[發(fā)明專利]一種產(chǎn)朊假絲酵母菌株及其應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201310327937.5
• 申請日: 2013-07-31
• 公開（公告）號: CN103468594A
• 公開（公告）日: 2013-12-25
• 發(fā)明（設計）人: 章亭洲
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江科峰生物技術有限公司
• 主分類號: C12N1/16
• 分類號: C12N1/16;A23K1/00;C12R1/72
• 代理公司: 杭州浙科專利事務所(普通合伙) 33213
• 代理人: 吳秉中

技術領域

本發(fā)明屬于生物工程技術領域，具體涉及一種產(chǎn)朊假絲酵母菌株及其應用。

背景技術

我國是一個飼料資源十分緊張的國家，人多地少，人畜爭糧的矛盾相當突出，尤其是蛋白質(zhì)飼料資源十分匱乏。目前飼料蛋白主要有魚粉和豆粕等，我國每年都大量進口。由于人類過度的捕撈和環(huán)境的逐漸惡化，魚粉日益供應不足且價格不斷增長，隨著畜牧業(yè)的可持續(xù)發(fā)展，蛋白質(zhì)飼料持續(xù)短缺并嚴重地制約著養(yǎng)殖業(yè)的進一步發(fā)展。因此，新型蛋白質(zhì)飼料開發(fā)及其安全高效利用顯得尤為迫切。

豆粕作為一種植物蛋白源替代魚粉成為必然的趨勢，近年來豆粕已經(jīng)成為養(yǎng)殖業(yè)中應用最為廣泛的蛋白質(zhì)飼料資源。然而，豆粕中含有大量的抗營養(yǎng)因子及抗原蛋白。抗營養(yǎng)因子如胰蛋白酶抑制因子、大豆寡糖、大豆凝集素、植酸、棉酚草酸鹽、芥子油甙、單寧等，抗原蛋白如大豆球蛋白（glycinin）和三種伴大豆球蛋白等。這些不良物質(zhì)的存在會損傷動物體小腸的形態(tài)結(jié)構(gòu)，影響營養(yǎng)物質(zhì)的吸收，進而影響動物體的健康。

研究表明微生物發(fā)酵法處理豆粕后可以降低抗營養(yǎng)因子和抗原蛋白的水平，顯著改善豆粕的營養(yǎng)品質(zhì)，實現(xiàn)豆粕的高效利用。

但是，現(xiàn)報道生產(chǎn)的微生物菌株存在諸多問題，如發(fā)酵時間長（因此容易引起霉變）、發(fā)酵過程水分過高，抗營養(yǎng)因子的降解不徹底、發(fā)酵后粗蛋白和小肽（酸溶蛋白）含量不高等問題。

發(fā)明內(nèi)容

針對現(xiàn)有技術存在的問題，本發(fā)明的目的在于設計提供一種能發(fā)酵豆粕等蛋白質(zhì)原料并高效降解各種抗營養(yǎng)因子和抗原蛋白的微生物菌株，以及利用該菌株發(fā)酵豆粕等蛋白質(zhì)原料生產(chǎn)富含活性肽的發(fā)酵方法的技術方案。

本發(fā)明中的產(chǎn)朊假絲酵母（Candida?utilis）菌株KF-1，保藏單位：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，保藏日：2013年06月09日，保藏號：CGMCCNo.7691。

所述的產(chǎn)朊假絲酵母菌株KF-1在發(fā)酵生產(chǎn)富含活性肽蛋白飼料中的應用。

所述的一種利用如權(quán)利要求1所述的產(chǎn)朊假絲酵母菌株KF-1發(fā)酵生產(chǎn)富含活性肽蛋白飼料的方法，其特征在于包括以下工藝步驟：

1）將所述的產(chǎn)朊假絲酵母菌株KF-1經(jīng)過平板培養(yǎng)基活化、種子搖瓶培養(yǎng)、一級搖瓶培養(yǎng)或發(fā)酵罐逐級放大培養(yǎng)，得到種子液；

2）經(jīng)步驟1）得到的種子液接種至豆粕中進行固態(tài)發(fā)酵；

3）將步驟2）得到的發(fā)酵產(chǎn)物進行烘干、粉碎，即得到富含小肽蛋白飼料。

4.如權(quán)利要求3所述的一種利用產(chǎn)朊假絲酵母菌株KF-1發(fā)酵生產(chǎn)富含活性肽蛋白飼料的方法，其特征在于所述的步驟2）中接種量為豆粕重量的8～12%。

所述的一種利用產(chǎn)朊假絲酵母菌株KF-1發(fā)酵生產(chǎn)富含活性肽蛋白飼料的方法，其特征在于所述的步驟2）中固態(tài)發(fā)酵條件為：接種時進行充分攪拌，發(fā)酵過程中監(jiān)測溫度變化，溫度高于50℃時，進行翻料處理，發(fā)酵時間為48?h。

所述的一種利用產(chǎn)朊假絲酵母菌株KF-1發(fā)酵生產(chǎn)富含活性肽蛋白飼料的方法，其特征在于所述的步驟3）中發(fā)酵產(chǎn)物烘干至水分≤12%，粉碎細度40～60目。

本發(fā)明中分離純化了產(chǎn)朊假絲酵母菌株KF-1，并利用該菌株對豆粕進行發(fā)酵處理，可以有效地降解豆粕中的抗營養(yǎng)因子和抗原蛋白，同時提高蛋白質(zhì)含量，尤其是產(chǎn)生豐富的活性小肽，顯著提高豆粕的營養(yǎng)品質(zhì)，提高動物對豆粕的利用效率和改善動物腸道和促進健康。

使用該菌株發(fā)酵豆粕后測定一些指標，粗蛋白含量達到51%以上，酸溶蛋白含量達到6%以上，活菌數(shù)達到20億個/克發(fā)酵豆粕，揮發(fā)性鹽基氮低于50mg/100g。

具體實施方式

為了使本發(fā)明更加容易理解，下面結(jié)合具體實施例，進一步闡述本發(fā)明。應理解，這些實施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍，下列實施例中未提及的具體實驗方法，通常按常規(guī)實驗方法進行。

實施例1：產(chǎn)朊假絲酵母菌株KF-1的分離純化和鑒定

該菌株最初是從自然條件下篩選獲得，后經(jīng)過本公司的多輪誘變育種后，菌株得到了遺傳改良，菌株的生產(chǎn)性能大大提高。

制備馬鈴薯培養(yǎng)基（PDA）從平板，從豆類等有機質(zhì)中分離培養(yǎng)，獲得產(chǎn)朊假絲酵母，獲得的菌株經(jīng)過菌落觀察、形態(tài)學顯微鑒定認為是產(chǎn)朊假絲酵母。

誘變條件：產(chǎn)朊假絲酵母的孢子懸浮液5?mL放在紫外燈（20?W）下，通過攪拌使照射均勻,照射時間為2?min。

誘變產(chǎn)生的菌株發(fā)酵豆粕的能力增強，表現(xiàn)在發(fā)酵豆粕后活菌數(shù)增強等方面，該菌株命名為產(chǎn)朊假絲酵母菌株KF-1。