[發(fā)明專利]一種枯草芽孢桿菌及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201310327938.X
• 申請(qǐng)日: 2013-07-31
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103468604A
• 公開(kāi)（公告）日: 2013-12-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 章亭洲
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 浙江科峰生物技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;A23K1/14;C12R1/125
• 代理公司: 杭州浙科專利事務(wù)所(普通合伙) 33213
• 代理人: 吳秉中

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物工程技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種枯草芽孢桿菌及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

飼料級(jí)微生物添加劑是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一類新型飼料添加劑，在提高飼料利用率，增加生產(chǎn)性能，調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)平衡，增加免疫力等方面具有顯著的促進(jìn)作用。目前在飼料及動(dòng)物生產(chǎn)上使用較多的微生物有乳酸菌、酵母菌、芽孢桿菌及光合細(xì)菌，其中芽孢桿菌具有抗逆性強(qiáng)、耐高溫高壓、耐酸堿膽鹽、易貯存等獨(dú)特的生物特性，從動(dòng)物生產(chǎn)和飼料工業(yè)角度評(píng)價(jià)，其能更好地滿足飼料用微生物現(xiàn)代工業(yè)生產(chǎn)的要求。

枯草芽孢桿菌在代謝過(guò)程種可產(chǎn)生大量的蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶及其他有益因子，進(jìn)入生物體內(nèi)后能快速定殖，在腸道內(nèi)形成良好的微生態(tài)環(huán)境，具有加強(qiáng)動(dòng)物消化能力，降解抗?fàn)I養(yǎng)因子，增加飼料利用率，增強(qiáng)動(dòng)物免疫力等功效。我國(guó)農(nóng)業(yè)部公布的可以直接飼喂動(dòng)物的飼料級(jí)微生物添加劑菌種中就包括了枯草芽孢桿菌，其作為安全益生菌，現(xiàn)已在飼料領(lǐng)域得到廣泛的應(yīng)用。

豆粕是畜禽最重要的植物性蛋白源,其粗蛋白含量高達(dá)43%～48%，并有較平衡的氨基酸組成，尤其是含有其它植物性飼料易缺的賴氨酸,其含量高達(dá)2.?5%～2.?8%。但豆粕中還存在多種抗?fàn)I養(yǎng)因子，極大地影響了豆粕的飼用價(jià)值。胰蛋白酶抑制素是豆粕中主要的抗?fàn)I養(yǎng)因子，在豆粕中的含量為2%左右。胰蛋白酶抑制素能阻礙腸道內(nèi)蛋白水解酶的作用而使蛋白質(zhì)消化率下降，還能作用于胰腺本身，刺激胰腺分泌過(guò)多的胰腺酶，造成蛋白質(zhì)內(nèi)源代謝損失，導(dǎo)致動(dòng)物出現(xiàn)消化吸收功能失調(diào)或紊亂,抑制機(jī)體的生長(zhǎng)現(xiàn)象。利用微生物固態(tài)發(fā)酵可改善這一狀況。枯草芽孢桿菌具有很強(qiáng)的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶等活性。

但是，現(xiàn)報(bào)道生產(chǎn)的微生物菌株存在諸多問(wèn)題，如發(fā)酵時(shí)間長(zhǎng)（因此容易引起霉變）、發(fā)酵過(guò)程水分過(guò)高，抗?fàn)I養(yǎng)因子的降解不徹底、發(fā)酵后粗蛋白和小肽（酸溶蛋白）含量不高等問(wèn)題。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的問(wèn)題，本發(fā)明的目的在于設(shè)計(jì)提供一種枯草芽孢桿菌及其應(yīng)用的技術(shù)方案。

本發(fā)明中的枯草芽孢桿菌（Bacillus?subtilis）菌株KF-2，保藏單位：中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，地址：北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院，保藏日：2013年06月09日，保藏號(hào)：CGMCCNo.7690。

所述的枯草芽孢桿菌菌株KF-2在發(fā)酵生產(chǎn)富含活性肽蛋白飼料中的應(yīng)用。

所述的一種利用如權(quán)利要求1所述的枯草芽孢桿菌菌株KF-2發(fā)酵生產(chǎn)富含活性肽蛋白飼料的方法，其特征在于包括以下工藝步驟：

1）將所述的枯草芽孢桿菌菌株KF-2經(jīng)過(guò)平板培養(yǎng)基活化、種子搖瓶培養(yǎng)、一級(jí)搖瓶培養(yǎng)或發(fā)酵罐逐級(jí)放大培養(yǎng)，得到種子液；

2）經(jīng)步驟1）得到的種子液接種至豆粕中進(jìn)行固態(tài)發(fā)酵；

3）將步驟2）得到的發(fā)酵產(chǎn)物進(jìn)行烘干、粉碎，即得到富含活性肽蛋白飼料。

所述的一種利用枯草芽孢桿菌菌株KF-2發(fā)酵生產(chǎn)富含活性肽蛋白飼料的方法，其特征在于所述的步驟2）中接種量為豆粕重量的8～12%。

所述的一種利用枯草芽孢桿菌菌株KF-2發(fā)酵生產(chǎn)富含活性肽蛋白飼料的方法，其特征在于所述的步驟2）中固態(tài)發(fā)酵條件為：接種時(shí)進(jìn)行充分?jǐn)嚢瑁l(fā)酵過(guò)程中監(jiān)測(cè)溫度變化，溫度高于50℃時(shí)，進(jìn)行翻料處理，發(fā)酵時(shí)間為48?h。

所述的一種枯草芽孢桿菌菌株KF-2發(fā)酵生產(chǎn)富含活性肽蛋白飼料的方法，其特征在于所述的步驟3）中發(fā)酵產(chǎn)物烘干至水分≤12%，粉碎細(xì)度40～60目。

本發(fā)明誘變得到一種枯草芽孢桿菌菌株KF-2，該菌株能夠分泌豐富的蛋白酶等酶系，具有顯著的發(fā)酵豆粕的能力。利用該菌株及相應(yīng)的發(fā)酵工藝對(duì)豆粕進(jìn)行固態(tài)發(fā)酵處理，可降解豆粕粉中大分子量的蛋白質(zhì)，使其轉(zhuǎn)化成具有生物活性的小肽蛋白，促進(jìn)了動(dòng)物的吸收。同時(shí)，豆粕發(fā)酵后其中的抗?fàn)I養(yǎng)因子和抗原蛋白得到了有效地降解，顯著提高豆粕的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)，提高動(dòng)物對(duì)豆粕的利用效率并改善動(dòng)物腸道和促進(jìn)健康。

使用該菌株發(fā)酵豆粕后顯著改善了豆粕的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，測(cè)定一些指標(biāo)結(jié)果為：發(fā)酵豆粕的粗蛋白含量達(dá)到51%以上，酸溶蛋白含量達(dá)到8%以上，活菌數(shù)達(dá)到40億個(gè)/克發(fā)酵豆粕，揮發(fā)性鹽基氮低于50?mg/100g，同時(shí)含有較高的蛋白酶活性。

具體實(shí)施方式

為了使本發(fā)明更加容易理解，下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍，下列實(shí)施例中未提及的具體實(shí)驗(yàn)方法，通常按常規(guī)實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行。