多肽。

2.根據(jù)權利要求1所述的耶氏酵母屬真菌，其中所述耶氏酵母屬真菌為解脂耶氏酵母(Yarrowia?lipolytica)菌株。

3.根據(jù)權利要求1所述的耶氏酵母屬真菌，其中所述真菌含有至少一種產油修飾。

4.根據(jù)權利要求3所述的耶氏酵母屬真菌，其中所述至少一種產油修飾改變所述真菌的產油能力。

5.根據(jù)權利要求3所述的耶氏酵母屬真菌，其中所述至少一種產油修飾增加至少一種產油多肽的表達或活性。

6.根據(jù)權利要求3所述的耶氏酵母屬真菌，其中所述至少一種產油修飾降低至少一種產油多肽的表達或活性。

7.根據(jù)權利要求3所述的耶氏酵母屬真菌，其中所述至少一種產油修飾增加至少一種產油多肽的表達或活性，并且降低至少一種其它產油多肽的表達或活性。

8.根據(jù)權利要求5或6所述的耶氏酵母屬真菌，其中所述至少一種產油多肽選自由以下多肽組成的群組：乙酰輔酶A羧化酶多肽、丙酮酸脫羧酶多肽、異檸檬酸脫氫酶多肽、ATP-檸檬酸裂解酶多肽、蘋果酸酶多肽、AMP脫氨酶多肽和其組合。

9.根據(jù)權利要求5或6所述的耶氏酵母屬真菌，其中所述至少一種產油多肽為至少一種選自由表1到表6中任一表中的多肽組成的群組的多肽。

10.根據(jù)權利要求5或6所述的耶氏酵母屬真菌，其中所述至少一種產油修飾包含在所述真菌中表達至少一種異源產油多肽。

11.根據(jù)權利要求10所述的耶氏酵母屬真菌，其中所述至少一種產油修飾包含表達至少一種編碼所述至少一種異源產油多肽的異源基因。

12.根據(jù)權利要求10所述的耶氏酵母屬真菌，其中所述至少一種異源產油多肽包含至少兩種異源產油多肽。

13.根據(jù)權利要求12所述的耶氏酵母屬真菌，其中所述至少兩種異源產油多肽是來自單一原始生物體。

14.根據(jù)權利要求12所述的耶氏酵母屬真菌，其中所述至少兩種異源產油多肽是來自至少兩種不同的原始生物體。

15.根據(jù)權利要求1所述的耶氏酵母屬真菌，其中所述至少一種產類胡蘿卜素修飾賦予所述真菌產生占其細胞干重至少約1％的水平的所述至少一種類胡蘿卜素的能力。

16.根據(jù)權利要求1所述的耶氏酵母屬真菌，其中所述至少一種產類胡蘿卜素修飾賦予所述真菌產生至少一種所述真菌不會自然產生的類胡蘿卜素的能力。

17.根據(jù)權利要求1所述的耶氏酵母屬真菌，其中所述真菌另外包含至少一種產油修飾，其中所述產油修飾改變所述真菌的產油能力或賦予所述真菌產油能力。

18.根據(jù)權利要求1所述的耶氏酵母屬真菌，其中所述至少一種類胡蘿卜素選自由蝦青素、β-胡蘿卜素、角黃素、玉米黃素、葉黃素、番茄紅素和其組合組成的群組。

19.根據(jù)權利要求1所述的耶氏酵母屬真菌，其中所述至少一種類胡蘿卜素主要為蝦青素。