[發明專利]豬苓密環菌三級種的育種方法

無效

• 申請號: 201310334408.8
• 申請日: 2013-08-02
• 公開（公告）號: CN103430768A
• 公開（公告）日: 2013-12-11
• 發明（設計）人: 楊新慶
• 申請（專利權）人: 洋縣新成魔芋菌業科技有限公司
• 主分類號: A01G1/04
• 分類號: A01G1/04
• 代理公司: 西安弘理專利事務所 61214
• 代理人: 李娜

技術領域

本發明屬于微生物育種技術領域，具體涉及一種豬苓密環菌三級種的育種方法。

背景技術

豬苓為我國常用的菌類藥材，別名野豬糞、地烏桃、粉豬苓等，已有2000多年的藥用歷史，為常用中藥材，被《中華人民共和國藥典》1990年版收載，具有利尿治水腫的功效。近年來研究發現，豬苓含豬苓多糖(glucan)，具有抗癌功效，是目前腫瘤治療藥物的主要原料之一。密環菌屬擔子菌綱傘菌目真菌的一屬，密環菌分布很廣，我國的云南、河北、山西、黑龍江、吉林、浙江、福建、廣西、陜西、甘肅、新疆、四川、西藏等地均有，主要見于硬木森林或針葉樹混合林中。“豬苓與密環菌的關系”（真菌學報，1992，,1（2）：142～145）表明，豬苓菌核與密環菌是一種共生關系，密環菌在豬苓菌核成長過程中可促進其快速生長。

近年來，隨著豬苓藥用價值的提高，其市場需求量急劇增大，豬苓的人工育種栽培越來越普及，豬苓密環菌的三級種需求量也越來越大，密環菌菌絲體的培養有液體深層發酵和固體發酵兩種方法。液體深層發酵常受光照、水分、透氣性等因素的影響，菌種成活率較低，且菌種生長較慢；采用固體發酵是目前較為常見的栽培方法，通常采用菌棒作為培養菌材，但成本較大，或用闊葉顆粒與鋸末屑混合物作為基料，再與麩皮、白糖、石膏等輔料混合而制成的培養基，其成分復雜，成本高，且這種粉末狀基料在灌裝時不方便，效率較低。

發明內容

本發明的目的在于提供一種豬苓密環菌三級種的育種方法，解決了現有技術培育豬苓密環菌三級種時菌種生長緩慢、培育成本高的問題。

本發明所采用的技術方案是：豬苓密環菌三級種的育種方法，包括如下步驟：

第一步，備料

采割直徑為5～10mm的闊葉樹枝條，將枝條切成28～32mm的小段；

第二步，浸泡

將第一步制得的樹枝條小段放入容器，加入清水至沒過所述樹枝條小段，并浸泡23～25小時；

第三步，裝瓶

將經過第二步處理的樹枝條小段撈出，瀝水，裝入菌種瓶，裝入量為菌種瓶容量的95～98%，再加清水至菌種瓶瓶口，然后旋緊菌種瓶瓶蓋；

第四步，滅菌

把第三步獲得的菌種瓶放入滅菌箱滅菌，滅菌箱的溫度設置為105～115℃，壓強0.07～0.09MPa，持續3小時；

第五步，冷卻

將經過第四步處理的菌種瓶取出，放置于室溫下，使得菌種瓶的溫度自然冷卻至25℃以下；

第六步，接種

將經過第五步處理的菌種瓶中的水倒出，至菌種瓶中的空余部分占菌種瓶容量的45～50%，然后接入豬苓密環菌原種；

第七步，培養

將接種之后的菌種瓶放置于培養箱中，培養箱的溫度設置為20～25℃，培養28～32天，直至菌種瓶中長滿菌絲，制得豬苓密環菌三級種。

本發明的特點還在于，

第一步中的闊葉樹為椴樹、樺樹、楓樹、櫟樹、柞樹或榛樹中的一種。

第一步中的闊葉樹枝條為椴樹、樺樹、楓樹、櫟樹、柞樹、榛樹中的至少兩種樹的枝條的混合。

本發明的有益效果是：本發明的豬苓密環菌三級種的育種方法直接采用闊葉枝條切段作為基料，原料來源廣，比傳統采用菌棒培養成本低；并且本發明所采用的原料灌裝方便，生產效率高；本發明的育種方法有效地避免了有害物質和雜菌的影響，菌種成活率可達99.9%。

具體實施方式

下面結合具體實施方式對本發明進行詳細說明。

實施例1

豬苓密環菌三級種的育種方法，包括如下步驟：

第一步，備料

采割直徑為5mm的椴樹枝條，將枝條切成28mm的小段；

第二步，浸泡

將第一步制得的樹枝條小段放入容器，加入清水至清水沒過樹枝條小段，并浸泡23小時；

第三步，裝瓶

將經過第二步處理的樹枝條小段撈出，瀝水，裝入菌種瓶，裝入量為菌種瓶容量的95%，再加清水至菌種瓶瓶口，然后旋緊菌種瓶瓶蓋；

第四步，滅菌

把第三步獲得的菌種瓶放入滅菌箱滅菌，滅菌箱的溫度設置為105℃，壓強0.07MPa，持續3小時；

第五步，冷卻

將經過第四步處理的菌種瓶取出，放置于室溫下，使得菌種瓶的溫度自然冷卻至23℃；

第六步，接種

將經過第五步處理的菌種瓶中的水倒出，至菌種瓶中的空余部分占菌種瓶容量的45%，然后接入豬苓密環菌原種；

第七步，培養